王 沖，徐 琳，華曉東，芮 菁

(天津市藥品檢驗(yàn)研究院，天津 300070)

牛樟芝(Antrodiacinnamomea)，又名樟芝、樟菇、牛樟菇、紅樟芝、血靈芝，屬擔(dān)子菌門(mén)(Basidiomycota)擔(dān)子菌綱(Homobasidiomycates) 無(wú)褶菌目(Aphyllophorales) 多孔菌科(Polyporacease) 薄孔菌屬(Antrodia)，僅生長(zhǎng)在臺(tái)灣地區(qū)牛樟樹(shù)中空的內(nèi)壁或枯死樹(shù)干的潮濕表面，具有悠久的食用歷史和確切的療效，被認(rèn)為是臺(tái)灣地區(qū)“森林中的紅寶石”[1]。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，牛樟芝中含有多糖類(lèi)、黃酮類(lèi)、三萜類(lèi)和核酸類(lèi)及免疫蛋白等多種活性物質(zhì)[2]。20世紀(jì)90年代，牛樟芝推廣至內(nèi)地，其保健及治療效果得到廣泛認(rèn)同[3]，但其野生資源數(shù)量稀缺的問(wèn)題也日益凸顯。近十余年來(lái)，科研工作者成功實(shí)現(xiàn)了牛樟芝的人工培養(yǎng)，有效緩解了牛樟芝藥材的供需矛盾，牛樟芝藥理作用的研究也隨之蓬勃發(fā)展起來(lái)。本文梳理了近5年來(lái)牛樟芝人工培養(yǎng)技術(shù)及藥理學(xué)研究的發(fā)展情況，為牛樟芝進(jìn)一步的開(kāi)發(fā)利用提供文獻(xiàn)依據(jù)。

1 人工培養(yǎng)技術(shù)

1.1段木栽培法 即在段木上接入牛樟芝菌種，使其在類(lèi)似自然狀態(tài)的條件下生長(zhǎng)。優(yōu)點(diǎn)是三萜類(lèi)種類(lèi)及含量高；缺點(diǎn)是菌絲生長(zhǎng)緩慢，培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng)，需1年以上，且牛樟樹(shù)段木稀缺，替代木材種類(lèi)少且易染雜菌[3]。王宏運(yùn)等[4]選擇沉水樟Cinnamomummicranthum作為樟芝的新宿主，經(jīng)人工培育得到沉水樟芝，比較研究了牛樟芝與沉水樟芝藥材間的物種同源性，并進(jìn)行了質(zhì)量控制研究。HPLC 指紋圖譜顯示沉水樟芝的色譜峰數(shù)量、保留時(shí)間與牛樟芝幾乎一致，僅峰面積有所不同；從紅外光譜圖看，牛樟芝和沉水樟芝并無(wú)明顯差別，說(shuō)明沉水樟芝與牛樟芝具有較大的相似性，可作為牛樟芝的潛在替代品進(jìn)行開(kāi)發(fā)。馮路瑤等[5]將牛樟芝菌種接種到蘋(píng)果木、梨木、板栗木、柞木段木上，進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)管理和生殖生長(zhǎng)管理，最終在老齡蘋(píng)果木上長(zhǎng)出了牛樟芝的子實(shí)體，表明老齡蘋(píng)果木可作為牛樟樹(shù)段木的替代培養(yǎng)物使用。

