張曉娟,左冬冬
(1.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué),黑龍江 哈爾濱 150040; 2.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院,黑龍江 哈爾濱 150040)
白術(shù)(AtractylodesmacrocephalaKoidz.)別名桴薊,于術(shù),冬白術(shù),淅術(shù),楊桴,吳術(shù),片術(shù)、蒼術(shù)等,多年生菊科草本植物,根莖入藥,主要分布于四川、云南、貴州等山區(qū)濕地。其中以浙江於潛產(chǎn)者質(zhì)量最佳,被稱為“於術(shù)”。味苦、甘,性溫,歸脾、胃經(jīng)。具有健脾益氣,燥濕利水,止汗,安胎的功效,主要用于脾虛食少,腹脹泄瀉,痰飲眩悸,水腫,自汗及胎動不安?!夺t(yī)學(xué)啟源》記載:“除濕益燥,和中益氣,溫中,去脾胃中濕,除胃熱,強脾胃,進飲食,安胎?!薄渡褶r(nóng)本草經(jīng)》曰:“術(shù)。味苦溫。主風(fēng)寒濕痹死肌,痙疸,止汗,除熱,消食,作煎餌。久服輕身延年,不饑。一名山薊,生山谷。”《長沙藥解》曰“:味甘、微苦,入足陽明胃、足太陰脾經(jīng)。補中燥濕,止渴生津,最益脾精,大養(yǎng)胃氣,降濁陰而進飲食,善止嘔吐,升清陽而消水谷,能醫(yī)泄利。”
白術(shù)的臨床應(yīng)用非常廣泛,如《傷寒論》載理中丸(人參、炙甘草、白術(shù)、干姜各三兩,共為細末。煉蜜為丸。功能溫中祛寒,補益脾胃。治療太陰病,中焦虛寒,自利不渴,寒多嘔吐,腹痛,不欲飲食,以及中寒霍亂等癥);真武湯(茯苓三兩,赤芍三兩,生姜三兩,白術(shù)二兩,附子一枚炮。功能溫陽利水。治療脾腎陽虛,水氣內(nèi)停,小便不利,四肢沉重疼痛,腹痛下利,肢體浮腫等);附子湯(炮附子二枚,茯苓三兩,人參二兩,白術(shù)四兩,赤芍三兩。重在治陽虛,寒邪內(nèi)侵所致之身體骨節(jié)疼痛)?!督饏T要略》載麻黃加術(shù)湯(麻黃三兩,桂枝(肉桂)去皮二兩,甘草一兩,杏仁七十個,白術(shù)四兩。功能散寒除濕。治療外感寒濕,一身煩疼)。
白術(shù)含有多種有效成分,具有多種藥理作用,在臨床中應(yīng)用廣泛,筆者針對近年來白術(shù)的化學(xué)成分及藥理作用進行綜述,發(fā)現(xiàn)白術(shù)中的主要藥效成分為揮發(fā)性成分、多糖類、內(nèi)酯類、黃酮類、苷類等,針對白術(shù)化學(xué)成分的研究多集中在內(nèi)酯類、揮發(fā)性成分及多糖類。白術(shù)可以作用在機體的多個方面,但主要作用集中在胃腸道系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)及泌尿系統(tǒng),具有抗腫瘤、修復(fù)胃黏膜、抗炎鎮(zhèn)痛、保肝、改善記憶力、調(diào)節(jié)脂代謝、降血糖、抗血小板、抑菌、免疫調(diào)節(jié)、調(diào)節(jié)水液代謝等多種藥理作用。
白術(shù)的化學(xué)成分主要包括揮發(fā)性成分、內(nèi)酯類成分、苷類、多糖類成分以及氨基酸等,主要作用在胃腸道系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)。白術(shù)根莖中揮發(fā)油含量約為1.4%,其主要成分為蒼術(shù)酮、蒼術(shù)醇等,其中蒼術(shù)酮在揮發(fā)油中含量為31.93%~61.00%,且揮發(fā)油的含量與產(chǎn)地密切相關(guān)[1]。張雪青等[2]用水蒸氣蒸餾法提取白術(shù)揮發(fā)油,氣相色譜-質(zhì)譜法檢測出27種化學(xué)組分,其中主要是烯類化合物,含量最大的為莪術(shù)烯。
