胡守明

摘要：為了確診一例犬乳腺腫瘤的種類，試驗應用石蠟切片制作技術、蘇木精-伊紅染色（HE），對腫瘤組織進行了病理組織學的研究。結果顯示，腫瘤組織內有不同分化程度的典型癌巢出現(xiàn)，巢癌間可見大量炎性細胞浸潤，癌腔內可見脫落的角化細胞，癌巢中棘細胞呈同心圓狀排列，細胞嗜酸性增強，核濃縮及角質化程度增大，中心形成透明的強嗜酸性的角質化癌珠。經(jīng)過病理組織學研究確診該腫瘤為發(fā)生在乳腺組織的鱗狀細胞癌。

關鍵詞：犬；鱗狀細胞癌；病理組織學

中圖分類號：S858.292 文獻標識碼：B 文章編號：1007-273X（2018）01-0007-02

近年來，隨著人們生活水平的提高，人們對精神生活的追求也越來越高，犬等寵物也在不斷進入各個家庭，隨著犬數(shù)量的增多各種疾病也在不斷出現(xiàn)。其中腫瘤性疾病是危害寵物健康的重要疾病。腫瘤按照嚴重程度可以分為良性腫瘤與惡性腫瘤，常見的有乳腺癌、纖維瘤、眼瞼腺增生、脂肪瘤、淋巴瘤、皮下鱗狀細胞癌、腹腔惡性黑色素瘤、膀胱瘤、肝癌、骨肉瘤等[1]。1998年的馬克·莫里斯基金會的動物健康調查的報道顯示，超過2 000名被采訪者闡述腫瘤是導致犬死亡的主要原因，而且全世界寵物腫瘤疾病的患病率還在逐漸上升[2]。在國內腫瘤排行中，乳腺腫瘤、皮膚腫瘤、肛周瘤、睪丸腫瘤、陰道腫瘤的發(fā)病率排行在前5位。在國外，皮膚腫瘤的發(fā)生率排在了第一位，乳腺腫瘤排在第二位[3]。乳腺腫瘤的發(fā)生率在寵物犬中發(fā)病率較高，且各個階段均可發(fā)生，尤其以老年母犬為主，9～11歲的老齡母犬發(fā)病率最高。La等[4]調查表明，乳腺腫瘤占犬類腫瘤發(fā)病率的13.4%，有41.7%發(fā)生在子宮未摘除的母犬，而且乳腺腫瘤的最常發(fā)部位為最后一對乳腺，發(fā)病率為49.53%，其中乳腺癌又占到乳腺腫瘤的50%左右[5]。其發(fā)病原因主要是由于最后一對乳腺較為發(fā)達，乳腺的實質、間質及脂肪組織十分豐富，進而造成了疾病的多發(fā)[3，4]。腫瘤在動物機體的發(fā)病原因非常復雜，可受遺傳、內外環(huán)境等因素的影響。在遺傳因素中，基因突變在引起犬乳腺腫瘤的形成和發(fā)展中起主要作用，而且動物的類別、年齡、性別和機體的差異性均可引起腫瘤的發(fā)生[6]。腫瘤的發(fā)生機理是細胞生長異常、分化失控的結果，各種病因導致了細胞基因結構的改變或調控的失常。目前關于癌變機理的學說主要有基因突變學說、基因表達失調學說和癌基因學說。腫瘤的發(fā)生、發(fā)展是一個動態(tài)的變化過程，在機體本身以及各種環(huán)境因素的共同作用下，使正常的細胞形態(tài)或性質發(fā)生變化，最終產生腫瘤。2017年8寧夏某動物醫(yī)院接診到一例乳腺下長有一增生物的患犬，為了確診增生物的類型，手術摘除后進行了病理組織學的研究。

1 材料與方法

1.1 病料

從病犬乳腺內摘除的增生物。

1.2 設備和儀器

手術刀、手術剪、鑷子、托盤、標本缸、恒溫箱、溫度計、石蠟、石蠟切片機、水浴鍋、燒杯、數(shù)碼顯微鏡、烘片機、載玻片、蓋玻片、染色缸、染色架等。

1.3 試劑

甘油、蛋清、10%福爾馬林溶液、無水乙醇、二甲苯、石蠟、蘇木精染色液、伊紅、鹽酸、中性樹膠等。

1.4 方法

1.4.1 病犬的臨床檢查及增生物的摘除 觀察病犬臨床表現(xiàn)，測量體溫、體重，取病犬左后腿靜脈全血進行生化分析。B超檢查，對發(fā)現(xiàn)的乳腺增生物進行摘除。