1.2固態(tài)發(fā)酵法 即將牛樟芝接種在太空包上進(jìn)行菌絲體培養(yǎng)，太空內(nèi)包含有纖維物、糖類(lèi)、五谷雜糧類(lèi)等，3～6個(gè)月可進(jìn)行采收。太空包中不同谷物對(duì)活性產(chǎn)物的生產(chǎn)有明顯的影響，以青稞作為發(fā)酵谷物基質(zhì)，其活性產(chǎn)物種類(lèi)多且含量高，Antrodin C和Antroquinonol產(chǎn)量分別為5 901.27和3 715.76 mg/kg[6]。姚秋生等[7]研究了牛樟芝在4種不同的固態(tài)培養(yǎng)基及不同光照強(qiáng)度下的菌絲生長(zhǎng)情況。結(jié)果表明，以配方為牛樟木屑78%、麥麩10%、玉米粉10%、石膏粉1%、葡萄糖1%的培養(yǎng)基培養(yǎng)出的牛樟芝，菌絲最為致密且生長(zhǎng)速度最快；充足的散射光能促進(jìn)菌膜變?yōu)殚偌t色，有助于后期菌皮的形成。魏海龍等[8]對(duì)生產(chǎn)Antroquinonol的工藝條件進(jìn)行了優(yōu)化，最佳條件為：小麥80.82 g，相對(duì)濕度58.01%，培養(yǎng)溫度28.48 ℃，Antroquinonol平均產(chǎn)量可達(dá)259.79 mg/kg。

1.3液態(tài)培養(yǎng)法 利用液體發(fā)酵槽進(jìn)行菌種液體發(fā)酵以收取菌絲體，培養(yǎng)時(shí)間短，約7～14 d 左右，培養(yǎng)成本較低。該培養(yǎng)方法三萜類(lèi)含量最少，但可溶性多糖含量高于其他培養(yǎng)法[3]。以總?cè)坪繛槟繕?biāo)，得到牛樟芝菌絲生長(zhǎng)所需適宜培養(yǎng)條件為：培養(yǎng)時(shí)間20 d，初始pH 4.0，瓶裝量150 ml，轉(zhuǎn)速120 r/min；最適培養(yǎng)基配方為：碳源為木糖，氮源為硝酸鈉，生長(zhǎng)因子為玉米漿。在發(fā)酵液基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加枸杞水提物、連翹醇提物等中藥材提取物對(duì)牛樟芝菌絲體生物量和三萜含量有明顯促進(jìn)作用[5]。添加宿主相關(guān)物種——樟樹(shù)的水或石油醚提取物也能有效增加三萜類(lèi)物質(zhì)產(chǎn)量，進(jìn)一步研究表明，α-terpineol 0.5 mg/L的增產(chǎn)作用最為顯著[9]。在培養(yǎng)基中添加柑橘屬不同植物樹(shù)皮提取物，能提高多酚類(lèi)及三萜類(lèi)物質(zhì)產(chǎn)量，其中以柑橘樹(shù)皮效果最好。由于香精油對(duì)菌絲體有抑制作用，添加時(shí)間掌握在開(kāi)始培養(yǎng)的第7天以后。添加28 d時(shí)，多酚類(lèi)及三萜類(lèi)的產(chǎn)量能增加10倍以上，添加物最佳體積為總體積的4%[10]。常規(guī)液態(tài)發(fā)酵菌絲體中主要含有Antrodins類(lèi)化合物，以Antrodin C為主，但不能合成Antroquinonol類(lèi)化合物。添加前體物輔酶Q0可以誘導(dǎo)牛樟芝菌絲體在液態(tài)發(fā)酵中合成Antroquinonol；在此基礎(chǔ)上，添加植物油進(jìn)行同步萃取發(fā)酵，能夠顯著提高牛樟芝菌絲體活性成分種類(lèi)和得率[11]。徐萌萌等[12]分析了牛樟芝發(fā)酵液中揮發(fā)性物質(zhì)在液體發(fā)酵過(guò)程中的動(dòng)態(tài)變化，發(fā)現(xiàn)發(fā)酵液在不同階段呈現(xiàn)出不同的香味，并在所有揮發(fā)性物質(zhì)中鑒定出50多種化合物。揮發(fā)性物質(zhì)的綜合分析可為將來(lái)牛樟芝相關(guān)產(chǎn)品的質(zhì)量評(píng)價(jià)、價(jià)值評(píng)估以及新產(chǎn)品開(kāi)發(fā)提供重要的技術(shù)指標(biāo)。牛樟芝菌絲體4-acetylantroquinonol B的抗癌細(xì)胞增殖活性與液體發(fā)酵液的香氣濃度呈正相關(guān)，一些揮發(fā)性物質(zhì)為4-acetylantroquinonol B的前體化合物，氣相色譜鑒定出這些化合物主要為1-辛烯-3-醇(蘑菇醇)、芳樟醇、甲基乙酸苯酯、 橙花叔醇、γ-杜松萜烯及2，4，5-3甲氧基苯甲醛(TMBA)，進(jìn)一步研究表明在發(fā)酵液中添加橙花叔醇及TMBA有助于增加4-acetylantroquinonol B產(chǎn)量及生物活性[13]。牛樟芝在深層發(fā)酵過(guò)程中能夠產(chǎn)生大量無(wú)性孢子，Ca2+濃度能夠有效調(diào)控樟芝無(wú)性產(chǎn)孢的現(xiàn)象。差異蛋白質(zhì)組學(xué)分析鑒定出參與Ca2+/ 鈣調(diào)素信號(hào)通路的CaM蛋白和Hsp 90蛋白，以及參與FluG調(diào)控產(chǎn)孢信號(hào)通路的AbaA蛋白；進(jìn)一步的生物信息學(xué)分析，預(yù)測(cè)了Ca2+/ 鈣調(diào)素和FluG介導(dǎo)的牛樟芝無(wú)性產(chǎn)孢信號(hào)通路模型圖。采用實(shí)時(shí)定量PCR (RT-qPCR) 技術(shù)發(fā)現(xiàn)了受Ca2+調(diào)控最為靈敏的7個(gè)產(chǎn)孢相關(guān)功能基因：crz1、hsp90、flbB、brlA、abaA、wetA 及fadA[14]。