李瀅等[3]采用硅膠柱色譜方法對化學(xué)成分進行分離純化,通過質(zhì)譜、核磁共振等譜學(xué)數(shù)據(jù)鑒定化合物結(jié)構(gòu)。結(jié)果從生白術(shù)環(huán)己烷提取物中分離并鑒定了9個化合物,分別為蒼術(shù)酮(1),白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ(2),雙白術(shù)內(nèi)酯(3),白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ(4),白術(shù)內(nèi)酰胺(5),白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ(6),4R,15-環(huán)氧白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ(7),4R,15-環(huán)氧-8β-羥基白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ(8),8β,9α-二羥基白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ(9)。其中化合物7為新的天然產(chǎn)物,化合物9為首次從中藥白術(shù)中分離鑒定。
鄒輝等[4]采用多種現(xiàn)代色譜技術(shù)進行分離純化,通過理化性質(zhì)及光譜方法鑒定白術(shù)乙酸乙酯提取物的化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)。結(jié)果從白術(shù)的乙酸乙酯提取物中分離得到16個化合物,分別鑒定為1-乙酰氧基-6E,12E-二烯-8,10-二炔-3-醇(1),3-乙酰氧基-6E,12E-二烯-8,10-二炔-1-醇(2),6E,12E-十四碳二烯-8,10-二炔-1,3-二醇乙酸酯(3),12-異戊烯酰氧基-14-乙酰氧-2E,8Z,10E-三烯-4,6-二炔-1醇(4),12-異戊烯酰氧基-14-乙酰氧-2E,8E,10E-三烯-4,6-二炔-1醇(5),白術(shù)內(nèi)酯I(6),白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ(7),白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ(8),雙白術(shù)內(nèi)酯(9),杜松腦(10),蒲公英萜醇乙酸酯(11),3β-乙酰氧基-12-齊墩果烯-11酮(12),7-羥基香豆素(13),二十八烷酸(14),十七烷酸(15),7-α-羥基-β-谷甾醇(16)。
曾志等[5]采用水蒸氣蒸餾法從3個不同產(chǎn)地采集的白術(shù)中分離提取揮發(fā)油,并通過氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)聯(lián)用進行檢測。從浙江、安徽和甘肅3個不同產(chǎn)地的白術(shù)揮發(fā)油中共鑒定出24種化合物,其中21種為共有成分。3個不同樣品中含量最高的揮發(fā)性成分均為蒼術(shù)酮,分別占總量的58.07%(浙江)、57.41%(安徽)和57.49%(甘肅)。此外,還檢出三葉草烯、Berkheyaradulen、6,10,11,11-四甲基-三環(huán)[6.3.0.0(2,3)]-1(7)-十一碳烯、馬兜鈴?fù)彤惓兹~桉油烯醇等在白術(shù)研究中尚未報道的化學(xué)成分。
由于白術(shù)有效成分的不穩(wěn)定性,鮮品采集后,其有效成分會逐漸降低。因此必須嚴格按照規(guī)定進行炮制,保證藥物的質(zhì)量。烘干者稱“烘術(shù)”;曬干者稱“生曬術(shù)”;揀肥滿纖維性少的鮮白術(shù),略蒸后再曬干者稱“冬術(shù)”?,F(xiàn)代常用炮制方法為生白術(shù)、土炒白術(shù)和麩炒白術(shù)。徐春良等[6]采用HPLC色譜法測定白術(shù)藥材指標(biāo)成分,并采用醇溶性浸出物測定法(熱浸法)測定其浸出物,研究不同炮制方法對白術(shù)藥材指標(biāo)成分含量及浸出物含量的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn),米泔水漂白術(shù)的白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ含量明顯增高,焦炒白術(shù)和麩炒白術(shù)中白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ含量顯著增高;幾種不同白術(shù)炮制品中蒼術(shù)酮含量變化不明顯。浸出物含量變化趨勢:焦白術(shù)>白術(shù)藥材>麩炒白術(shù)>土炒白術(shù)>米泔水漂白術(shù)??梢姴煌谥品椒▽Π仔g(shù)藥材中白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ、蒼術(shù)酮及浸出物含量均有一定的影響。
