簡(jiǎn)文文，魚(yú) 慶，王 敏，趙 柘，趙淑慧，汪宇佳，楊淑莉

(吉林大學(xué)第二醫(yī)院 婦產(chǎn)科，吉林 長(zhǎng)春130041)

卵巢惡性腫瘤致死率居于婦科惡性腫瘤首位[1]，由此人們對(duì)于卵巢癌的防治日益重視。TNF相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體即TRAIL屬于腫瘤壞死因子TNF之一，能夠有所針對(duì)性地促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡，并且不會(huì)對(duì)健康組織造成明顯的副作用[2]。山奈酚是一種具有抗癌、增強(qiáng)抗癌治療效果等多種生物功能的黃酮類(lèi)化合物[3]。卵巢惡性腫瘤以手術(shù)及化療為主的輔助治療為原則[1]?，F(xiàn)階段臨床的輔助治療手段因其副反應(yīng)重及易致耐藥性等原因而具有局限性，使得探索新型高效的抗癌治療方案勢(shì)在必行[4]。結(jié)合國(guó)內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)及報(bào)道，深入探討山奈酚致敏TRAIL誘導(dǎo)人卵巢癌細(xì)胞凋亡的相關(guān)機(jī)制，對(duì)于尋求新型輔助治療方案以便改善卵巢癌患者預(yù)后具有重要意義。

1 TRAIL與死亡受體

1.1 TRAIL信號(hào)傳導(dǎo)通路與死亡受體

腫瘤壞死因子相關(guān)的凋亡誘導(dǎo)配體 (TRAIL) 信號(hào)傳導(dǎo)通路是指以TRAIL為配體[5],通過(guò)與死亡受體 (DR4,DR5) 結(jié)合而啟動(dòng)細(xì)胞凋亡[6]從而達(dá)到治療癌癥的效果。TNF相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體即TRAIL屬于腫瘤壞死因子TNF之一。1995 年,Wiley 等從心肌 cDNA 文庫(kù)中克隆出 TRAIL 基因。后經(jīng)研究證實(shí)， TRAIL 的 mRNA 廣泛存在于各組織及器官。截至目前發(fā)現(xiàn)的TRAIL受體有5種： TRAIL-R1、TRAIL-R2、TRAIL-R3、TRAIL-R4 和 OPG,分為死亡受體和誘捕受體。死亡受體是 TRAIL 的功能型受體，分布廣泛[7]。死亡受體具有死亡結(jié)構(gòu)域由此可以傳遞死亡信號(hào)，當(dāng)TRAIL與之結(jié)合時(shí)能夠選擇性地誘導(dǎo)相關(guān)靶細(xì)胞凋亡從而抑制對(duì)應(yīng)的惡性腫瘤的發(fā)展與侵襲達(dá)到治療癌癥、維護(hù)機(jī)體健康的最終目的，死亡受體即TRAIL-R1 和 TRAIL-R2,又稱(chēng)為死亡受體 4 (DR4) 和死亡受體5 (DR5)。誘捕受體包括 TRAIL-R3、TRAIL-R4、OPG。因TRAIL-R1 和 TRAIL-R2與TRAIL傳導(dǎo)通路緊密相關(guān)，本文著重討論山奈酚致敏TRAIL與誘導(dǎo)人卵巢癌細(xì)胞凋亡的相關(guān)機(jī)制及前景，以期得到業(yè)界對(duì)相關(guān)領(lǐng)域的認(rèn)知及重視。

1.2 TRAIL應(yīng)用于癌癥治療的理論基礎(chǔ)

研究表明：原發(fā)腫瘤中誘捕受體存在異常甲基化，死亡受體異常甲基化罕見(jiàn)。正常組織中所有受體的異常甲基化均罕見(jiàn)。腫瘤組織中DR4 和 (或) DR5的表達(dá)并不受抑制甚至增加,這就為以 TRAIL 及 DR4 或 DR5的靶向腫瘤治療方案提供了依據(jù)[8]。TRAIL 能在對(duì)正常組織無(wú)明顯殺傷作用的前提下誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡如肺癌、卵巢癌、結(jié)腸癌等,與此同時(shí)副作用罕見(jiàn)[9]為其將來(lái)可能廣泛應(yīng)用于臨床奠定了相對(duì)安全的實(shí)踐基礎(chǔ)。重組的 rTRAIL 或有望研發(fā)為新型抗腫瘤細(xì)胞因子,現(xiàn)已進(jìn)入臨床研究，若將來(lái)得以適用于臨床,將從源頭遏制疾病的發(fā)展造福于廣大罹患癌癥的患者,具有劃時(shí)代意義。然而值得注意的是，TRAIL 受體在腫瘤中的表達(dá)及分布是以死亡受體為靶點(diǎn)的治療方案的重中之重，有數(shù)據(jù)顯示，乳腺癌等在TRAIL的基因所在位置大多存在等位缺失，肺癌等存在TRAIL的突變[5]，10.3%的卵巢癌患者DR4不表達(dá)，8.8%的卵巢癌患者DR4表達(dá)下調(diào)。以上相關(guān)研究可以充分說(shuō)明腫瘤與TRAIL存在關(guān)聯(lián)，但是,TRAIL 受體在腫瘤中的表達(dá)及分布尚未完全明確，亟待進(jìn)一步研究。若能將其對(duì)應(yīng)關(guān)系研究透徹，將有助于針對(duì)不同的腫瘤疾病給予精準(zhǔn)的靶向治療，將有限的醫(yī)療資源發(fā)揮最大的作用，可以最大程度的避免錯(cuò)誤治療及過(guò)度治療，達(dá)到提高治療效果、減少醫(yī)療開(kāi)支、改善患者預(yù)后的良好初衷。

