趙霞，宋勇義，梁樹樂

（1.煙臺市牟平區(qū)果樹技術(shù)推廣中心，山東牟平264112；2.中國農(nóng)業(yè)大學煙臺研究院，山東煙臺264670）

草莓是薔薇科草莓屬（Fragaria spp.）多年生草本植物，果實酸甜適口，素有“水果皇后”的美稱。果實成熟早，溫室栽培可以供應整個冬季市場，填補果品淡季，同時草莓也是重要的食品加工原料。草莓是靠匍匐莖進行無性繁殖的作物，經(jīng)過幾代后，容易感染多種病毒。感染病毒病的草莓生長緩慢、葉片皺縮、果實小而畸形、品質(zhì)變差。我國已鑒定明確的草莓病毒病主要有四種，即草莓斑駁病毒（SmoV）、草莓輕型黃邊病毒（SMYEV）、草莓鑲脈病毒(SVBV）、草莓皺縮病毒(SCrV）等。一旦感染病毒，常規(guī)藥劑很難進行防治，極大地制約了草莓產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。

通常草莓脫毒苗在培養(yǎng)瓶中增殖擴繁，容易導致植物激素的累積，造成后代變異，如不易成花、產(chǎn)量低、畸形果多等，給草莓生產(chǎn)帶來極大風險。采用熱處理結(jié)合莖尖組織培養(yǎng)，獲得草莓試管苗，在試管內(nèi)不增殖的情況下，直接進行煉苗移栽，然后對移栽成活的試管苗，通過指示植物法進行病毒檢測，然后對獲得的脫毒原種苗在網(wǎng)室內(nèi)進行繁育，進而獲得新一代苗。通過這種方法繁育的一代苗，比通過單純用試管苗進行多代增殖繁殖的變異小，生產(chǎn)風險降低，可以在草莓脫毒育苗中使用。針對草莓脫毒快繁，進行了5年的觀察試驗，并對草莓脫毒結(jié)合網(wǎng)室育苗技術(shù)進行總結(jié)如下：

1 草莓脫毒原理

植物體內(nèi)的病毒是通過維管束縱向疏導和胞間連絲橫向傳播的，莖尖是植物細胞分裂最旺盛的組織，其生長點頂端還沒有形成維管束，植物體內(nèi)病毒的增殖、擴散和傳播速度較植物莖尖分生組織細胞的分裂速度慢，所以莖尖分生組織往往不帶病毒，因此通過莖尖培養(yǎng)可以獲得脫毒植株。莖尖脫毒為了取得較好的脫毒效果，在保證成活率的前提下盡量切取較小的莖尖生長點。

熱處理是指在35～40℃的溫度條件下，植物組織中的很多病毒可被鈍化，同時這種高溫對植物組織的傷害較小，植株可以繼續(xù)生長，因此利用熱處理期間生長的枝、芽為材料進行繁殖，可以獲得脫毒植株。

2 莖尖結(jié)合熱處理脫毒

選擇草莓品種6月份萌發(fā)的草莓匍匐莖作為試驗材料，要求匍匐莖生長充實，小葉尚未展開，剪取4～5cm長的匍匐莖頂部。先用洗潔精洗刷草莓匍匐莖表面，用流水沖洗2h。在超凈工作臺上，將洗后匍匐莖頂端留2～3cm長，先后用75%酒精消毒30s、0.1%的升汞溶液消毒6～7min，再用無菌水沖洗 3～5 次。

將消毒后的草莓匍匐莖置于解剖鏡下，剝?nèi)∏o尖，切取0.2～0.3mm，切得越小脫毒效果越好，但成活率低，切得越大成活率高但脫毒效果差。將切取的生長點立即置于啟動培養(yǎng)基上，啟動培養(yǎng)基成分是MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.2mg/L+GA0.5mg/L，蔗糖 30g/L，pH 值 5.8，瓊脂 6～6.5g/L，經(jīng)121℃壓力滅菌15min后，置于溫度25℃，光照1500～2000Lx、日照時數(shù)16h的培養(yǎng)條件下，進行啟動培養(yǎng)。一般熟練的組培工每天可以剝?nèi)?0個草莓生長點。

莖尖分化出植株以后，將培養(yǎng)瓶移入人工氣候箱進行熱處理，39℃/18℃（晝/夜）變溫30d結(jié)合38℃恒溫30d處理，也可以采用38℃恒溫46d處理，這兩種熱處理的效果都很好。

3 草莓脫毒苗的檢測

通過莖尖培養(yǎng)得到的草莓苗，只有經(jīng)檢測鑒定其植株沒有含指定病毒時，才可稱為脫毒苗。指示植物小葉嫁接法是草莓病毒病鑒定的一種常規(guī)有效的方法。應用較多的指示植物有EMC、UC5、UC10、UC11。小葉嫁接法是將待鑒定植株小葉嫁接到指示植物上，嫁接15d后開始觀察癥狀表現(xiàn)，草莓斑駁病毒嫁接后10～20d指示植物開始出現(xiàn)癥狀，說明草莓病毒在嫁接后2周內(nèi)就能從帶病毒接穗傳到指示植物上。草莓鑲脈病毒嫁接后15～25d表現(xiàn)出癥狀。草莓皺縮病毒和草莓輕型黃邊病毒表現(xiàn)癥狀較晚，一般嫁接30～45d后才能表現(xiàn)癥狀，癥狀先在新展開葉上表現(xiàn)，然后在老葉上出現(xiàn)。EMC和UC5對草莓斑駁病毒、草莓輕型黃邊病毒、草莓皺縮病毒表現(xiàn)敏感，UC10和UC11只對草莓皺縮病毒和草莓輕型黃邊病毒敏感。