1.4皿式培養(yǎng)法 將適合菌絲體生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)物混合溶解后倒入容器，高溫殺菌，冷卻到適當(dāng)溫度倒入平皿內(nèi)，待平皿凝固后接種牛樟芝菌種，25 ℃培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間約4個(gè)月，用該方法培養(yǎng)出的三萜類(lèi)含量與野生品種最接近，缺點(diǎn)為平皿應(yīng)用多，工作量大，成本比較高。分別考察不同培養(yǎng)基、碳源、氮源對(duì)菌絲體總?cè)坪康挠绊懀罴雅囵B(yǎng)基為GPY和胡蘿卜培養(yǎng)基，最佳碳源為葡萄糖、麥芽糖和甘露糖，最佳氮源為魚(yú)蛋白胨和硫酸銨[3]。趙能等[15]研究了不同碳氮源及不同濃度果糖對(duì)牛樟芝菌絲體生長(zhǎng)的影響。以麥芽浸粉與酵母提取物為氮源、果糖作為碳源，培養(yǎng)30 d時(shí)的菌絲生長(zhǎng)速率為1.47 mm/d，菌絲呈紅色，與野生牛樟芝顏色接近。以麥芽糖和果糖為碳源、牛肉浸粉作為氮源，培養(yǎng)30 d時(shí)的菌絲生長(zhǎng)速率為1.51 mm/d，但其菌絲呈黃白色。

