朱珍珍

（上海交通大學(xué)藥學(xué)院 上海 200240）

介于DDI對藥物在體內(nèi)代謝及處置過程產(chǎn)生的重要影響，在FDA和CFDA頒布的臨床前研究指導(dǎo)中已經(jīng)明確要求在新藥臨床研究申請（IND）時遞交的研究資料要包含CYP的抑制和誘導(dǎo)。為規(guī)避后期研發(fā)風(fēng)險，很多制藥公司已利用上述體外研究手段將DDI的研究提至藥物發(fā)現(xiàn)的早期。DDI大致分為由代謝酶引起的DDI和由轉(zhuǎn)運體引起的DDI。

1.代謝酶介導(dǎo)的DDI

由代謝酶的抑制或誘導(dǎo)產(chǎn)生的DDI是臨床上引起DDI最重要的原因之一。代謝酶的抑制可能會導(dǎo)致藥物代謝受阻，降低體內(nèi)清除率，體內(nèi)暴露量增加，引起毒性反應(yīng)。代謝酶的誘導(dǎo)可能會使藥物在體內(nèi)的代謝和清除加快，體內(nèi)暴露量降低，而無法達(dá)到藥效。藥物代謝酶種類繁多，而CYP家族是最重要的代謝酶家族之一，其參與了市場約75%的藥物的代謝。因此CYP介導(dǎo)的DDI是重點考察對象。

很多藥物研發(fā)公司在新藥發(fā)現(xiàn)早期（一般確定體外藥效后）就開展CYP抑制研究。在該階段，推薦混合底物法，簡單研究化合物對5個主要CYP（CYP1A2、2C9、2C19、2D6和3A4）的抑制情況。研發(fā)中期，建議用單一底物法，分別考察化合物對不同CYP的抑制情況。目前，CFDA指導(dǎo)原則建議對CYP同工酶中的CYP1A2、2B6、2C8、2C9、2C19、2D6和3A4等的抑制考察。今年10月25號FDA頒布的FDA指導(dǎo)原則建議用可逆抑制和不可逆抑制兩種實驗體系同時考察化合物對以上七種主要CYP的抑制情況。除了上述要求的7個重要的CYP同工酶，根據(jù)化合物的特性，也需要根據(jù)不同新藥研發(fā)項目特點，酌情考慮是否需要做CYP2A6、2J2、4F2、2E1及MAO、FMO等一相代謝酶和二相代謝酶UGTs的抑制研究。

研化合物對CYP的誘導(dǎo)實驗一般在確定PCC階段期進(jìn)行，前期若需要，建議可通過研究對孕烷受體PXR的誘導(dǎo)作用來評價其誘導(dǎo)能力。CFDA指導(dǎo)原則指出“對于藥物對P450酶的誘導(dǎo)應(yīng)該重點對人CYP3A4、1A2、2B6進(jìn)行評估。體外誘導(dǎo)試驗可運用人肝細(xì)胞多次給藥后相關(guān)mRNA表達(dá)和/或酶活性的變化進(jìn)行評價”。最新FDA指導(dǎo)原則提出，可先對這三種CYP進(jìn)行誘導(dǎo)研究，若研究表明化合物對CYP3A4/5有誘導(dǎo)作用，則需考察該受試物對CYP2C家族的誘導(dǎo)情況。對于評估標(biāo)準(zhǔn)，F(xiàn)DA最新指導(dǎo)原則則去掉了對酶活的考察，建議直接根據(jù)mRNA的表達(dá)量進(jìn)行評估。

除誘導(dǎo)和抑制，還需對化合物的代謝酶進(jìn)行表型研究。該研究主要是了解化合物的代謝途徑，亦可指導(dǎo)臨床用藥。若化合物主要被某代謝酶代謝，其代謝亦可能被該酶的抑制劑抑制或被其誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)。