研究發(fā)現(xiàn),白術(shù)內(nèi)酯I對宮頸癌HeLa細胞系具有較好抑制作用,IC50為15.6 μmol/L[4]。
張雪青等[2]選用浙江磐安產(chǎn)白術(shù),用水蒸氣蒸餾法提取白術(shù)揮發(fā)油,采用噻唑藍(MTT)法檢測。結(jié)果白術(shù)揮發(fā)油組分對肺癌A549細胞和宮頸癌Hela細胞生長均具有有極明顯的抑制作用,且呈現(xiàn)劑量依賴效應(yīng);單細胞凝膠電泳結(jié)果表明,白術(shù)揮發(fā)油以50、20 μg/mL分別作用于細胞24 h后,A549和Hela腫瘤細胞內(nèi)DNA明顯受損傷,可能引起細胞凋亡的發(fā)生。
龍方懿等[7]探討白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ抑制卵巢癌SK-OV-3與OVCAR-3細胞增殖的作用及其分子機制。結(jié)果白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ可顯著抑制SK-OV-3與OVCAR-3細胞增殖,且白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ對SK-OV-3與OVCAR-3細胞的增殖抑制作用呈現(xiàn)出濃度和時間的正相關(guān);此外,白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ還可顯著降低SK-OV-3與OVCAR-3細胞的S期細胞比例,增加G2/M期細胞比例,且白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ對SK-OV-3與OVCAR-3細胞周期的調(diào)控與其抑制CDK1的表達相關(guān);Western blot 實驗進一步探討了白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ抑制細胞增殖和調(diào)控細胞周期還與PI3K/AKT 信號通路有關(guān)??梢姲仔g(shù)內(nèi)酯Ⅰ可通過PI3K/AKT途徑下調(diào)卵巢癌SK-OV-3與OVCAR-3細胞CDK1的表達,從而使細胞阻滯于G2/M期,進而發(fā)揮腫瘤細胞增殖抑制作用。
陳遠等[8]采用MTT、Western印跡檢測、實時定量PCR法觀察白術(shù)內(nèi)酯I對人胃癌MGC-803 細胞增殖的抑制作用及其機制。結(jié)果,白術(shù)內(nèi)酯I抑制人胃癌MGC-803細胞增殖,并且呈時間、劑量依賴性(P<0.05);白術(shù)內(nèi)酯I抑制Notch信號通路中Notch1、Hey1、Jagged1和Hes1蛋白表達水平;白術(shù)內(nèi)酯I抑制Notch1、Hey1、Jagged1和Hes1 mRNA表達水平(P<0.05)??梢姲仔g(shù)內(nèi)酯I能通過抑制Notch 信號通路從而抑制人胃癌MGC-803細胞增殖。
曹艷霞等[9]采用遞增負荷的方式進行8周跑臺運動方法,探討白術(shù)多糖對運動應(yīng)激性潰瘍大鼠抗氧化和胃黏膜Bcl-2、Bax水平的影響。結(jié)果與對照組比較,運動應(yīng)激性潰瘍組大鼠胃潰瘍指數(shù)明顯升高,胃組織SOD活性顯著降低,MDA含量顯著升高,Bcl-2蛋白表達減少,Bax蛋白表達增強(P<0.01);與運動應(yīng)激性潰瘍組比較,白術(shù)多糖組大鼠胃潰瘍指數(shù)明顯降低,胃組織SOD活性顯著提高,MDA含量顯著下降,Bcl-2蛋白表達增強,Bax蛋白表達減少(P<0.01)。白術(shù)多糖能抑制運動應(yīng)激性潰瘍,其可能機制與提高胃黏膜抗氧化能力,增強Bcl-2的表達,減少Bax表達增加Bcl-2/Bax比值的作用有關(guān)??梢娫诖筘摵闪坑?xùn)練前,提前給予白術(shù)多糖進行干預(yù),可以提高機體的抗應(yīng)激能力,并減少運動對胃腸道的損害。宋厚盼等[10]觀察白術(shù)甲醇提取物對小腸上皮細胞(IEC-6)增殖、遷移及磷脂酶C-γ1(PLC-γ1) 的影響,進而確定白術(shù)促進胃腸黏膜損傷修復(fù)可能的作用機制。結(jié)果發(fā)現(xiàn),白術(shù)提取物可通過促進多胺介導(dǎo)的上皮細胞遷移發(fā)揮修復(fù)胃腸黏膜損傷作用,細胞增殖不是其主要藥效作用。
