段元山 曲藝琳 陳貝 楊楷（通訊作者）

（湖北省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院 湖北 武漢 430000）

肺炎鏈球菌是社區(qū)獲得性肺炎主要病原體，在老年患者和幼兒患者中致病率較高[1]。準(zhǔn)確、及時(shí)地鑒定社區(qū)獲得性肺炎的病原體，可以盡早采取治療措施，降低病死率。目前，肺炎鏈球菌感染的診斷主要通過細(xì)菌分離培養(yǎng)和鑒定實(shí)現(xiàn)，該方法陽性率較低[2]。肺炎鏈球菌自溶素蛋白LytA具有免疫活性，可以刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，而且其基因序列在不同血型間具有高度保守性，因而有可能成為血清學(xué)診斷指標(biāo)。本次研究通過以肺炎鏈球菌自溶素蛋白LytA為抗原，并檢測其抗體在健康人和社區(qū)獲得性肺炎患者外周血中水平，分析其在社區(qū)獲得性肺炎的血清學(xué)診斷中意義，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1.材料與方法

1.1 材料

肺炎鏈球菌（ATCC49619）由衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心提供。

1.2 血清標(biāo)本

健康組（對照組）30例，其中男14例，女16例，平均年齡49.3歲，為健康體檢者，其中痰培養(yǎng)肺炎鏈球菌陽性9例。社區(qū)獲得性肺炎患者組（研究組）30例，其中男15例，女15例，平均年齡48.8歲，選自我院2016～2017年呼吸內(nèi)科住院患者，診斷依據(jù)為《社區(qū)獲得性肺炎診斷和治療指南》[3]，其中痰培養(yǎng)肺炎鏈球菌陽性8例。兩組在年齡、性別之間無顯著性差異（P＞0.05），具有可比性。

1.3 方法

采用ELISA方法檢測血清抗體：將純化的rLytA蛋白用包被液稀釋到50μg/ml，并以50μL/孔加入酶標(biāo)儀中，在4℃下過夜；分別加入對照組和研究組待測血清樣本50μL/孔；加入HRP-兔抗人IgM抗體；用四甲基聯(lián)苯胺顯色；測定OD450nm值，比較各組差異；以研究組OD450nm值與對照組OD450nm值之比大于2.1為陽性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

所有數(shù)據(jù)采用SPSS19.0軟件進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

采用ELISA方法檢測結(jié)果顯示，研究組IgM類抗LytA抗體陽性例數(shù)為9例，陽性率為30.0%，對照組均為陰性，研究組敏感度明顯高于對照組，結(jié)果具有顯著性差異（P＜0.05）。研究組中痰培養(yǎng)陽性有8例，陽性率為22.2%，與IgM類抗LytA抗體檢測陽性率30.0%相比，兩者無顯著性差異（P＞0.05）。對照組痰培養(yǎng)陽性有9例，陽性率為30.0%，檢測研究組患者rLytA類抗體特異度為100%，痰培養(yǎng)為70%，兩者具有顯著性差異（P＜0.05）。陽性預(yù)測值為100%，IgM類抗LytA抗體的陽性結(jié)果具有確切診斷意義，該方法可以用于社區(qū)獲得性肺炎的早期檢測、診斷。

3.討論

社區(qū)獲得性肺炎是一種臨床常見感染類疾病，具有病死率高的特點(diǎn)，肺炎鏈球菌是其主要病原體，而肺炎鏈球菌的青霉素耐藥率高,呈多藥耐藥性[4]。因而，早期快速診斷疾病可以進(jìn)行更加針對性用藥，減少細(xì)菌耐藥率。本研究通過以肺炎鏈球菌自溶素蛋白LytA為抗原，并檢測其抗體在健康人和社區(qū)獲得性肺炎患者外周血中水平，探究其在社區(qū)獲得性肺炎的血清學(xué)診斷中意義。

本次研究結(jié)果表明，測得血清學(xué)診斷的敏感度、特異度分別為30.0%和100.0%，痰培養(yǎng)的敏感度和特異度分別為22.2%和70.0%。血清學(xué)診斷的敏感度與痰培養(yǎng)相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），但特異度顯著高于常規(guī)痰培養(yǎng)結(jié)果（P＜0.05）。陽性預(yù)測值為100%，IgM類抗LytA抗體的陽性結(jié)果具有確切診斷意義，該方法可以用于社區(qū)獲得性肺炎的早期檢測、診斷。此外，血清學(xué)檢測方法相比較常規(guī)痰培養(yǎng)方法，還具有快速、客觀以及不受使用抗生素影響等優(yōu)點(diǎn)。

綜上所述，以肺炎鏈球菌自溶素蛋白LytA為抗原，采用ELISA反應(yīng)模式，檢測IgM類LytA抗體，為早期診斷、檢測鏈球菌感染性肺炎成為可能，值得臨床推廣。