1.4.2 乳腺增生物的病理組織學觀察 將乳腺增生組織用10%福爾馬林固定7 d后，制作石蠟切片，HE染色，光學顯微鏡觀察。

2 結果與分析

2.1 病犬的臨床檢查及增生物的摘除

該寵物犬8歲，重7.2 kg，寵物犬的主人觀察到該犬左側第四乳房腫脹，乳頭下有腫塊，表面皮膚發(fā)紅，有出血現(xiàn)象，因此送到銀川愛康動物醫(yī)院進行診療。該犬的心率、呼吸、食欲、排糞、排尿狀態(tài)無明顯異常，體溫38.2 ℃，經(jīng)B超檢查發(fā)現(xiàn)該犬左側第一乳頭下方及左側第四乳頭下方均有增生物，觸之較硬，隨即進行全血生物分析。生化分析結果顯示該犬各項指標均正常，隨后進行了犬的全身麻醉，手術摘除增生物（圖1）。增生物位于犬第一和第四乳腺皮下乳腺組織內，還沒有突破皮膚生長。第一乳腺皮下組織內組織塊大小約為5 cm×4 cm；第四乳腺皮下組織內組織塊大小約為12 cm×8 cm，淡紅色，無包膜，外觀菜花樣，實質呈浸潤生長，與乳腺組織融合，無明顯界限；增生物質脆，切面有出血。

2.2 增生物的病理組織學觀察

經(jīng)過顯微鏡觀察，發(fā)現(xiàn)增生物為惡性腫瘤—鱗狀細胞癌。鏡下可見腫瘤由間質和實質組成，實質沒有明顯的層次，間質的紅色粗大的膠原蛋白束間有大小不等、分化程度不同的圓形、索狀的癌巢（圖2）；有的癌巢實心，有的空心，癌巢的細胞層次不一致，分化程度較高的癌巢中央可清楚的見到透明的和呈紅色角質化的物質（圖3）；癌巢之間可見炎性細胞的浸潤，沒有明顯的出血現(xiàn)象。

腫瘤實質細胞主要由棘細胞樣細胞構成，核密集，有的核裂解，并可見不同分化時期的鱗狀細胞癌的癌巢。癌巢中分化程度高的棘細胞形成同心圓的形狀，癌巢中的細胞嗜酸性明顯增強，細胞核濃縮染色加深，而且角化程度明顯增大，中心形成了透明的強嗜酸性的角質化癌珠。

3 討論

結合病犬的臨床癥狀、B超檢查結果和增生物的病理組織學觀察結果，最終確診該犬乳腺部位所生長的增生物為腫瘤，該腫瘤類型為鱗狀細胞癌。

鱗狀細胞癌（Squamous cell carcinoma， SCC）簡稱鱗癌，又名表皮樣癌，是起源于皮膚或黏膜棘細胞的惡性腫瘤，是一類常見的惡性腫瘤，該病的癌組織生長速度較快，而且呈乳頭狀生長，破潰的癌組織可形成潰瘍面。該病的發(fā)生往往可基于常見的某些皮膚病發(fā)生，例如慢性潰瘍性疾病、皮炎、尋常性狼瘡病、慢性盤狀紅斑狼瘡病、載膜白斑病、燒傷疤痕癥狀等，惡性程度較基底細胞癌高。磷狀細胞癌可通過淋巴通路進行轉移，進而引起其他部位也發(fā)生癌變的現(xiàn)象，因此該病的危害對于患犬來說是非常嚴重的[7]。臨床上依據(jù)癌細胞的分化程度，常常把鱗狀細胞癌分為三個等級：高分化鱗癌（I級）、中分化鱗癌（II級）和低分化鱗癌[8]。發(fā)生病變的高分化鱗狀細胞癌組織可出現(xiàn)癌巢中心完全角化現(xiàn)象，可以形成癌珠。癌珠中心的角化物部分呈現(xiàn)層狀結構，角化物周圍依次為基底細胞樣癌細胞、棘細胞樣癌細胞、扁平癌細胞；發(fā)生病變的中分化鱗狀細胞癌組織可出現(xiàn)中等細胞分化，癌巢中心有少量的角質化現(xiàn)象；病變的低分化鱗狀細胞癌組織在癌巢內不出現(xiàn)角質化和無癌珠形成的病理特征[9，10]。通過觀察患犬腫瘤組織切片可見有不同分化程度的典型癌巢出現(xiàn)，癌巢間可見較多炎性細胞浸潤，癌腔中可見脫落的角化細胞，癌巢中的棘細胞呈同心圓狀排列，而且癌巢中的細胞嗜酸性明顯增強，核濃縮染色加深、角化程度也明顯增大，癌巢中心形成了透明的強嗜酸性的角質化癌珠。因此該犬病理特征為高級分化鱗狀細胞癌。

乳腺鱗狀細胞癌在老年犬發(fā)病率較高，對于麻醉技術要求及麻醉設備要求更高，因此對于麻醉師和主治醫(yī)師來說進行疾病的治療具有很大的難度。雖然在臨床診斷過程中，超聲斷層掃描和X射線檢查等操作能夠快速的對患犬所得疾病進行確診，但是診斷費用較高，大多數(shù)家庭很難接受。對于病理組織學診斷，雖然組織切片的制作過程較為復雜，但是可以從根本上進行良性和惡性腫瘤的診斷，為疾病的發(fā)生機理研究做鋪墊，并且便于手術后疾病治療工作的開展。

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