4 草莓脫毒苗的煉苗移栽

草莓脫毒苗的移栽最好在溫室大棚中進行，溫室的通風口用卡槽固定上40目的防蟲網(wǎng)，或者在網(wǎng)室中進行，盡量減少組培苗從培養(yǎng)瓶中移出時生長環(huán)境的較大變化，以提高移栽成活率。首先將組培苗放入溫室中，在自然光下進行煉苗3～4d，然后擰松瓶口2～3d，當組培苗無異常反應時，將其移栽到種苗穴盤中。栽培基質(zhì)采用草炭土和珍珠巖2:1的比例，在栽植過程中，一定要將組培苗根系的瓊脂清洗干凈，用600倍的多菌靈浸泡草莓根系，如果根系過長，可以剪去部分老根后移栽。移栽后灌透水，前期放在小拱棚內(nèi)保濕，同時適當用遮陰網(wǎng)遮陰，溫度保持15～25℃，空氣濕度85%～90%。草莓根系對肥很敏感，煉苗期不要施肥，15d后，可慢慢撤去小拱棚，增加光照和通風。

5 脫毒苗的網(wǎng)室繁育

經(jīng)病毒檢測獲得的草莓脫毒苗，為避免后代產(chǎn)生變異，一般不在試管內(nèi)進行增殖，通過網(wǎng)室進行保持及擴繁，防蟲網(wǎng)以40目尼龍網(wǎng)較好。對每株原種苗編號，進行常規(guī)的生產(chǎn)栽培，并觀察每個標號植株的生長及結(jié)果性狀，符合生產(chǎn)要求的，且形正、產(chǎn)量高、無畸形果、果實顏色美觀、抗性強的植株留下，作為繁育的原種苗，不符合要求的要及時拔除。

目前草莓繁殖主要采用兩種方式，即匍匐莖育苗和高架育苗，網(wǎng)室中通常采用匍匐莖的方法進行繁殖，一般可以采用性狀優(yōu)良的原種苗繁殖后，再利用一代苗繁殖成二代苗供生產(chǎn)作為母苗使用。

5.1 網(wǎng)室匍匐莖育苗

苗圃地應選擇土質(zhì)疏松、肥沃的沙壤土地塊，要求排灌方便，呈中性反應、有機質(zhì)含量在1.5%以上、切忌選用土質(zhì)粘重的地塊。每667m2全年可繁殖3萬株左右的優(yōu)質(zhì)秧苗。每畦栽1行，株距70～80cm，脫毒草莓苗緩苗后，如果發(fā)現(xiàn)葉色較淡，葉柄較細，應進行追肥。如果采用根外追肥，尿素和磷酸二氫鉀的濃度應控制在0.2%，追肥間隔10～15d?？刹捎米詣訃姽?、滴灌裝置噴滴保濕，做到畦面土壤潮濕又不積水，為母株生長及匍匐莖的抽生提供適宜生長條件。育苗地由于土質(zhì)肥沃，空間大，極易生草，需多次反復進行除草。匍匐莖發(fā)生前，結(jié)合除草、松土，及時去除老葉。當匍匐莖大量發(fā)生后，不宜下鋤，最好用手拔除雜草。

當秧苗發(fā)生匍匐莖后，要及時引蔓、壓土，使匍匐莖在地面均勻分布，早發(fā)不定根。當產(chǎn)生的匍匐莖苗數(shù)量已達到繁殖系數(shù)時（30～60株），對匍匐莖摘心，此后再發(fā)匍匐莖也應及時去掉，利于匍匐莖苗生長，使之更加粗壯，利于進一步繁苗。

整個生長期，病蟲害應以防為主，避雨栽培可有效減少草莓病害的發(fā)生，如發(fā)現(xiàn)有病蟲危害，特別是夏季雨后炭疽病、葉斑病等葉片病害發(fā)生時，需進行化學防治。在草莓匍匐莖開始伸長、田間摘老葉結(jié)束及降雨前后進行重點預防，較為有效的藥劑有咪酰胺、二氰蒽醌、速克靈、炭特靈、世高、甲基托布津等。7～8月的蟲害主要是斜紋夜蛾，可選用的農(nóng)藥有農(nóng)地樂1000倍或殺蟲素2000倍或萬靈1000倍液等，可交替進行防治，間隔期10d左右。葉斑病可用多菌靈600倍液和百菌清600～800倍液等交替防治。

5.2 高架育苗

在生產(chǎn)上可以采用高架育苗，與傳統(tǒng)育苗方式相比，該方式采用新型的網(wǎng)槽式立體架進行育苗，以充分地利用空間、提高繁殖系數(shù)、培育壯苗、促進草莓花芽分化、并能有效避免病害發(fā)生。為降低成本，也可以自建種植架，一般架高1.8～2.0m，用長花盆或木箱栽植，往下分層依次將穴盤擺在架子上，隨著匍匐莖形成的小苗逐步逐層壓到穴盤中。栽培基質(zhì)采用草炭土、椰糠、珍珠巖等，按照一定的比例混合，一般可以采用一份草炭土，兩份椰糠或珍珠巖。具體的管理方法和操作及病蟲害的防治可以參考網(wǎng)室匍匐莖育苗。