姜正華等[11]利用水蒸汽提取法提取白術(shù)芳香水、白術(shù)水提部分,白術(shù)水提部分采用醇沉法得到去多糖水提部分和白術(shù)多糖部分,采用小鼠無水乙醇型胃潰瘍模型,觀察白術(shù)不同提取部分的抗胃潰瘍作用。結(jié)果,白術(shù)水提液、白術(shù)芳香水、白術(shù)去多糖水提液能明顯抑制無水乙醇對胃黏膜的損傷(P<0.05),對無水乙醇胃潰瘍抑制率分別是56.01%、58.22%、46.28%,三者之間并無統(tǒng)計學(xué)差異,可見白術(shù)水提液、白術(shù)芳香水、白術(shù)去糖水提液是白術(shù)抗胃潰瘍作用的有效部分。
趙桂芝等[12-13]對白術(shù)醇提物進行系統(tǒng)的抗炎鎮(zhèn)痛作用研究。結(jié)果高、中劑量的白術(shù)醇提物可顯著增加小鼠的熱板痛閾值(P<0.01),并可減少腹腔注射醋酸引起的小鼠扭體反應(yīng)次數(shù)(P<0.01),而白術(shù)低劑量組不能有效的提高小鼠的痛閾值和減少扭體反應(yīng)次數(shù)。在抗炎試驗中,高、中劑量的白術(shù)醇提物可顯著抑制小鼠耳廓腫脹度(P<0.01),而低劑量組效果不明顯;高劑量組在2 h后能顯著抑制大鼠足跖腫脹,中劑量組(除6 h時間點)與白術(shù)醇提物低劑量組(除3 h時間點)在藥后0.5~6 h之間與模型組比較均無顯著性差異??梢姲仔g(shù)醇提物具有較好的抗炎、鎮(zhèn)痛作用,并呈現(xiàn)一定的劑量依賴性。同時也研究了白術(shù)醇提物對佐劑性關(guān)節(jié)炎(adjuvant arthritis, AA)大鼠足跖腫脹度和炎性細胞因子的影響。結(jié)果與空白組相比,模型組大鼠的足跖腫脹度、血清和炎性組織中的炎癥因子TNF-α、IL-1β和PGE2含量顯著增加。與模型組相比,白術(shù)醇提物能劑量依賴性抑制AA大鼠的原發(fā)性足跖腫脹度,對繼發(fā)性的足跖腫脹也有一定程度的抑制,能明顯抑制AA大鼠血清和炎性組織中的TNF-α、IL-1β和PGE2的含量??梢姲仔g(shù)醇提物對于佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠具有較好的保護作用,并且隨著劑量的增大,保護作用增強,抑制炎癥細胞因子TNF-α、IL-1β和PGE2合成和釋放可能是其主要的作用機制之一。
陳琴華等[14]使用硫代乙醇酸鈉誘導(dǎo)大鼠產(chǎn)生炎性巨噬細胞,然后采用差速貼壁法純化所得的大鼠腹腔炎性巨噬細胞,通過流式測定巨噬細胞標(biāo)記抗原(ED1) 表達來鑒定巨噬細胞。分別使用白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ刺激巨噬細胞24 h后,ELISA法檢培養(yǎng)液中腫瘤壞死因子α(TNF-α)、致炎因子(IL-1β) 和白細胞介素6(IL-6) 細胞因子的表達變化,收集細胞提取RNA,通過RT-PCR 的方法測定炎性巨噬細胞表達精氨酸酶(Arginase 1)、誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS) 以及IL-1β、趨化因子(CCL22)、轉(zhuǎn)化生長因子(TGF-β)的變化。結(jié)果,純化培養(yǎng)的大鼠炎性巨噬細胞表達ED1,白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、Ⅲ能夠使其炎性巨噬細胞Arginase 1、CCL22、TGF-β表達水平升高(P<0.05),iNOS、IL-1β的表達水平降低(P<0.05);白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、Ⅲ對巨噬細胞產(chǎn)生炎癥因子中TNF-α、IL-1β、IL-6具有顯著的抑制作用(P<0.05) ,白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ?qū)ρ仔跃奘杉毎蜃颖磉_不明顯。可見白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、Ⅲ夠使促進炎性巨噬細胞細胞因子表達發(fā)生顯著變化,具有抗炎活性,但白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ變化不明顯。
