孫長花+于智勇+王君+蔡長春+周立+張?bào)?/p>

摘要：建立了基于QuEChERS-氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定大米中丙溴磷、稻瘟靈、敵瘟磷、二甲戊靈、氟硅唑、甲草胺、甲基對(duì)硫磷、醚菊酯等8種農(nóng)藥殘留的方法。采用QuEChERS法進(jìn)行樣品預(yù)處理，大米樣品用乙腈提取，經(jīng)PSA和C18粉末和無水MgSO4凈化后檢測(cè)。結(jié)果表明，8種農(nóng)藥的線性范圍為0.001～1.0 μg/mL，相關(guān)系數(shù)大于0.99，農(nóng)藥加標(biāo)回收率為89.4%～105.0%，RSD為1.3%～6.3%。該方法簡捷、靈敏、穩(wěn)定、回收率高，適用于大米中多農(nóng)藥殘留的定量檢測(cè)與定性確證。

關(guān)鍵詞：大米；氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（GC-MS/MS）；農(nóng)藥殘留；QuEChERS法

中圖分類號(hào)： TQ450.2+63文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A文章編號(hào)：1002-1302（2017）23-0191-03

目前，國內(nèi)外對(duì)大米農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法主要是氣相色譜[4]、液相色譜[5]、氣質(zhì)聯(lián)用[6]、液質(zhì)聯(lián)用[7]、氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（gas chromatography-tandem mass spectrometry，GC-MS/MS）[8]，其中GC-MS/MS抗干擾能力更強(qiáng)，能夠?qū)Χ噢r(nóng)藥殘留進(jìn)行定量與定性檢測(cè)分析[9]。QuEChERS是由Anastassiades等于2003年開發(fā)的一種果蔬樣品快速前處理方法[10]。Lehotay等對(duì)該方法不斷進(jìn)行改進(jìn)，開拓了在糧谷等含油量較高食品的前處理中的應(yīng)用[11-12]。GB 2763—2014《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量》中規(guī)定大米中8種農(nóng)藥的殘留限量分別為丙溴磷 0.02 mg/kg、稻瘟靈10 mg/kg、敵瘟磷0.1 mg/kg、二甲戊靈0.1 mg/kg、氟硅唑0.2 mg/kg、甲草胺0.05 mg/kg、甲基對(duì)硫磷0.1 mg/kg、醚菊酯0.01 mg/kg[3]。研究以水稻種植中常用的這8種農(nóng)藥殘留為檢測(cè)對(duì)象，建立一種基于QuEChERS-氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)大米中多農(nóng)藥殘留的方法。

1材料與方法

1.1試劑

NaCl為分析純，上海生工化學(xué)試劑有限公司；PSA、C18粉末、無水MgSO4均購自美國Supulco公司；乙腈、正己烷均為色譜純，購自德國Merck公司。

農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品：丙溴磷、稻瘟靈、敵瘟磷、二甲戊靈、氟硅唑、甲草胺、甲基對(duì)硫磷、醚菊酯，標(biāo)準(zhǔn)品純度均大于98%，均購自德國Dr.Ehrenstorfer公司。

1.2儀器

Trace1300-TSQ8000EVO型氣相色譜串聯(lián)三重四級(jí)桿質(zhì)譜儀，美國Thermo公司；SZ-120型攪拌機(jī)，美的生活電器制造有限公司；KQ-600e型超聲波清洗機(jī)，昆山超聲儀器有限公司；AL104型電子分析天平，梅特勒-托利多儀器有限公司；N-EVAP-112型24位氮吹儀，美國Organomation公司；tg16-ws型離心機(jī)，湖南省長沙鄉(xiāng)赤離心機(jī)儀器有限公司；WH-3型微渦旋混合儀，上海分析儀器廠。

1.3溶液的配制

精確稱量8種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品各10 mg（精確至0.1 mg），溶解在正己烷中，定容至50 mL，配成200 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，放冰箱0～4 ℃保存?zhèn)溆?。試?yàn)當(dāng)日用正己烷稀釋至 5.0 μg/mL 作為農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。然后用正己烷逐級(jí)稀釋，配制成0.001、0.002、0.005、0.01、0.02、0.05、0.10、0.20、0.50 μg/mL系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，進(jìn)樣量1.0 μL。

1.4提取

稱取10.0 g磨碎的大米樣品（精確到0.01 g）于50 mL具塞離心管中，加入10 mL高純水，浸泡30 min，加入10 mL乙腈，振蕩提取2 min，加入1g NaCl和1 g無水MgSO4，振蕩 1 min，3 000 r/min離心2 min。

1.5凈化

取2 mL離心管，加入100 mg PSA、100 mg C18和300 mg無水MgSO4，混勻30 s，準(zhǔn)確移取1 mL提取液，振蕩混勻，過針筒濾膜，氮吹至干，正己烷準(zhǔn)確定容至1 mL，供氣相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀檢測(cè)。

1.6儀器條件

色譜條件：TG-5MS石英毛細(xì)管柱（0.25 μm×0.25 μm×30 m）；恒電流模式下，氦氣流量1.2 mL/min；升溫程序初始溫度80 ℃，保持2 min，以20 ℃/min升至180 ℃，保持 2 min，以3 ℃/min升至230 ℃，保持2 min，以10 ℃/min升至280 ℃，保持2 min；進(jìn)樣口溫度250 ℃；不分流；進(jìn)樣量 1 μL。