2 藥理作用

2.1肝臟保護(hù)作用 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)，牛樟芝對(duì)多種類(lèi)型肝損傷從多個(gè)途徑發(fā)揮全面的保護(hù)作用。牛樟芝能降低血清中ALT及AST 活性，顯著提高肝組織勻漿上清液中SOD及GSH-Px活力，增加GSH并降低MDA含量，緩解四氯化碳(CCl4)所致大鼠慢性肝損傷[1]。牛樟芝提取物明顯抑制小鼠酒精性脂肪肝，其機(jī)制與降低固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1C、脂肪酸合成酶及乙酰輔酶A羧化酶mRNA有關(guān)[16]。牛樟芝濃縮膠囊能降低模型小鼠肝組織中TG、MDA，升高GSH含量，對(duì)急性酒精肝損傷具有明顯的保護(hù)作用[17]。牛樟芝菌絲體提取物(ACME)促進(jìn)膠原蛋白合成，提高GPT活性，調(diào)節(jié)肝星型細(xì)胞內(nèi)MHC Ⅱ、SMC6、磷脂酶D及胞內(nèi)蛋白，明顯改善肝細(xì)胞形態(tài)，有效緩解硫代乙酰胺所致大鼠肝損傷[18]。牛樟芝菌絲體中分離出的糖蛋白Antrodan，通過(guò)抑制肝臟SOD、過(guò)氧化氫酶及GSH-Px等氧化應(yīng)激反應(yīng)，調(diào)節(jié)血清GOT、GPT、IL-6、TBARS、NO、iNOS等含量，有效降低LPS誘導(dǎo)的肝損傷[19]。體內(nèi)研究方面，牛樟芝對(duì)肝細(xì)胞也有顯著的保護(hù)作用。來(lái)源于牛樟芝的類(lèi)固醇樣化合物Antcin C與肝細(xì)胞作用，可降低ROS及ALT/AST 分泌，提高GSH 含量，抑制自由基誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激反應(yīng)，降低細(xì)胞凋亡率，保護(hù)機(jī)制與調(diào)節(jié)抗氧化基因HO-1、NQO-1及γ-GCLC等有關(guān)[20]。Antcin K通過(guò)降低ROS活性和上調(diào)細(xì)胞抗氧化防衛(wèi)機(jī)制，有效緩解N-亞硝基乙二胺誘導(dǎo)的大鼠肝臟細(xì)胞炎性、纖維性及癌性病變[21]。Zhankuic acid A通過(guò)抑制JAK2通路磷酸化，抑制伴刀豆蛋白A誘導(dǎo)的肝細(xì)胞炎癥反應(yīng)[22]。

2.2抗炎免疫作用 牛樟芝醇提取物(ACEE)顯著抑制LPS聯(lián)合ATP誘導(dǎo)的THP-1細(xì)胞IL-1β、IL-18及TNF-α炎性因子分泌，機(jī)制與抑制炎癥組件NLRP3表達(dá)有關(guān)[23]。牛樟芝提取物可阻滯Th17細(xì)胞分化，通過(guò)抑制STAT3 磷酸化和RORγt 表達(dá)，抑制IL-17A、IL-21及 IL-22分泌，調(diào)節(jié)TH17細(xì)胞介導(dǎo)的牛皮癬樣皮膚性炎癥[24]。糖蛋白Antrodan 400 μg/ml時(shí)無(wú)明顯細(xì)胞毒性，明顯抑制LPS誘導(dǎo)的RAW 264.7細(xì)胞炎癥反應(yīng)，濃度低至18.75 μg/ml時(shí)仍能顯著降低NO生成[25]。牛樟芝多糖成分特別是高分子量多糖，通過(guò)調(diào)節(jié)TLR2和TLR4受體下游的MAPK和NF-κB通路，活化樹(shù)突細(xì)胞(DCs)，促進(jìn)DCs誘導(dǎo)的抗原特異性T細(xì)胞活化及Th1分化[26]。Antrodan與人外周血單核細(xì)胞孵育3 d，顯著提高IL-12 和IL-1β 水平，抑制TNF-α、IL-6及IL-8分泌，發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用[27]。高血糖癥對(duì)傷口組織的愈合速度與炎癥反應(yīng)息息相關(guān)，牛樟芝三萜降低炎癥因子的表達(dá)，加快STZ-誘導(dǎo)的糖尿病小鼠的傷口愈合速度[28]。半乳甘露聚糖及攜帶的八糖分子重復(fù)單元(ACP)能增加巨噬細(xì)胞對(duì)大腸桿菌的吞噬能力，有望成為一個(gè)新的免疫調(diào)節(jié)藥物[29]。牛樟芝水提取物和醇提取物對(duì)NK細(xì)胞有著不同的作用，水提取物刺激生成細(xì)胞溶解蛋白和NKG2D/NCR細(xì)胞表面受體，活化胞內(nèi)的ERK、JNK 及 p38信號(hào)途徑，增強(qiáng)NK對(duì)癌細(xì)胞的殺傷作用；醇提取物阻礙細(xì)胞溶解物和細(xì)胞表面受體表達(dá)，抑制NK細(xì)胞毒性殺傷作用[30]。牛樟芝提取物CCM111與巨噬細(xì)胞作用，下調(diào)STAT3、Tyk2磷酸化及p65核轉(zhuǎn)錄，降低NO、iNOS及COX-2水平，具有顯著抗炎作用[31]。麥角甾烷型三萜特別是zhankuic acid C (ZAC)，有效抑制DCs炎性因子及趨化因子釋放，劑量依賴(lài)性抑制DCs成熟；ZAC還能抑制接觸性超敏反應(yīng)及DNFB-刺激的小鼠耳部滲透性的T細(xì)胞數(shù)量，是潛在的免疫抑制劑[32]。