2.轉(zhuǎn)運體介導(dǎo)的DDI

轉(zhuǎn)運體廣泛存在于腸道及各重要器官中，對轉(zhuǎn)運體的抑制或誘導(dǎo)可能直接對受害化合物的吸收、在各器官的分布及消除產(chǎn)生影響。較重要且研究廣泛的轉(zhuǎn)運體有：多藥耐藥蛋白P-gp,乳腺癌耐藥蛋白BCRP,有機陰離子轉(zhuǎn)運多肽OATP1B1和OATP1B3，有機陰離子轉(zhuǎn)運體OAT1和OAT3，有機陽離子轉(zhuǎn)運體OCT2以及藥物和毒素的外排蛋白MATE。目前尚無有效的體外手段做轉(zhuǎn)運體的誘導(dǎo)研究，因此以下介紹的轉(zhuǎn)運體DDI主要包括研究化合物是否是轉(zhuǎn)運體的底物和是否是轉(zhuǎn)運體的抑制劑兩方面。

在新藥研發(fā)早期很少進(jìn)行轉(zhuǎn)運體研究，但在提交IND申請時，F(xiàn)DA和CFDA對轉(zhuǎn)運體研究都有建議。CFDA要求，對具有重要臨床意義的外排和攝入轉(zhuǎn)運體主要包括P-gp、BCRP、OATP1B1、OATP1B3、OAT1、OAT3和OCT2等進(jìn)行研究。其他轉(zhuǎn)運體研究必要時亦可。FDA指導(dǎo)原則如下：

（1）P-gp和BCRP廣泛存在于腸道、肝、腎、腦等各個組織或器官，這兩個轉(zhuǎn)運體可能會影響化合物的口服吸收以及其在體內(nèi)的分布、代謝和消除。推薦考察這兩個轉(zhuǎn)運體的研究。

（2）OATP1B1和OATP1B3廣泛分布于肝臟的外排轉(zhuǎn)運體，若前期研究表明化合物主要經(jīng)過肝臟代謝或消除，需考察這兩轉(zhuǎn)運的DDI研究。

（3）OAT、OCT和MATE主要分布在腎臟，影響化合物經(jīng)腎臟排泄途徑。對主要經(jīng)腎臟排泄的化合物或臨床上要聯(lián)用的藥物經(jīng)腎臟的，建議考察OAT1、OAT3、OCT2和MATE的DDI研究。

3.小結(jié)

因CYP酶在藥物代謝中的重要性，小分子化藥，要求在遞交IND申請前，完成化合物的CYP酶表型研究，主要7個CYP的抑制研究及CYP1A2、2B6和3A4的誘導(dǎo)研究。若前期研究表明CYP基本不參與化合物代謝，則無需CYP表型研究。對于轉(zhuǎn)運體的DDI研究，要依具體項目具體分析。若化合物主經(jīng)尿液排泄，則建議考察腎臟中分布比較廣泛的OAT、OCT和MATE研究。如果某類治療領(lǐng)域，已知臨床上可能需要和一些藥物聯(lián)用。而該類聯(lián)用藥物已知有DDI風(fēng)險或是某類轉(zhuǎn)運體的底物，則需增加考察化合物對該類轉(zhuǎn)運體進(jìn)行研究。例如，若降血脂類藥物，已知臨床上可能要和他汀類聯(lián)用，而他汀類是OATP1B1和1B3的底物。因此需考察該化合物是否是OATP1B1和1B3的抑制劑。另，本文只探討體外研究策略，對于體外研究表明有DDI風(fēng)險的，可結(jié)合指導(dǎo)原則中的決策樹及具體項目特點，綜合考慮臨床實驗是否需增加DDI研究。

[1] In Vitro Metabolism-and Transporter-Mediated Drug-Drug Interaction Studies Guidance for Industry. FDA, issued on Oct.2017.

[2]《藥物非臨床藥代動力學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則》，CFDA 20140513.