王福超

（大慶油田總醫(yī)院，黑龍江 大慶）

0 引言

急性白血病是臨床中一種典型的非實(shí)體腫瘤，在工業(yè)污染不斷加重，社會環(huán)境日益改變的背景下，急性白血病患病人數(shù)越來越多，發(fā)病率及死亡率不斷提高，對患者及其家庭日常生活造成了嚴(yán)重影響[1]。近年，急性白血病治療方法不斷更新，其治療水平也隨之提高，初次治療急性白血病緩解率較高，但是依舊可能復(fù)發(fā)[2]。現(xiàn)階段，患者接受治療后機(jī)體內(nèi)部依舊殘留部分腫瘤細(xì)胞是導(dǎo)致急性白血病復(fù)發(fā)的主要原因，而這些腫瘤細(xì)胞可于機(jī)體內(nèi)部進(jìn)一步繁殖，最終造成疾病復(fù)發(fā)[3]。通常情況下，急性白血病細(xì)胞是一種表面抗原表型，其特點(diǎn)以異常光散射為主，所以，可利用單克隆抗體及流式細(xì)胞術(shù)等對細(xì)胞表明不同抗原檢測，從而識別熒光信號。本文主要針對流式細(xì)胞術(shù)（FCM）用于白血病外周血細(xì)胞檢驗(yàn)對急性白血?。ˋL）預(yù)后評估價(jià)值分析，以下是具體報(bào)告。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機(jī)選取本院2018年2月至2019年7月接收的56例急性白血病患者，其中，30例男，26例女；年齡21～67歲，平均（38.47±5.23）歲。分型：24例急性淋巴白血?。ˋLL）和32例急性髓系白血?。ˋML）。本次研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①與急性白血病診斷標(biāo)準(zhǔn)相符；②年齡在18歲以上；③自愿簽署研究同意書。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①具備較差依從性；②確診為急性早幼粒細(xì)胞白血病者。

1.2 方法

通過流式細(xì)胞術(shù)檢驗(yàn)所選患者外周血標(biāo)本，收集56例患者3 mL空腹靜脈血，采用乙二胺四乙酸二鉀抗凝，免疫標(biāo)記分別采用別藻青蛋白、藻紅蛋白、甲硫氫酸熒光素及多甲藻葉綠素蛋白，并檢測免疫分型。將1×106有核細(xì)胞加入到每支試管中，采用由美國BD公司提供的單克隆抗體，嚴(yán)格按照說明書開展操作。最低采集可供分析的有核細(xì)胞10萬個，細(xì)胞的采集應(yīng)用由美國BD公司生產(chǎn)的FACSCalibur流式細(xì)胞儀，利用配套軟件分析每個試管。以原始細(xì)胞是否跨系表達(dá)、表達(dá)強(qiáng)弱、表達(dá)是否同時(shí)等為依據(jù)對是否是微小殘留病變（MRD）判定，MRD陽性判定依據(jù)為MRD超過0.01%，相反為陰性[4]。與此同時(shí)，與骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)對比，骨髓液涂片6～8張，在吉木薩-瑞士染色后，置于顯微鏡下觀察并劃分，以形態(tài)為依據(jù)實(shí)施分類計(jì)數(shù)。

1.3 觀察指標(biāo)

對比檢驗(yàn)結(jié)果，并分析MRD與復(fù)發(fā)率相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

將實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 21.0進(jìn)行分析處理，計(jì)量數(shù)據(jù)通過t檢驗(yàn)，以（）表示，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，以（%）表示，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 分析檢驗(yàn)結(jié)果

ALL組敏感性、特異性、陽性預(yù)測值及陰性預(yù)測值分別 是 68.75%、62.50%、72.22% 和 33.33%，AML組 分 別 是95.24%、18.18%、74.07%和80.00%，在敏感性、特異性及陰性預(yù)測值方面，兩組對比，差異明顯（P＜0.05）；而陽性預(yù)測值比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表1。

表1 分析檢驗(yàn)結(jié)果（%）

2.2 分析MRD與復(fù)發(fā)率相關(guān)性

MRD陰性患者11例中，復(fù)發(fā)3例，復(fù)發(fā)率是27.27%；MRD陽性患者45例中，33例復(fù)發(fā)，復(fù)發(fā)率是73.33%，MRD陽性患者復(fù)發(fā)率較MRD陰性患者更高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

3 討論

現(xiàn)階段，流式細(xì)胞術(shù)被視為研究急性白血病的主要方法，其通過檢測MRD從而判定預(yù)后效果[5]。相關(guān)研究表明，誘導(dǎo)治療方法可將大部分AL細(xì)胞殺滅，但是全部清除難度較大，有些患者經(jīng)過化療后病情有所緩解，但是，依然伴有MRD陽性，經(jīng)過一段時(shí)間的發(fā)展出現(xiàn)復(fù)發(fā)，所以，截止到目前為止，MRD陽性在化療緩解程度評估中具有重要作用[6]。目前，臨床上主要通過骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢測方法判斷AL治療效果及診斷，盡管細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn)方式被視為診斷AL的金標(biāo)準(zhǔn)，但是局限性較大[7]，譬如：經(jīng)過骨髓穿刺得到的標(biāo)本僅可以將該部分骨髓狀況反映出來，但是，通常僅有在機(jī)體AL細(xì)胞數(shù)量在1%以上時(shí)才可以被檢出，而MRD依舊持續(xù)反映在外周血中，利用MRD檢查可將AL患者預(yù)后狀況更加全面的反映出來[8-10]。除此之外，針對急性白血病患者而言，骨髓穿刺方式具有較大的創(chuàng)傷性，而外周血取樣操作簡單且方便。

由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，ALL組敏感性、特異性、陽性預(yù)測值及陰性預(yù)測值分別是68.75%、62.50%、72.22%和33.33%，AML組 分 別 是 95.24%、18.18%、74.07% 和80.00%，在敏感性、特異性及陰性預(yù)測值方面，兩組對比，差異明顯（P＜0.05）；而陽性預(yù)測值比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；MRD陽性患者復(fù)發(fā)率（73.33%）較MRD陰性患者（27.27%）更高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。由此可見，MRD可被視為判斷AL預(yù)后的一個重要指標(biāo)。相關(guān)研究表明，MRD判定界限為0.01%，在0.01%以上的患者3年復(fù)發(fā)率相比于低于0.01%患者更高，大約是其3倍，所以，臨床上，通常以MRD檢驗(yàn)水平為依據(jù)劃分預(yù)后等級，并根據(jù)具體狀況開展相應(yīng)的化療方案，若MRD長時(shí)間呈陰性，則可以結(jié)束治療，若MRD長期呈陽性，則需要對化療方案進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整。

總而言之，急性白血病患者檢驗(yàn)過程中流式細(xì)胞術(shù)具有較高的敏感性，其可用于評估急性白細(xì)胞復(fù)發(fā)率，值得臨床進(jìn)一步推廣、采納。