車財妍等[15]采用給予大鼠高脂飲食14周的方法誘導(dǎo)非酒精性脂肪性肝炎模型。探討白術(shù)多糖對單純高脂飲食誘導(dǎo)的大鼠非酒精性脂肪性肝炎的防治作用。結(jié)果模型組肝組織出現(xiàn)顯著的肝細胞脂肪變性及空泡樣變,肝組織TG、FFA含量較正常組顯著升高(P<0.01) ,血清ALT、AST活性較正常組亦明顯升高(P<0.01) 。白術(shù)多糖的上述病理改變顯著減輕,肝組織TG、FFA 含量及血清ALT、AST 水平顯著低于模型組(P<0.01) ??梢宰C實,白術(shù)的主要有效成分——白術(shù)多糖,具有明顯的防治非酒精性脂肪性肝炎的作用,且其降脂效果與羅格列酮相當(dāng),在改善肝損傷指標(biāo)方面效果更明顯。
高群等[16-17]采用連續(xù)皮下注射D-半乳糖的方法,建立腦老化小鼠模型,通過Morris水迷宮檢測小鼠的記憶能力,用透射電鏡和形態(tài)計量法分析白術(shù)對腦老化小鼠CA3區(qū)Gray I型突觸結(jié)構(gòu)參數(shù)的影響。結(jié)果腦老化組的逃避潛伏期顯著優(yōu)于對照組(P<0.05),而RAM 低、中、高組的逃避潛伏期顯著短于腦老化組(P<0.05,P<0.01)。海馬CA3區(qū)Gray I型突觸結(jié)構(gòu)觀察:與對照組相比,腦老化組小鼠的突觸界面曲率、突觸后致密物厚度均顯著減小(P<0.05;P<0.01),突觸間隙寬度顯著增大(P<0.05);白術(shù)組小鼠的突觸界面曲率、突觸間隙寬度、突觸后致密物厚度與對照組基本相近似(P>0.05)??梢姲仔g(shù)可以改善腦老化所致小鼠海馬CA3區(qū)Gray I型突觸結(jié)構(gòu)的改變,改善學(xué)習(xí)記憶能力。還采用被動回避實驗檢測小鼠學(xué)習(xí)記憶能力,用Western blot檢測海馬區(qū)突觸素、蛋白激酶C、環(huán)一磷酸腺苷反應(yīng)元件結(jié)合蛋白的表達水平。結(jié)果白術(shù)可顯著改善腦老化小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力,其機理可能是上調(diào)Syn、PKC、CREB表達,影響突觸可塑性而增強學(xué)習(xí)記憶功能。
高脂血癥是導(dǎo)致冠心病、動脈粥樣硬化的主要因素。高密度脂蛋白-膽固醇(HDL-C)是衡量血脂水平的主要指標(biāo),但目前尚沒有明顯升高HDL-C的藥物。實驗室既往研究發(fā)現(xiàn)白術(shù)精提物能顯著升高高血脂大鼠的HDL-C水平。唐琦晶等[18]采用高糖高脂復(fù)合酒飲方法建立代謝性高脂血癥大鼠,研究白術(shù)精提物對大鼠血脂的影響及降脂機制。結(jié)果不同劑量的白術(shù)精提物能降低高脂大鼠血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白-膽固醇(LDL-C)、膽固醇?;D(zhuǎn)移酶(ACAT)的水平,升高卵磷脂膽固醇?;D(zhuǎn)移酶(LCAT)和HDL-C的水平,其中100 mg/kg劑量組可升高HDL-C約50%;肝組織中羥甲基戊二酰輔酶A還原酶(HMG-Co A還原酶),TC,TG顯著降低。提示白術(shù)精提物能有效調(diào)節(jié)高脂大鼠血脂紊亂,尤其對升高HDL-C有顯著療效,其作用機制可能與抑制肝臟中HMG-Co A還原酶來減少膽固醇合成,調(diào)節(jié)體內(nèi)LCAT,ACAT水平來增加脂質(zhì)代謝轉(zhuǎn)運有關(guān)。