1.3 TRAIL的抗癌協(xié)同性

不僅如此，TRAIL在可以安全高效抗癌的同時(shí)可以增強(qiáng)其他癌癥治療方案的療效,不同抗腫瘤制劑都能與 TRAIL 聯(lián)用而呈現(xiàn)協(xié)同性從而不僅降低機(jī)體對(duì) TRAIL 的耐藥性并且可以減少抗腫瘤制劑的使用，如此一來(lái)，增加了患者治療過(guò)程的可持續(xù)性，同時(shí)也使得抗腫瘤制劑的經(jīng)濟(jì)投入及機(jī)體副作用有所下降，這為T(mén)RAIL的合理利用及開(kāi)發(fā)提供了更加廣闊的前景。Sheridan等[10]的研究發(fā)現(xiàn)，TRAIL聯(lián)合化療藥物可以通過(guò)上調(diào)死亡受體DR5的表達(dá)從而誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞HepG2凋亡。陳儒新[11]發(fā)現(xiàn)TRAIL聯(lián)合卡鉑促進(jìn)人卵巢癌細(xì)胞A2780凋亡。胡文獻(xiàn)等[12]發(fā)現(xiàn)杭白菊提取液和重組腺病毒介導(dǎo)的TRAIL基因聯(lián)合作用于人大腸癌細(xì)胞株DLD1細(xì)胞使得凋亡率和TRAIL的死亡受體DR4和DR5表達(dá)水平均顯著上調(diào)。馮忻等[2]發(fā)現(xiàn)TRAIL與順鉑聯(lián)用可以協(xié)同抑制卵巢癌細(xì)胞株SKOV3和OVCAR3細(xì)胞的增殖，而這有可能與死亡受體DR4、DR5表達(dá)水平上調(diào)有所關(guān)聯(lián)，這與Arts等[13]對(duì)臨床卵巢癌患者的研究結(jié)果相互符合。以上相關(guān)研究均印證了死亡受體與不同抗腫瘤制劑聯(lián)用的可行性與科學(xué)性，有所收獲的同時(shí)也發(fā)現(xiàn)了一些尚未完全明確的疑問(wèn)，有關(guān)實(shí)驗(yàn)有待進(jìn)一步豐富以期為將來(lái)的實(shí)際臨床應(yīng)用引導(dǎo)更為明確的方向。

2 山奈酚的概述及作用機(jī)制

山奈酚 (kaempferol) 是一種具有高效、安全、低毒、抗癌協(xié)同性等特點(diǎn)的黃酮類(lèi)化合物，其廣泛存在于天然植物如水果、蔬菜、中草藥等[3]。又稱(chēng)山奈酚-3、山奈素、山奈黃酮醇、百蕊草素，具有抗癌、抗炎、抗過(guò)敏、鎮(zhèn)痛、增強(qiáng)抗癌藥物療效等多種生物功能[14]。充分的相關(guān)研究證明山奈酚能抑制惡性腫瘤的進(jìn)展,比如肺癌[15]、結(jié)腸癌[16]、肝癌[17]、乳腺癌[18]、膀胱癌[19]等；此外可以與其他腫瘤治療方案聯(lián)用協(xié)同抗癌[20]。山奈酚抗癌的作用機(jī)制如下文所述。

2.1 抑制腫瘤細(xì)胞增殖、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡

凋亡失調(diào)是腫瘤發(fā)生、進(jìn)展、轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵?？拱┧幬锆熜У闹匾笜?biāo)即其誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的能力。Lee 等[16]發(fā)現(xiàn)，山奈酚可以通過(guò)激活細(xì)胞表面凋亡受體和線粒體凋亡通路，從而促使結(jié)腸癌細(xì)胞 HT29 的凋亡，并呈現(xiàn)劑量依賴(lài)關(guān)系。山奈酚還可通過(guò)抑制細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶 / 絲裂原活化蛋白激酶(ERK/MAPK) 通路、磷脂酰肌醇 3- 激酶 / 蛋白激酶 ( PI3K-AKT) 通路誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞凋亡[15]，而對(duì)正常的胃細(xì)胞沒(méi)有明顯的不良影響。由此可見(jiàn),山奈酚抗癌機(jī)制多種多樣,相關(guān)領(lǐng)域并未完全明確,有待我們進(jìn)一步深入探索以便推動(dòng)從基因水平治愈癌癥的進(jìn)程。