2.3抗氧化作用 牛樟芝總?cè)凭哂休^強(qiáng)的還原能力，可有效清除DPPH自由基、ABTS自由基和超氧陰離子自由基，清除率與質(zhì)量濃度存在明顯的劑量效應(yīng)關(guān)系，半清除率(EC50)分別為0.29、0.50及0.33 mg/ml[1]。牛樟芝通過(guò)抑制高脂飲食大鼠主動(dòng)脈LOX-1、P38MAPK及NF-κB的表達(dá)，保護(hù)大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞免受脂質(zhì)氧化損傷[33]。牛樟芝能上調(diào)腦組織中抗氧化酶谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶(GST)和超氧化物歧化酶(SOD)的表達(dá)，增強(qiáng)肌體的總抗氧化能力，有效延長(zhǎng)易卒中的自發(fā)性高血壓大鼠的生存時(shí)間[34]。Liu等[35]通過(guò)小鼠負(fù)重游泳試驗(yàn)、轉(zhuǎn)棒試驗(yàn)、力竭游泳試驗(yàn)證實(shí)，牛樟芝菌絲體0.1、0.3和0.9 g/kg連續(xù)給藥3周，抗疲勞效果顯著，作用機(jī)制可能與調(diào)節(jié)AMP活化蛋白激酶、蛋白激酶B及哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶復(fù)合物有關(guān)。

2.4抗腫瘤作用

2.4.1肝癌 牛樟芝醇提取物(ANCA-E-D)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，改變細(xì)胞進(jìn)程，明顯抑制人肝癌細(xì)胞SMMC-7721 的增殖[36]。牛樟芝總?cè)?ACTT)體外對(duì)人肝癌HepG2 細(xì)胞具有明顯的增殖抑制及誘導(dǎo)凋亡作用[37]。牛樟芝醇提取物(ACEE)及其活性成分zhankuic acid A、cordycepin及adenosine通過(guò)調(diào)節(jié)ERp57、PGK-1、MAPK和PI3K/Akt信號(hào)通路，下調(diào)MMP-2及MMP-9表達(dá)，抑制肝癌細(xì)胞遷移[38]。Chen等[39]探討了牛樟芝子實(shí)體提取物對(duì)SK-Hep-1肝癌細(xì)胞的快速作用機(jī)制，與細(xì)胞作用僅幾個(gè)小時(shí)，即可靶向作用多種蛋白和miRNA系統(tǒng)，抑制miRNA成熟的關(guān)鍵酶，活化XRN2 蛋白促進(jìn)miRNA降解，同時(shí)下調(diào)細(xì)胞增殖及存活相關(guān)信號(hào)通路，激活JNK信號(hào)通路誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡。三萜類(lèi)化合物Antcin K——源自椴樹(shù)木段培養(yǎng)出來(lái)的牛樟芝提取物，促進(jìn)磷脂酰絲氨酸外翻、染色質(zhì)凝聚及DNA損傷，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。分子機(jī)制研究表明，Antcin K提升ROS，增加ATP消耗，提高內(nèi)質(zhì)網(wǎng)壓力，導(dǎo)致線(xiàn)粒體膜極性喪失，釋放HtrA2、凋亡誘導(dǎo)因子、核酸內(nèi)切酶 G、細(xì)胞色素c等凋亡誘導(dǎo)蛋白，進(jìn)而激活 caspase-9及caspase-3，啟動(dòng)凋亡進(jìn)程[40]。4-acetylantroquinonol B(4AAQB) 體外抑制HepG2增殖和細(xì)胞周期，體內(nèi)抑制HepG2和HuH-7肝癌細(xì)胞異種及原位移植模型。在肝癌細(xì)胞HuH-7上的機(jī)制研究表明，4AAQB抑制mTOR磷酸化并影響其上游激酶和下游效應(yīng)因子，導(dǎo)致VEGF含量及Rho GTPases活性下降，抑制腫瘤的侵襲及轉(zhuǎn)移[41]。

