王曉君

【摘 要】目的：食物中毒是指食用了被有生物性，化學(xué)性有毒有害物質(zhì)污染的食品或食用了含有毒有害物質(zhì)的食品后出現(xiàn)的急性、亞急性食源性疾病。近年來，國家高度重視食物中毒事件引發(fā)的負(fù)面影響，不斷加強食品衛(wèi)生安全管理，并要求醫(yī)療領(lǐng)域加強對細(xì)菌性食物中毒的實驗研究，以指導(dǎo)相關(guān)防治措施的制定。本文對一起引起食物中毒的非O1/O139群霍亂弧菌的實驗研究進行回顧分析，旨在為該該類型食物中毒的防治方案的制定提供參考價值。

【關(guān)鍵詞】非O1/O139群霍亂弧菌；食物中毒；食品衛(wèi)生安全；生物學(xué)特性；防治措施

【中圖分類號】R378.3 【文獻標(biāo)識碼】A 【文章編號】1005-0019（2018）20-0-01

非O1/O139群霍亂弧菌為霍亂弧菌三個分群之一，該群弧菌鞭毛抗原與O1型相同，菌體抗原不相同。早期認(rèn)為非O1/O139群霍亂弧菌僅可以引起腸胃腸炎性腹瀉，不會引起暴發(fā)流行，但上個世紀(jì)90年代初期，在孟加拉國、印度等國家暴發(fā)的霍亂流行菌群即為非O1群霍亂弧菌[1]。伴隨著各國醫(yī)療領(lǐng)域?qū)Ψ荗1群霍亂弧菌的深入研究，目前已有較多研究報道該菌群還可引起食物中毒，且嚴(yán)重時可對患者生命健康造成威脅[2]。近年來，我國醫(yī)療領(lǐng)域也報道了幾起由非O/O1391群霍亂弧菌引起的食物中毒，提示國內(nèi)應(yīng)加強對非O1/O139群霍亂弧菌引起的食物中毒的實驗研究。

1 非O1 /O1 3 9群霍亂弧菌引起的食物中毒的簡介

2016年7月12日，我市金馬鄉(xiāng)玉泉村一戶村民請鄉(xiāng)廚辦婚宴，共開26桌，其中22人在餐后7小時后陸續(xù)出現(xiàn)輕重不一的胃腸道反應(yīng)，包括惡心、嘔吐、腹瀉等癥狀，2例嚴(yán)重者一天瀉10多次，主要為黃色水樣便，輕者一天2、3次，經(jīng)臨床和流行病學(xué)分析及病原學(xué)檢測確診為非O1/O139群的O11群霍亂弧菌引起的食物中毒，給予對癥治療后均治愈。

2 病原菌檢測過程及結(jié)果

采集午餐后廚房留樣的部份剩余食物7件及腹瀉患者的糞便3份、肛拭子3份，共計13份樣品，按照GB4789-2016及《霍亂防治手冊》進行常規(guī)食物中毒細(xì)菌培養(yǎng)項目檢測，未檢出沙門氏菌、志賀氏菌、金黃色葡萄球菌、副溶血性霍亂弧菌及致瀉性大腸埃希氏菌。但鹵鴨、涼拌豬耳朵及2份糞便標(biāo)本經(jīng)堿性蛋白胨水增菌后，在TCBS及4號瓊脂平板上長出疑似霍亂弧菌特征的可疑菌落，TCBS平板上為黃色菌落，4號瓊脂上為中央黑色、邊緣透明光滑、濕潤的菌落。所用培養(yǎng)基來源于北京陸橋技術(shù)有限公司。

3 非O1 /O1 3 9群霍亂弧菌的生物學(xué)特性

3.1 生化反應(yīng)分析 生物學(xué)特性：挑取TCBS及4號瓊脂上可疑菌落涂片染色鏡檢為：革蘭染色陰性呈短桿狀或弧狀。挑取鏡檢陰性的弧形菌進一步純化后再進行系列生化試驗。結(jié)果為：氧化酶、動力、吲哚-枸椽酸鹽、靛基質(zhì)，VP、賴氨酸、鳥氨酸、葡萄糖、甘露醇、蔗糖均陽性，明膠液化，乳糖、硫化氫、精氨酸均陰性，在0%和3%的Nacl蛋白胨水中生長，而在6%和8%的Nacl蛋白胨水中不生長。所用生化鑒定管來源于青島海博生物科技有限公司。

3.2 血清學(xué)鑒定 將生化符合霍亂弧菌特征的菌落與診斷血清做玻片凝集。該菌與O1群多價診斷血清及小川、稻葉分型血清不凝集，與O139群霍亂弧菌診斷血清不凝集。與非O1群零亂弧菌18種（M1-18）凝集，與VBO（O2-91）單價診斷血清中的O11凝集。