2.2 調(diào)節(jié)細(xì)胞周期

阻滯細(xì)胞周期對(duì)于遏制癌癥尤為重要。MCF-7/DOX 阿霉素耐藥性乳腺鱗狀細(xì)胞癌 G2/M 經(jīng)山奈酚處理后周期阻滯，而 p53 基因和 p21 基因的表達(dá)隨之增加[21]。Choi等發(fā)現(xiàn)，山奈酚可引起人卵巢癌細(xì)胞中P53水平激增，從而激活CDKNlA使得CDK復(fù)合體失活以阻滯細(xì)胞周期[3]。綜上所述，山奈酚可通過(guò)多種機(jī)制阻滯細(xì)胞周期。不妨大膽設(shè)想,若山奈酚作用于腫瘤細(xì)胞則可以遏制癌癥;若山奈酚合理應(yīng)用于正常細(xì)胞,或許可以延緩衰老,增長(zhǎng)壽命。而后者尤其需要大量的實(shí)驗(yàn)予以證明是否具有科學(xué)性、可行性。

2.3 抑制腫瘤增殖、轉(zhuǎn)移、侵襲

癌細(xì)胞具有容易浸潤(rùn)、擴(kuò)散、轉(zhuǎn)移等性質(zhì)，使得僅僅依靠促使腫瘤細(xì)胞凋亡并不能根治癌癥或者遏制病程進(jìn)展，由此控制腫瘤細(xì)胞的侵襲亦是抗癌的關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)。山奈酚也可以通過(guò)抑制上皮 -間質(zhì)轉(zhuǎn)化抑制人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移[22]，以及抑制 AKT-1 介導(dǎo)的 Smad3 在 Thr179 殘基的磷酸化來(lái)抑制肺癌細(xì)胞遷移[23]。目前，有些癌癥因其病程進(jìn)展迅猛使得患者措手不及,然而山奈酚可以阻礙病程進(jìn)展有助于將腫瘤限于局部病灶,為患者得到及時(shí)救治爭(zhēng)取了寶貴的時(shí)間。

2.4 增強(qiáng)其他癌癥治療手段的療效

相關(guān)實(shí)驗(yàn)證明山奈酚可以增強(qiáng)放射治療、化學(xué)藥物治療的效果。山奈酚可通過(guò)抑制 PI3K/Akt 和 ERK 通路和激活線粒體凋亡通路增強(qiáng)放療對(duì)肺癌的治療效果[15]。山奈酚通過(guò)抑制原癌基因 c-myc 的轉(zhuǎn)錄協(xié)同增強(qiáng)了順鉑對(duì) OVCAR-3 卵巢癌細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用[20]。未來(lái)或許可將山奈酚用于癌癥輔助治療，與其他抗腫瘤方式聯(lián)用，以便提高療效減少副作用改善患者預(yù)后。

3 總結(jié)

隨著生活環(huán)境的改變，醫(yī)療等科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，人們?cè)桨l(fā)關(guān)注惡性腫瘤如卵巢癌的防治。卵巢惡性腫瘤患者首先考慮手術(shù)，對(duì)于失去手術(shù)時(shí)機(jī)，不能耐受手術(shù)及術(shù)后患者等情況，就需要結(jié)合患者具體病情采用以化療為主的輔助性治療[1]?，F(xiàn)階段臨床的輔助治療手段是以鉑類(lèi)藥物為基礎(chǔ)的聯(lián)合化療。鉑類(lèi)藥物不良反應(yīng)嚴(yán)重且長(zhǎng)期使用容易產(chǎn)生耐藥性，所以尋求更安全更有效的治療方案成為大勢(shì)所趨[4]。細(xì)胞凋亡是藥物抑制腫瘤細(xì)胞增殖的主要作用機(jī)制，以 TRAIL 及其受體為靶點(diǎn)的腫瘤治療為國(guó)內(nèi)外的相關(guān)研究開(kāi)辟了一條新的道路。TRAIL誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡的相關(guān)機(jī)制有待進(jìn)一步探索及明確，以便從源頭攻克癌癥防治這一世界性難題。山奈酚具有天然、高效、低毒、抗癌協(xié)同性等特點(diǎn)，使其成為國(guó)內(nèi)外尋求新型抗癌治療方案以提高療效的研究熱點(diǎn)，山奈酚致敏TRAIL誘導(dǎo)人卵巢癌細(xì)胞凋亡將會(huì)使得已有相關(guān)研究更為豐富，為腫瘤的防治提供新穎可行的思路。