糖尿病是嚴重危害人類健康的主要疾病之一,是人類致死、致殘的主要原因。糖尿病的發(fā)病率正逐年增加,已經(jīng)成為危害身體健康的主要疾病。李燕等[19]觀察白術(shù)多糖對自發(fā)性2型糖尿病db/db小鼠血糖的影響。結(jié)果造模成功的db/db小鼠出現(xiàn)了血糖增加、體質(zhì)量增加、胰島素增高和血脂增高的現(xiàn)象。實驗中,小鼠體質(zhì)量不斷增長,血糖及血脂也維持在較高水平,符合2型糖尿病的臨床表現(xiàn)。經(jīng)過給予白術(shù)多糖(300,90,30 mg/kg)干預(yù)后,體質(zhì)量及血脂水平基本沒有改變,但白術(shù)多糖(300,90 mg/kg)能明顯控制小鼠的空腹血糖,顯著降低血漿胰島素水平,增加胰島素敏感性指數(shù)。實驗結(jié)果顯示,白術(shù)多糖(300,90 mg/kg)能顯著降低在給予葡萄糖后(0.5,2 h)的餐后血糖,改善其糖耐量,表明白術(shù)多糖能夠有效降低db/db 2型糖尿病小鼠的空腹血糖,降低血漿胰島素水平,增加胰島素敏感性指數(shù),改善糖耐量,其降糖作用機制之一可能是通過降低血漿胰島素、增加胰島素的敏感性。
陳一竹等[20-21]通過體外血小板聚集實驗,采用比濁法測定不同濃度白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ對血栓烷類似物(U46619)誘發(fā)的人血小板聚集的影響;運用熒光素酶檢測白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ對血小板ATP分泌的影響;運用Western印跡法檢測分子細胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(Erk1/2)、蛋白激酶B(Akt473)的磷酸化水平。結(jié)果白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ可抑制U46619誘導(dǎo)下人血小板的體外聚集,其抑制效果具有濃度依賴性;白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ可抑制人血小板在U46619誘導(dǎo)下ATP的分泌且具有濃度依賴性;經(jīng)白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ處理后人血小板活化信號通路中的Akt473、Erk1/2分子的磷酸化水平明顯降低??梢姲仔g(shù)內(nèi)酯Ⅲ對U46619誘導(dǎo)的人血小板聚集及分泌均能產(chǎn)生顯著抑制作用,并影響其血小板活化過程中MAPK和PI3K-Akt信號通路。提示白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ是一種有效的抗血小板化合物,有望成為新型抗血小板藥物。同時觀察了白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ在體外對小鼠和人血小板活化的影響。結(jié)果白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ可抑制膠原刺激下小鼠和人血小板的體外聚集(P<0.01);經(jīng)白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ處理后的人血小板鋪展面積縮小(P<0.01);人血小板中Akt473分子的磷酸化水平降低(P<0.01)。結(jié)論白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ?qū)δz原誘導(dǎo)的小鼠和人血小板聚集能產(chǎn)生顯著抑制作用,對人血小板的鋪展也有抑制作用,其作用機制可能與血小板活化過程中的PI3K-Akt信號通路有關(guān),提示白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ是一種有效的抗血小板化合物。