質(zhì)譜條件：電離方式EI；電子能量70 eV；離子源溫度 280 ℃；GC/MS接口溫度280 ℃；溶劑截除時(shí)間3 min；質(zhì)量掃描模式（SCAN）定性，選擇反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式（MRM）定量。

2結(jié)果與分析

2.1樣品提取條件的選擇

采用QuEChERS法對(duì)大米樣品進(jìn)行前處理。大米是干樣品，為了使提取劑和樣品充分接觸，須要在提取前加入純水充分浸潤大米。8種農(nóng)藥屬于不同類型的化合物，分子結(jié)構(gòu)差異較大，極性差異也較大。選擇甲醇、乙腈、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯作為提取劑，比較提取效果。甲醇在提取8種農(nóng)藥的同時(shí)，過多提取大米中的可溶性淀粉和水分，增加凈化的負(fù)擔(dān)，并容易造成儀器的污染；丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯作為提取劑時(shí)，萃取物中脂肪類雜質(zhì)含量較高，不利于凈化，并且丙酮會(huì)過多提取水分，影響回收率。乙腈的溶解性大、穿透力強(qiáng)，對(duì)色素、基質(zhì)中的蠟質(zhì)和脂肪等非極性成分的提取能力較小，作為提取劑時(shí)，可以有效提取目標(biāo)農(nóng)藥、沉淀蛋白質(zhì)、并減少雜質(zhì)干擾，因此，采用乙腈作為提取劑。此外，根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，提取時(shí)加入NaCl進(jìn)行鹽析，使提取體系中水與乙腈分層，并加入無水MgSO4吸水，在吸水過程中放熱，升高提取體系的溫度，有利于農(nóng)藥的提取[13-14]。endprint

2.2樣品凈化條件的選擇

使用GC-MS/MS檢測(cè)分析樣品時(shí)，可以不用考慮雜質(zhì)峰的干擾，但為了避免污染儀器系統(tǒng)和基質(zhì)效應(yīng)，樣品須要進(jìn)行適當(dāng)凈化。大米樣品基質(zhì)較復(fù)雜，含有米油成分。PSA可以吸附樣品基質(zhì)中的脂肪酸、親脂性色素和糖類等極性基質(zhì)成分，而對(duì)農(nóng)藥殘留物不產(chǎn)生吸附作用。C18粉末對(duì)非極性物質(zhì)有較強(qiáng)的吸附力，可以除去基質(zhì)中的脂肪和脂類，而對(duì)各種農(nóng)藥化合物幾乎沒有吸附。無水MgSO4能夠除水，提高農(nóng)藥的提取率。研究采用QuEChERS法，在樣品凈化過程中加入100 mg PSA、100 mg C18粉末和300 mg無水MgSO4，凈化效果理想。

2.3質(zhì)譜條件的優(yōu)化

對(duì)三重四極桿質(zhì)譜條件的優(yōu)化主要包括母離子、子離子、碰撞能量等幾個(gè)方面[15]。對(duì)8種農(nóng)藥單標(biāo)溶液進(jìn)行質(zhì)譜全掃描，選擇有代表性的碎片離子作為母離子，進(jìn)行碰撞能優(yōu)化，根據(jù)其子離子掃描質(zhì)譜圖，確定最佳的定性和定量離子對(duì)。優(yōu)化后的質(zhì)譜分析參數(shù)見表1。

2.4線性關(guān)系

以8種農(nóng)藥的質(zhì)量濃度（x，μg/mL）和峰面積（y）作標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到線性范圍、線性方程和相關(guān)系數(shù)，分析結(jié)果見表2。結(jié)果表明，在0.001～1.0 μg/mL線性范圍內(nèi)，8種農(nóng)藥質(zhì)量濃度與峰面積線性相關(guān)，相關(guān)系數(shù)均在0.99以上。

2.5回收率和精密度

向陰性大米樣品中添加5.0 μg/mL的農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，設(shè)置3個(gè)添加水平，濃度分別為0.001、0.01、0.1 mg/kg，每個(gè)濃度重復(fù)6次，計(jì)算平均回收率及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差（RSD），結(jié)果見表3。

從表3可以看出， 8種農(nóng)藥加標(biāo)濃度為0.001 mg/kg時(shí)，回收率為90.4%～102.2%，RSD為2.5%～5.9%；加標(biāo)濃度為0.01 mg/kg時(shí)，回收率為89.4%～103.4%，RSD為

3結(jié)論

采用QuEChERS法進(jìn)行樣品預(yù)處理，選擇乙腈為提取劑，并加入NaCl和無水MgSO4，以PSA、C18粉末和無水MgSO4為凈化劑，通過GC-MS/MS檢測(cè)，建立基于QuEChERS-氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)大米中丙溴磷、稻瘟靈、敵瘟磷、二甲戊靈、氟硅唑、甲草胺、甲基對(duì)硫磷、醚菊酯的多農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法。8種農(nóng)藥的線性范圍為0.001～1.0 μg/mL，相關(guān)系數(shù)大于0.99，農(nóng)藥加標(biāo)回收率在89.4%～105.0%，RSD為13%～6.3%。方法準(zhǔn)確、簡單、快捷、穩(wěn)定、回收率高，適用于大米中上述8種農(nóng)藥殘留的定量檢測(cè)與定性確證。

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