廖啟超,肖長進(jìn),李雅琦,易華山,馬鮮平

(西南大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院 重慶市獸醫(yī)科學(xué)工程研究中心,重慶 榮昌 402460)

在畜禽解剖學(xué)的教學(xué)過程中,動物標(biāo)本是最好的、最直觀的教具和觀察材料。因此,動物解剖標(biāo)本的制作顯得尤為重要。在教學(xué)過程中,一件高水準(zhǔn)的標(biāo)本,可以把書本上的理論知識直觀地展現(xiàn)在學(xué)生面前,理論與實(shí)際相結(jié)合,加深學(xué)生對理論知識的理解。肝內(nèi)管道的結(jié)構(gòu)錯綜復(fù)雜[1],傳統(tǒng)的學(xué)習(xí)方式僅僅是通過看書看圖片掌握肝內(nèi)管道的結(jié)構(gòu),很顯然不能夠滿足學(xué)習(xí)者對肝內(nèi)管道的認(rèn)識。本文通過對山羊肝內(nèi)管道聯(lián)合分色鑄型標(biāo)本的制作,對管道鑄型標(biāo)本的制作可積累一定的經(jīng)驗、思路及操作要領(lǐng),同時為畜禽解剖學(xué)提供豐富的教學(xué)資源。在形態(tài)學(xué)課程的教學(xué)方面會有很強(qiáng)的借鑒和推廣價值,以及良好的示范作用。

1　試驗材料

1.1試驗動物 購買本地山羊3只,體重15～20 kg。

1.2試驗藥品 速眠新、ABS(丙烯腈-丁二烯-苯乙烯共聚物)[2]、丙酮、鹽酸、氫氧化鉀、油畫顏料。

1.3試驗器械 電子秤、鑷子、手術(shù)刀、組織剪、止血鉗、解剖盤、燒杯、量筒、注射器、膠管、竹筒、縫合線、腐蝕缸等。

1.4插管的制作 插管尾部的制作:將針頭的針管部分全部折斷,磨平斷端,用針頭的膨大部作為插管的尾部。

插管頭部的制作:截取直徑約0.5 cm、長度約5 cm長的竹筒,把兩端磨鈍,其中一端離管口約1 cm處用刀片環(huán)形劃出淺槽,方便綁線用,制成竹筒式插管的頭部;將16號針頭的尖端磨鈍作為針頭式插管的頭部。取6 cm左右的乳膠管,兩端分別與竹筒和針頭尾部連接,用縫合線結(jié)扎牢固,制成竹筒式插管。將乳膠管的兩端分別與磨鈍的16號針頭和針頭尾部連接結(jié)扎,制成針頭式插管。

2　試驗方法

2.1配置填充劑 將50 g ABS加入到500 mL丙酮中,放置5～7 d溶解后可用,然后分成4份,分別加入黃、綠、紅、藍(lán)4種不同顏色的油畫顏料,顏料的量待填充劑顯色均勻即可。

2.3分離待灌注的管道 用剪刀或鑷子將肝動脈、膽總管、門靜脈和后腔靜脈(與肝背緣連接處,用于灌注肝靜脈)分離出來,并穿線待用。

2.4插管、結(jié)扎 分別對肝動脈、膽總管、門靜脈及后腔靜脈內(nèi)插入與其管徑大小匹配的自制插管,將其結(jié)扎,并用止血鉗固定,以防插管在灌注過程中脫離待灌注的管道。

2.5灌注 灌注前對管道內(nèi)進(jìn)行抽氣處理,用50 mL的注射器接在插管的尾端抽取待灌注管道內(nèi)的殘留液體和空氣,待乳膠管變扁平時為宜,然后用止血鉗在乳膠管的近尾端夾住。