2.4.2肺癌 2，3，5-trimethoxy-4-cresol (TMC)，固態(tài)培養(yǎng)法牛樟芝菌絲體提取而來(lái)，抑制Akt、MMP-2及MMP-9表達(dá)，增強(qiáng)E-cadherin 及TIMP-1 蛋白表達(dá)，有效抑制肺癌細(xì)胞遷移及浸潤(rùn)[42]。糖蛋白Antrodan 30～70 μg/ml抑制LLC癌細(xì)胞的侵襲和遷移，作用機(jī)制與上調(diào)TIMP-1、TIMP-2及 nm23-H1 蛋白表達(dá)、抑制MMP-2及MMP-9活性有關(guān)[27]。2，3-二甲氧基-5-甲基-1，4-苯醌 (輔酶Q0)，可通過(guò)誘導(dǎo)ROS生成，促進(jìn)A549細(xì)胞凋亡，藥效作用可被抗氧化劑維生素C逆轉(zhuǎn)[43]。By-1抑制A549增殖、遷移，將細(xì)胞周期阻滯于G0/G1期，誘導(dǎo)A549細(xì)胞發(fā)生凋亡，機(jī)制與調(diào)控ROS釋放有關(guān)[44]。來(lái)源于牛樟芝的硫酸化多糖，通過(guò)誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體下調(diào)、激活Caspase 3 及PARP，降低肺癌細(xì)胞生長(zhǎng)和遷移能力[45]。

2.4.3白血病 牛樟芝醇提物(EEAC) 在體外抑制WEHI-3增殖，將細(xì)胞阻滯于G0/G1和G2/M期，降低MMP-9表達(dá)，抑制細(xì)胞遷移；信號(hào)通路方面，EEAC降低p-Akt, p-ERK 1/2表達(dá)，上調(diào)p21及p27表達(dá)。體內(nèi)模型，EEAC能抑制WEHI-3細(xì)胞對(duì)肝及脾臟的侵襲能力，降低對(duì) BALB/c小鼠體內(nèi)成瘤性[46]。

2.4.4膀胱癌 膀胱癌是第九大常見(jiàn)癌癥，是一種與性別無(wú)關(guān)的嚴(yán)重的泌尿道癌癥，65%以上的患者術(shù)后會(huì)復(fù)發(fā)，20%以上的患者病情嚴(yán)重惡化及轉(zhuǎn)移。給予具有細(xì)胞毒性濃度的倍半萜內(nèi)酯Antrocin，能增加 Fas、DR5及Bax表達(dá)，活化caspase-3、-8及-9，誘導(dǎo)膀胱癌5637細(xì)胞發(fā)生凋亡；無(wú)細(xì)胞毒性濃度的Antrocin可顯著抑制細(xì)胞生長(zhǎng)、遷移及浸潤(rùn)[47]。

