劉月新++徐菲++劉芳++江星明

摘 要：結(jié)合學(xué)院實(shí)驗(yàn)室條件，對(duì)中藥學(xué)專業(yè)原有的薄層實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目進(jìn)行綠色化改進(jìn)。通過(guò)不斷地篩選、優(yōu)化，最終選擇開(kāi)設(shè)中藥一枝黃花的薄層色譜鑒別實(shí)驗(yàn)。改進(jìn)后的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目，與中藥專業(yè)結(jié)合緊密，操作簡(jiǎn)便，具有良好的實(shí)驗(yàn)教學(xué)效果。實(shí)驗(yàn)的改進(jìn)，為促進(jìn)分析化學(xué)實(shí)驗(yàn)室的綠色化建設(shè)奠定了基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：薄層色譜法 一枝黃花 中藥專業(yè) 實(shí)驗(yàn)綠色化

中圖分類號(hào)：O657.7 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1674-098X（2017）11（a）-0215-02

薄層色譜法鑒別是在1985版中國(guó)藥典〔一部〕被首次收載的，眾所周知，薄層色譜法（TLC）的優(yōu)勢(shì)是能夠提供近似圖畫(huà)的成像，使得中藥中的組分能夠整體地被可視化。不同種屬的草藥產(chǎn)生的TLC圖像具有各自的專屬性。在如今中藥制劑的檢驗(yàn)，特別是定性分析中，得以廣泛應(yīng)用[1]。

薄層色譜法自收載于中國(guó)藥典以來(lái)，它在控制中藥質(zhì)量方面起到積極的作用，已為中藥生產(chǎn)及質(zhì)量監(jiān)督管理部門所廣泛認(rèn)同。因此，作為中藥學(xué)專業(yè)的學(xué)生需要特別注意學(xué)習(xí)掌握。為今后的工作、學(xué)習(xí)奠定基礎(chǔ)。

1 實(shí)驗(yàn)原理

薄層色譜法，是將固定相涂布于玻璃板、塑料板或鋁基片上，形成均勻的薄層。待點(diǎn)樣、展開(kāi)后，與相應(yīng)的對(duì)照品按同法所得的色譜圖，比較比移值（Rf）的大小，用以進(jìn)行藥品的鑒別、雜質(zhì)檢查或含量測(cè)定的方法[2]。薄層色譜法是快速分離和定性分析少量物質(zhì)的一種很重要的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，也用于跟蹤反應(yīng)進(jìn)程[3]。

筆者根據(jù)授課學(xué)生的專業(yè)特點(diǎn)，將實(shí)驗(yàn)教學(xué)與中藥實(shí)踐相結(jié)合，探討適合的實(shí)驗(yàn)和教學(xué)方法。

2 學(xué)生實(shí)驗(yàn)時(shí)存在的問(wèn)題

（1）傳統(tǒng)的薄層色譜實(shí)驗(yàn)為奎寧和辛可寧的薄層鑒別，雖然非常經(jīng)典，但所用展開(kāi)劑為苯-乙醚-二乙胺（8∶3∶1）[4]，其中苯和乙醚的毒性很大，不符合綠色化實(shí)驗(yàn)室建設(shè)。并且實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與中藥專業(yè)結(jié)合針對(duì)性不夠強(qiáng)，學(xué)生對(duì)其知識(shí)的了解興趣不夠，迫切需要進(jìn)行實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和教學(xué)的改進(jìn)。

（2）傳統(tǒng)的薄層色譜實(shí)驗(yàn)，需要學(xué)生自己制備硅膠G板，而學(xué)生在制備薄層板時(shí)的技術(shù)和熟練程度，直接影響薄層板的質(zhì)量，比如制備的板厚度不均勻，板表面凹凸不平等，都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的分離效果[5]。

（3）傳統(tǒng)的薄層色譜實(shí)驗(yàn)，學(xué)生在進(jìn)行鑒別時(shí)，可能會(huì)出現(xiàn)斑點(diǎn)成像不圓，有拖尾現(xiàn)象，顯色不清晰，分離時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，不易鑒別等問(wèn)題[6]。

筆者總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，反復(fù)摸索，在該項(xiàng)實(shí)驗(yàn)中提出以下幾方面的改進(jìn)措施。

3 實(shí)驗(yàn)的綠色化改進(jìn)

經(jīng)過(guò)反復(fù)實(shí)驗(yàn)，結(jié)合中藥學(xué)專業(yè)的特點(diǎn)，我們最終選取中藥一枝黃花作為薄層鑒別對(duì)象，鑒定其中的蘆丁和綠原酸。

一枝黃花為菊科植物一枝黃花Solidago decurrens Lour的干燥全草[7]，具有清熱解毒，消腫止痛等功能，用于感冒發(fā)熱，咽喉腫痛，痰熱咳嗽，毒蛇咬傷，瘡瘍腫痛，濕疹等[8]。