張雪青等[2]選用浙江磐安產(chǎn)白術(shù),用水蒸氣蒸餾法提取白術(shù)揮發(fā)油,比濁法檢測發(fā)現(xiàn),白術(shù)揮發(fā)油對多種細菌具有較好的抑菌活性。其中白術(shù)揮發(fā)油對鮑曼不動桿菌、金黃色葡萄球菌和草綠色鏈球菌的抑制率可達95%以上,抑菌作用非常明顯上;5 mg/mL的揮發(fā)油作用24 h后,對大腸桿菌、表皮葡萄球菌、摩氏摩根菌和溶血性鏈球菌的抑菌率分別29.74%,24.84%,27.10%和26.28%,抑菌作用較弱;1.25 mg/mL揮發(fā)油作用于肺炎克雷伯菌24 h后的抑制率為47.54%。白術(shù)多糖相對于抗生素具有天然、無殘留、毒副作用小、不產(chǎn)生耐藥性等優(yōu)點。樊敏歡[22]通過對白術(shù)多糖進行分離純化,配制成不同濃度梯度的白術(shù)多糖溶液,研究其抑菌最小有效濃度。采用紙片瓊脂擴散(K-B)法對待測菌株進行藥敏實驗檢測,測定其對不同濃度白術(shù)多糖溶液的敏感性,結(jié)果白術(shù)多糖對嗜水氣單胞菌的最小抑菌濃度為:350 μg/ml。
缺血/再灌注損傷是發(fā)生在缺血性腦卒中經(jīng)藥物治療后缺血腦組織恢復(fù)血供引起的損傷,其嚴重程度往往比腦卒中更嚴重,因此在恢復(fù)缺血性腦卒中的同時,減少其所帶來的缺血/再灌注損傷一直以來都是藥物研發(fā)的熱點。
高群等[23]采用Longa等報道的方法,建立局灶性腦缺血/再灌注大鼠模型,通過肌力變化和Longa評分,評價神經(jīng)功能的恢復(fù)情況,同時測定大鼠腦組織超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)和過氧化氫酶(CAT)的活性和丙二醛(MDA)含量。結(jié)果,缺血/再灌注組神經(jīng)功能缺損評分明顯高于假手術(shù)組(P<0.01),而白術(shù)組的神經(jīng)功能缺損評分明顯低于缺血/再灌注組(P<0.01);缺血/再灌注組肌力恢復(fù)明顯低于假手術(shù)組(P<0.01),而白術(shù)組的肌力恢復(fù)明顯高于缺血/再灌注組(P<0.05)。缺血/再灌注組腦組織SOD、GSH和CAT活性顯著降低,MDA含量明顯增加;而白術(shù)組顯著增加小鼠腦組織SOD、GSH 和CAT活性,降低MDA含量(P<0.01,P<0.05)。
丁采苒[24]選取白術(shù)顆粒、白術(shù)多糖、白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ和白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ刺激免疫細胞,結(jié)果在0.2~125 μg/ml濃度范圍內(nèi)能有效的促進小鼠脾臟淋巴細胞增殖,且對濃度存在依賴性;對細胞因子IL-2、IL-4、IL-10、IL-12、TGF-β1的分泌具有明顯的促進作用,且對細胞因子IL-2、TGF-β1的作用隨著濃度的升高逐步增強,而對IL-4、IL-10、IL-12的影響,在小劑量時影響較為明顯,隨著濃度的增高則逐步降低;能有效促進人體外周血淋巴細胞增殖。
漢代張仲景在《傷寒論》中提出,脾胃與大腸的關(guān)系最為密切,只有脾胃功能正常,大腸才能發(fā)揮其正常功能。而白術(shù)是健脾燥濕藥,其性質(zhì)溫和,味甘苦。景嵐等[25]采用30只SD大鼠建立“瀉劑結(jié)腸”模型,探討白術(shù)對“瀉劑結(jié)腸”大鼠結(jié)腸組織中c-Kit含量的影響。觀察各組首粒活性炭引起的黑便排出時間,計算糞便干濕重比,實時定量熒光PCR法檢測結(jié)腸組織中c-Kit含量。結(jié)果與生理鹽水組比較,白術(shù)1組、莫沙必利1組大鼠首粒黑便排出時間縮短,糞便干濕重比降低,結(jié)腸c-Kit含量升高(P<0.05);與莫沙必利2組比較,白術(shù)2組首粒黑便排出時間縮短,糞便干濕重比降低(P<0.05)??梢姲仔g(shù)能夠升高“瀉劑結(jié)腸”大鼠結(jié)腸組織中c-Kit含量,促進腸蠕動,且停藥后遠期療效優(yōu)于莫沙必利。
尚秋辰等[26]研究發(fā)現(xiàn),白術(shù)多糖對大腸桿菌誘導(dǎo)的小鼠腹瀉有一定的防治效果,能有效減緩腹瀉癥狀,減少小鼠的腹瀉率,檢查發(fā)現(xiàn)白術(shù)多糖對腹瀉小鼠的腸道有明顯的保護作用,預(yù)防組小鼠的保護效果最好,回復(fù)時間最短,觀察超微組織學(xué)變化發(fā)現(xiàn),白術(shù)多糖對腸上皮細胞的微絨毛,線粒體,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等具有保護作用,促進細胞較快的回復(fù)正常代謝。主要原因是白術(shù)多糖對腸道黏膜修復(fù)因子EGFR和TGF-β1的調(diào)節(jié),促進腸道黏膜修復(fù),從而在腹瀉初期白術(shù)多糖能有效保護腸道黏膜,腹瀉中后期白術(shù)多糖能使黏膜上皮細胞更早的恢復(fù)正常代謝。