2.4.5乳腺癌 上皮-間葉轉(zhuǎn)化(EMT)是腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，抑制EMT是防治腫瘤的重要靶點(diǎn)。馬來(lái)酰亞胺衍生物Antrodin C(ADC)，在體外顯著抑制TGF-β1誘導(dǎo)的EMT和乳腺癌細(xì)胞MCF-7轉(zhuǎn)移[48]。SHANG等[49]考察牛樟芝子實(shí)體提取物(AC-3E)對(duì)雌激素受體陽(yáng)性(ER+)T47D乳腺癌細(xì)胞的作用，AC-3E下調(diào)PI3K、Akt、mTOR信號(hào)途徑及細(xì)胞周期的中介物，誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明，AC-3E預(yù)防和治療T47D對(duì)BALB/c裸鼠異種移植性腫瘤，效果優(yōu)于抗雌激素藥他西莫芬。

2.4.6頭頸部癌 腫瘤啟始細(xì)胞(CICs)是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)亞群，在癌細(xì)胞生長(zhǎng)和抵抗化療中起到關(guān)鍵作用。提取自牛樟芝的YMGKI-2，有效抑制醛脫氫酶活化系統(tǒng)(ALDH)活性，抑制CICs的更新能力，阻礙干細(xì)胞特性相關(guān)基因的表達(dá)，降低頭頸部鱗狀細(xì)胞癌中CICs的數(shù)量[50]。

2.4.7鼻咽癌 Pinicolol B對(duì)鼻咽癌TW02及TW04細(xì)胞具有毒性作用， IC50值分別為63.3和115.0 μM，還能誘導(dǎo)TW02及 TW04細(xì)胞發(fā)生凋亡，對(duì)正常細(xì)胞——鼻咽分泌薄壁細(xì)胞NP69未見(jiàn)任何毒性作用[51]。

2.4.8聯(lián)合抗癌作用 牛樟芝子實(shí)體酒精萃取物與兩性霉素B(Amphotericin B)聯(lián)用，有效抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，推測(cè)牛樟芝子實(shí)體成分能改變癌細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，使兩性霉素B更好地發(fā)揮抗癌作用，該方法已應(yīng)用在臨床上治療各種腫瘤，效果良好[3]。單麗珠等[52]觀(guān)察了牛樟芝聯(lián)合化療對(duì)惡性腫瘤患者免疫功能及化療毒副作用的影響，發(fā)現(xiàn)牛樟芝能明顯提高肌體免疫功能、穩(wěn)定血常規(guī)、促進(jìn)骨髓造血功能的恢復(fù)，從而減少化療毒副反應(yīng)的發(fā)生，有效改善患者生活質(zhì)量，可作為惡性腫瘤化療的輔助藥應(yīng)用。Tsai等[53]組織37位胃癌、肺癌等晚期癌癥患者，其中17位患者為給藥組，20位患者為安慰劑組，連續(xù)給予牛樟芝或安慰劑30 d并聯(lián)合化療，初步探討牛樟芝對(duì)晚期癌癥病人的臨床療效。與安慰劑組相比，牛樟芝在降低患者病死率和總生存期上臨床效果有限，僅能幫助改善睡眠效果，但同時(shí)血小板數(shù)目下降嚴(yán)重。提示在接受化療的晚期癌癥患者身上聯(lián)合應(yīng)用牛樟芝治療時(shí)應(yīng)謹(jǐn)慎。廣譜抗腫瘤藥物阿霉素的心臟毒性及脂質(zhì)體阿霉素的手足綜合征均認(rèn)為與ROS相關(guān)，牛樟芝乙醇提取物降低3T3細(xì)胞內(nèi)ROS蓄積，聯(lián)合阿霉素，顯著增強(qiáng)抗MCF-7 乳腺癌細(xì)胞療效[54]。牛樟芝提取物(AC549)可減少免疫細(xì)胞的輻射損傷，而對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞HT-29無(wú)保護(hù)作用，對(duì)人乳腺癌細(xì)胞BT-474有增強(qiáng)輻射作用，有望作為部分腫瘤化療時(shí)的輔助治療藥物[55]。牛樟芝促進(jìn)凋亡相關(guān)基因表達(dá)，下調(diào)腫瘤組織中NF-κB 和VEGF，增加腫瘤細(xì)胞對(duì)順鉑的敏感性，同時(shí)減少順鉑對(duì)正常肝細(xì)胞的功能損傷、炎癥反應(yīng)及凋亡，保護(hù)正常肝細(xì)胞，可用于聯(lián)合順鉑治療肝癌[56]。Lin等[57]也報(bào)道了牛樟芝乙醇提取物在肝癌細(xì)胞上協(xié)同順鉑及阿霉素的積極作用。預(yù)防給予牛樟芝菌絲體發(fā)酵液(AC-MFB)，可將細(xì)胞周期捕獲在對(duì)放療最為敏感的G2/M期，協(xié)同增加食道癌細(xì)胞的放療敏感性，該協(xié)同效果在CE81T/VGH 細(xì)胞接種的 BALB/c 小鼠上也得到驗(yàn)證[58]。組織特異性腫瘤干細(xì)胞具有一定的放化療抗性，是腫瘤易復(fù)發(fā)的重要原因。牛樟芝通過(guò)調(diào)節(jié)microRNA與靶mRNA的特異性結(jié)合，抑制靶mRNA的翻譯并影響其穩(wěn)定性，提高腫瘤干細(xì)胞樣細(xì)胞的放化療敏感性[59]。