為了讓實(shí)驗(yàn)更順利的開(kāi)展，我們首先查閱了藥典，并對(duì)藥典中一枝黃花的薄層鑒別方法進(jìn)行了改進(jìn)，使其更適合在實(shí)驗(yàn)室對(duì)學(xué)生廣泛進(jìn)行開(kāi)展。

（1）我們對(duì)藥典中一枝黃花的供試品的處理方法進(jìn)行了改進(jìn)，改進(jìn)后的方法更簡(jiǎn)便，節(jié)約了學(xué)生配制對(duì)照液的時(shí)間，同時(shí)減少了該操作的失誤。更適合學(xué)生實(shí)驗(yàn)開(kāi)展。方法為：取樣品粉末2g，加乙醇30mL，超聲處理20min，過(guò)濾。濾液作為供試品溶液[9]。

（2）我們對(duì)藥典中一枝黃花的薄層展開(kāi)條件進(jìn)行了改進(jìn)，改進(jìn)了的展開(kāi)劑更環(huán)保，減少了實(shí)驗(yàn)室有機(jī)試劑的使用量，減小了實(shí)驗(yàn)室污染。符合綠色化學(xué)的理念。展開(kāi)劑為：36%的乙酸溶液。

（3）制作薄層板是薄層實(shí)驗(yàn)操作難度之一，學(xué)生在短時(shí)間內(nèi)是難以熟練掌握的。因此，我們直接使用正規(guī)廠家生產(chǎn)的聚乙酰胺薄膜板，這一改進(jìn)措施，使實(shí)驗(yàn)時(shí)間縮短。實(shí)驗(yàn)成功率大大提高了。

（4）手動(dòng)點(diǎn)樣的方法和點(diǎn)樣的量也是影響實(shí)驗(yàn)效果的因素之一，我們經(jīng)過(guò)多次實(shí)驗(yàn)教學(xué)發(fā)現(xiàn)，用毛細(xì)管點(diǎn)樣，點(diǎn)樣的力度不易掌握，容易造成板破損。所以在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需要給學(xué)生特別強(qiáng)調(diào)，在第一次點(diǎn)樣完成后，待溶劑揮發(fā)后再進(jìn)行第二次點(diǎn)樣。并且要注意點(diǎn)樣點(diǎn)的直徑不大于3mm[10]。

（5）在講授實(shí)驗(yàn)原理的同時(shí)，引入該實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的綠色化改革內(nèi)容，從節(jié)約資源和保護(hù)環(huán)境的角度引導(dǎo)學(xué)生加強(qiáng)預(yù)習(xí)，讓學(xué)生在對(duì)實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程了解后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。在實(shí)驗(yàn)中對(duì)操作要點(diǎn)要進(jìn)行強(qiáng)調(diào)，要求學(xué)生必須做到規(guī)范操作，做到動(dòng)作準(zhǔn)確、規(guī)范靈活、操作嫻熟，盡量避免學(xué)生因操作失誤而造成重復(fù)實(shí)驗(yàn)。引導(dǎo)學(xué)生時(shí)刻注意節(jié)約藥品，能少用一定要少用，能回收一定要回收，減少試劑損失和對(duì)環(huán)境的污染[11]。

儀器分析這門學(xué)科中一些重要的方法和理論，僅以課堂講授的形式傳播給學(xué)生，往往比較抽象、空洞，學(xué)生反應(yīng)很難學(xué)習(xí)掌握。用薄層色譜法鑒別中藥一枝黃花的主要成分，只是中藥一枝黃花鑒別項(xiàng)目的其中一種方法，筆者旨在通過(guò)對(duì)該項(xiàng)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的改進(jìn)，使薄層色譜法的概念形象化，具體化。結(jié)合實(shí)驗(yàn)室學(xué)生人數(shù)多、學(xué)生專業(yè)層次的特點(diǎn)，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，并在實(shí)驗(yàn)教學(xué)中適當(dāng)改進(jìn)操作步驟，以及通過(guò)改變實(shí)驗(yàn)條件，進(jìn)行對(duì)比實(shí)驗(yàn)，使學(xué)生認(rèn)識(shí)到理論知識(shí)的重要性和實(shí)驗(yàn)操作的直觀性。

實(shí)驗(yàn)的改進(jìn)，更好的利用實(shí)驗(yàn)室條件，與學(xué)生專業(yè)特點(diǎn)相結(jié)合，讓學(xué)生學(xué)以受用，大大提高了學(xué)生的興趣，又能降低實(shí)驗(yàn)成本，節(jié)約資源，減少浪費(fèi)。今后，如何更好的開(kāi)展儀器分析實(shí)驗(yàn)教學(xué)，開(kāi)展對(duì)環(huán)境友好的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目，實(shí)現(xiàn)綠色化實(shí)驗(yàn)室，這是我們繼續(xù)思考的目標(biāo)和動(dòng)力。

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