聯(lián)合灌注標(biāo)本的灌注順序一般是先灌小管道后灌大管道,以防止先灌注較大管道對小管道形成擠壓之勢。本試驗先后按4個步驟完成灌注。第一步:灌注肝動脈,用20 mL的塑料注射器吸取20 mL的紅色填充劑,放置1～2 min待氣泡完全消失后將其注入肝動脈內(nèi),開始灌注時,管道中的壓力小,填充劑可以較快的注入,當(dāng)灌注量逐漸增多,管道內(nèi)的壓力增大時,應(yīng)緩慢注入,直到手推注射器壓力較大,看到乳膠管稍膨脹之后停止操作,用止血鉗夾住乳膠管,防止填充劑倒流,隨后緩慢退下注射器。第二步:用黃色填充劑灌注膽管,方法同第一步。為防止填充劑進(jìn)入膽囊造成灌注壓力減小,膽管鑄型不充盈,可將膽囊先行結(jié)扎。第三步:用50 mL的塑料注射器吸取綠色填充劑灌注門靜脈,方法同第一步。第四步:用藍(lán)色填充劑灌注肝靜脈,方法同第三步。本試驗中的灌注劑量分別為肝動脈7～15 mL,膽管8～10 mL,門靜脈30～40 mL,肝靜脈20～30 mL。灌注劑量與標(biāo)本大小、填充劑的濃度、灌注順序及標(biāo)本顯示出的疏密程度有關(guān)。在實(shí)際操作過程中,應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的具體用途適當(dāng)增減灌注量。

2.6硬化 將灌注完畢的肝臟放置水中24 h(常溫)。

2.7腐蝕 將硬化好的肝臟放入腐蝕缸內(nèi),然后加入30%HCl,腐蝕液以剛好淹沒器官為宜,腐蝕5～7 d。

2.8沖洗 首先用自來水沖洗,清洗干凈之后,使用弱堿浸泡3～5 h,防止酸性殘留,造成標(biāo)本色變。

3　結(jié)果與討論

采用本試驗制作的山羊肝內(nèi)管道鑄型標(biāo)本輪廓清晰明確、立體感強(qiáng)、構(gòu)型美觀、色彩鮮艷(見中插彩版圖1),通過觀察標(biāo)本可將肝內(nèi)分布錯綜復(fù)雜的不同管道,以及各管道的起始、行程、分支、分布、引流范圍等清晰地呈現(xiàn)出來,在教學(xué)科研及科普教育中,將會發(fā)揮其積極的作用。

制作肝內(nèi)管道鑄型標(biāo)本常用的填充劑有,ABS[3]、過氯乙烯[4]、自凝牙托材料[5],不同的填充劑其性能不同,配置方法不同,應(yīng)根據(jù)所做標(biāo)本的觀察目的來選擇理想的填充劑[6-7]。本試驗直接采用ABS溶于丙酮作為填充劑,配置容易,操作簡便。

灌注是鑄型標(biāo)本制作中最關(guān)鍵的一步,而灌注工具的優(yōu)劣直接影響到灌注效果。通過查閱相關(guān)文獻(xiàn)資料,有關(guān)對灌注用插管的詳細(xì)描述很少,有學(xué)者[3]用頭皮針灌肝總管和肝動脈,用輸液管灌肝靜脈和門靜脈,因這兩種插管在灌注前無法創(chuàng)造負(fù)壓條件,在灌注后無法保證管內(nèi)高壓環(huán)境,制作的管道鑄型標(biāo)本容易出現(xiàn)末端細(xì)支不到位,插管處的較大管道不飽滿。因ABS丙酮填充劑硬化較快,通過采用補(bǔ)灌的方法增加大管道的飽滿度并不理想。本試驗采用改進(jìn)后的自制插管具有3個優(yōu)勢:第一、插管管徑與待灌注管道的內(nèi)徑大小匹配,便于結(jié)扎,防止漏液;第二、插管采用乳膠管能在灌注前通過抽氣以保持待灌注的管道內(nèi)形成負(fù)壓狀態(tài),有利于灌注劑快速到達(dá)管道遠(yuǎn)端;第三、灌注結(jié)束時填充劑充滿乳膠管形成高壓環(huán)境,有利于大管道成型飽滿,不需補(bǔ)灌。

參考文獻(xiàn):