2.5其他作用

2.5.1抑菌作用 牛樟芝總?cè)茖?duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌及枯草芽孢桿菌均具有明顯的抑制作用，對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌效果最為顯著[1]。

2.5.2抗感染 阻礙細(xì)胞膜TLR4受體及其配體蛋白MD-2的結(jié)合，是抗細(xì)菌感染的有效治療靶點(diǎn)之一。Chen等[60]通過(guò)分子擬合證實(shí)，Zhankuic acid A (ZAA)能與MD-2疏水結(jié)構(gòu)域結(jié)合，競(jìng)爭(zhēng)性降低MD-2與LPS結(jié)合，緩解LPS誘導(dǎo)的膿毒血癥及沙門(mén)氏菌所致小鼠腹瀉反應(yīng)。

2.5.3改善胰島素抵抗 胰島素抵抗是代謝綜合征及2型糖尿病發(fā)展的重要因素，牛樟芝菌粉能顯著降低地塞米松誘導(dǎo)的胰島素抵抗大鼠血漿中葡萄糖和游離脂肪酸，有效緩解胰島素抵抗[61]。

牛樟芝野生子實(shí)體生長(zhǎng)緩慢、寄主專(zhuān)一性強(qiáng)且稀有，導(dǎo)致樟芝子實(shí)體資源嚴(yán)重匱乏。人工培養(yǎng)技術(shù)的日臻完善，有效緩解了牛樟芝的供求關(guān)系，降低了產(chǎn)品價(jià)格，促進(jìn)了產(chǎn)業(yè)的蓬勃發(fā)展。目前，不僅僅局限于中國(guó)臺(tái)灣地區(qū)，福建、廣東等省份的牛樟芝產(chǎn)業(yè)也如雨后春筍般快速發(fā)展起來(lái)。近5年的文獻(xiàn)研究表明，牛樟芝在肝臟保護(hù)、抗炎免疫、抗氧化、抗腫瘤等方面具有廣泛的藥理活性，特別是在聯(lián)合抗癌方面，不僅有臨床前研究，臨床研究上也取得良好的成果。進(jìn)一步總結(jié)并發(fā)現(xiàn)不同培養(yǎng)條件牛樟芝特征性代謝產(chǎn)物的分布規(guī)律，盡快建立人工培養(yǎng)藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，將牛樟芝納入《中國(guó)藥典》收載，必將使得這一珍貴食藥用真菌得到更廣泛的應(yīng)用與發(fā)展。