根據(jù)中醫(yī)脾虛水濕內(nèi)盛的相關(guān)理論,脾虛可造成機體內(nèi)水濕停滯,即體內(nèi)水液代謝發(fā)生異常。由于脾在水液的上下布散運動中發(fā)揮著樞紐作用,因此脾運化水液的功能減退,必然導(dǎo)致水液在體內(nèi)停聚而產(chǎn)生水、濕、痰、飲等病理產(chǎn)物,甚至導(dǎo)致水腫。
白珺等[27]采用優(yōu)化后飲食不節(jié)結(jié)合勞倦過度法,造成動物脾虛模型。腹腔水負荷生理鹽水建立脾虛水濕內(nèi)停模型。肛溫、體質(zhì)量、表觀指標(biāo)為脾虛模型大鼠的造模期評價指標(biāo)。檢測尿中D-木糖排出量、糞便含水率、血清總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、水通道蛋白1、胃泌素(Gas)及腎髓水通道蛋白1(AQP1)等為研究指標(biāo)。結(jié)果造模期,大鼠體質(zhì)量下降,肛溫?zé)o變化,表明此方法造成動物脾虛。給藥后,白術(shù)(3.6 g/kg)能略增模型大鼠尿量和尿中D-木糖排出量,明顯升高糞便含水量、TP、ALB、HDL-C,但降低TC和LDL-C含量,略降低水通道蛋白1水平。腹腔水負荷試驗,模型組動物,體質(zhì)量下降率顯著降低,給予白術(shù)水煎液后則下降率顯著升高,尿量略升高。可見中劑量組白術(shù)水煎液有運化水濕作用,可有效改善動物模型脾虛狀態(tài),提高其相應(yīng)消化吸收功能。初步可以認定,白術(shù)排水途徑可能由糞便排出。對大鼠進行腹腔水負荷后,說明白術(shù)有改善機體水液代謝能力,能有效改善TP。陳靜等[28]也采用相同的方法建立脾虛水濕內(nèi)停模型,檢測模型大鼠一般狀況、糞便含水率、尿D-木糖、TP、ALB、GAS、AQP1 及水負荷指數(shù)。結(jié)果白術(shù)能改善脾虛水濕內(nèi)停大鼠脾失健運狀況,其健脾利水的藥效物質(zhì)是粗糖組分和石油醚組分,燥濕利水的藥效物質(zhì)是揮發(fā)油組分。同時陳靜等也通過預(yù)先胃水負荷模型,以6 h尿量為指標(biāo)考察白術(shù)及其拆分組分對水負荷大鼠利尿作用,進一步測定紅細胞和腎髓中Na+-K+-ATP酶活力、血尿素氮濃度、腎髓中碳酸酐酶水平和Na+、K+、Cl-排出量[29]。結(jié)果高劑量白術(shù)水煎液和白術(shù)揮發(fā)油組分對大鼠有一定的抗利尿作用;與空白組相比,白術(shù)水煎液及其拆分組分組紅細胞中Na+-K+-ATP酶活力、腎髓中Na+-K+-ATP酶和碳酸酐酶水平無顯著變化??梢姲仔g(shù)對正常動物無利尿作用,相反表現(xiàn)出一定的抗利尿作用,且首次研究發(fā)現(xiàn)白術(shù)揮發(fā)油有一定的抗利尿作用。
白術(shù)始見于《神農(nóng)本草經(jīng)》(當(dāng)時稱之為術(shù))。其性溫,味甘、苦,主入脾胃,具健脾益氣、燥濕利尿,止汗安胎作用,前人皆謂白術(shù)為“脾臟補氣健脾第一要藥”,有“十方九術(shù)”之說?,F(xiàn)代藥理研究表明白術(shù)具有廣泛的藥理活性,具有抗腫瘤、修復(fù)胃黏膜、抗炎鎮(zhèn)痛、調(diào)整水液代謝、保肝、改善記憶力、調(diào)節(jié)脂代謝、降血糖、抗血小板、抑菌、免疫調(diào)節(jié)等多種藥理作用。白術(shù)還具有止汗作用,發(fā)揮止汗作用的藥效物質(zhì)主要為粗糖組分和水洗組分,此外石油醚組分也顯示一定的止汗作用[30]。發(fā)揮白術(shù)藥理作用的成分主要是揮發(fā)性成分,多糖和內(nèi)酯類成分,針對這三方面的研究也較多,但目前針對白術(shù)的研究還僅僅停留在某一單一藥理作用方面,缺少協(xié)同作用的研究,且缺少針對白術(shù)某一單體成分或者有效組分的新藥開發(fā)。