3.3 耐藥性分析 參照WHO（世界衛(wèi)生組織）推薦的K-B紙片擴散法進行非O1群群霍亂弧菌耐藥性分析，藥敏紙片為Oxoid公司生產(chǎn)，試驗所用抗生素藥物包括頭孢克肟、氨芐西林、頭孢拉定、慶大霉素、環(huán)丙沙星、復(fù)方新諾明、呋喃唑酮、四環(huán)素、紅霉素、諾氟沙星。根據(jù)美國臨床和實驗室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會出版的《抗菌藥物敏感性試驗標(biāo)準(zhǔn)（2014版M 100-S24）》進行結(jié)果判讀，顯示菌株對頭孢噻肟、慶大霉素、頭孢噻吩、環(huán)丙沙星完全敏感，對氨芐西林、復(fù)方新諾明完全耐藥。

4 非O1 /O1 3 9群霍亂弧菌引起食物中毒的原因、機制分析

非O1/O139群霍亂弧菌為對除O1群霍亂弧菌和O139群霍亂弧菌以外的霍亂弧菌的統(tǒng)稱，在自然環(huán)境中廣泛存在，尤其是海產(chǎn)品和水體中，是導(dǎo)致人群出現(xiàn)急性腹瀉等消化系統(tǒng)癥狀的主要原因[3]。2014年廣東省報道了一起病原菌感染所致急性消化道癥狀事件，現(xiàn)場采樣，應(yīng)用熒光定量PCR法和傳統(tǒng)分離培養(yǎng)法進行病原菌分離和篩查，結(jié)果顯示18份標(biāo)本中，共11份標(biāo)本的霍亂弧菌核酸培養(yǎng)結(jié)果為陽性，分離出6株非O1/O139群霍亂弧菌，其中5株來源與患者糞便標(biāo)本，1株來源于冷柜內(nèi)壁標(biāo)本，證明非O1/O139群霍亂弧菌感染為引起急性消化道癥狀的主要原因[4]。本文回顧的該起食物中毒事件中，22人在用餐后陸續(xù)出現(xiàn)惡心、嘔吐、腹瀉等消化系統(tǒng)癥狀，經(jīng)現(xiàn)場采樣和糞便標(biāo)本采用，共4份標(biāo)本中檢出非O1/O139群霍亂弧菌感染，陽性率為30.77%，其中2份標(biāo)本為食物中毒者的糞便標(biāo)本，進一步證明非O1/O139群霍亂弧菌感染為引起食物中毒的主要原因之一。

查閱資料發(fā)現(xiàn)，早期國內(nèi)外均有關(guān)于非O1/O139群霍亂弧菌致病機制的研究，但時至今日仍未完全明確其致病機制。國外一項研究顯示，非O1/O139群霍亂弧菌的脂多糖與O1霍亂弧菌、O139群霍亂弧菌存在明顯差異，毒素基因的分布也存在顯著差別，大多數(shù)細(xì)胞含有溶血素、重復(fù)毒素A等毒素基因。還有一部分研究結(jié)果顯示非O1/O139群霍亂弧菌存在多種致病因子，包括腸毒素、蛋白酶、外膜蛋白、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子、溶血素等[5]。動物實驗研究發(fā)現(xiàn)，上述致病因子中的溶血素，由hly A基因編碼后能夠在細(xì)胞膜上形成孔隙，破壞細(xì)胞的正常功能，在兔結(jié)腸結(jié)扎實驗中發(fā)現(xiàn)，由hlyA基因編碼的溶血素還可引血液中毒性物質(zhì)的積聚。此外，還有一部分研究發(fā)現(xiàn)toxR基因的活動能夠影響霍亂CT毒素的表達(dá)，它的存在可以激活霍亂毒素的轉(zhuǎn)錄[6]?？偨Y(jié)上述研究報道所得結(jié)果可知，關(guān)于非O1/O139群霍亂弧菌的致病機制尚存在一定程度的爭議，還有待日后國內(nèi)外研究學(xué)者進行更深入的研究和探索來驗證。

5 總結(jié)

綜上所述，非O1/O139群霍亂弧菌也可引起嚴(yán)重的胃腸道癥狀，引起細(xì)菌性食物中毒，在未來可能成為我國公共衛(wèi)生學(xué)上的一個潛在風(fēng)險。通過對非O1/O139群霍亂弧菌耐藥性、生化反應(yīng)、血清學(xué)等生物學(xué)特征進行分析，有利于更加深入的了解和掌握非O1/O139群霍亂弧菌的致病機制，并能夠為非O1/O139群霍亂弧菌相關(guān)食物中毒的預(yù)防和治療提供客觀依據(jù)，在保障人群群眾食品衛(wèi)生安全中發(fā)揮著積極作用，實踐意義重大。

參考文獻

衛(wèi)生部疾病控制司.《霍亂防治手冊》第五版.

《食品微生物檢驗》2016版.

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徐秋瓊，李柏生，余泳紅，等.廣州市一起非O1/O139群霍亂弧菌食物中毒分離株的病原特征分析[J].疾病監(jiān)測，2017，32（2）：149-152.

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