孫廣澤 張明珠

摘 要：建立反相高效液相色譜法測(cè)定刺五加膠囊中紫丁香苷的含量。方法：采用奧泰公司C18色譜柱（220mm×4.6mm，5μm），乙腈-甲醇-0.1mol/L醋酸溶液（10∶15∶75）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為265nm，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃。紫丁香苷在1～32μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。紫丁香苷平均回收率分別為99.6%。結(jié)論：本法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，可用于刺五加膠囊中紫丁香苷的含量測(cè)定。

關(guān)鍵詞：刺五加膠囊；含量；測(cè)定

刺五加膠囊具有益氣健脾，補(bǔ)腎安神功效。刺五加膠囊常用于脾腎陽(yáng)虛、體虛乏力、食欲不振、失眠多夢(mèng)等。刺五加在中國(guó)醫(yī)藥學(xué)中做為藥物廣泛應(yīng)用已有悠久的歷史，具有補(bǔ)腎強(qiáng)腰、益氣安神、活血通絡(luò)的功效。《藥性論》記載：“能破逐惡風(fēng)血，四肢不遂，賊風(fēng)傷人，軟腳，暨腰，主多年瘀血在皮肌，治痹濕內(nèi)不足，主虛贏，小兒三歲不能行?！贝涛寮泳哂忻庖哒{(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗輻射、抗應(yīng)激、耐缺氧、抗衰老等藥理作用[1-6]。本文采用高效液相法對(duì)刺五加膠囊中的紫丁香苷的進(jìn)行了含量測(cè)定。

1 儀器與試藥

1.1 儀器：VWR天平防震墊（北京慧龍環(huán)科環(huán)境儀器有限公司）；JJ-BF 0.001g天平（上海仁沃實(shí)業(yè)發(fā)展有限公司）；YLC1620A高效液相色譜儀（河南鄭州南北儀器設(shè)備有限公司）；RU超純水機(jī)（上海同田生物技術(shù)有限公司）；長(zhǎng)城獅鼎SHB-III型臺(tái)式循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司）；Milli-Q Direct水純化系統(tǒng)（上海力晶科學(xué)儀器有限公司）；DX-208恒溫水浴槽（北京長(zhǎng)流科學(xué)儀器有限公司）；天星進(jìn)樣瓶清洗機(jī)TX-500型（北京天星科儀科技有限公司）。

1.2 色譜柱：奧泰公司C18色譜柱（220mm×4.6mm，5μm）。

1.3 對(duì)照品：紫丁香苷。

1.4 試劑：醋酸鈉（北京市津同樂(lè)泰化工產(chǎn)品有限公司）、冰醋酸（北京市津同樂(lè)泰化工產(chǎn)品有限公司）、甲醇（北京市津同樂(lè)泰化工產(chǎn)品有限公司）、三乙胺（昆山諾普森實(shí)驗(yàn)室用品科技有限公司）、磷酸二氫銨（北京市津同樂(lè)泰化工產(chǎn)品有限公司）、乙腈（北京市津同樂(lè)泰化工產(chǎn)品有限公司）。

1.5 試藥：刺五加膠囊

2 測(cè)定方法確定

2.1 色譜條件

依據(jù)查閱文獻(xiàn)及考查的結(jié)果，確定色譜條件如下。流動(dòng)相：乙腈-甲醇-0.1mol/L醋酸溶液（10∶15∶75）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)：265nm，流速：1.0m·min-1。柱溫：30℃。理論板數(shù)按紫丁香苷峰計(jì)算應(yīng)不得低于2500。

2.2 對(duì)照品溶液的制備

取在60℃減壓干燥4小時(shí)的紫丁香苷對(duì)照品適量，精密稱定，加流動(dòng)相制成每lml含5μg的溶液，即得。

2.3 供試品溶液的制備

取本品內(nèi)容物適量，精密稱定，加15毫升甲醇溶液超聲處理0.5小時(shí)，放冷，濾過(guò)，濾液置25ml量瓶中，用少量甲醇溶液分次洗滌容器和殘?jiān)匆簽V人同一量瓶中，加甲醇溶液至刻度，搖勻，即得。

2.4 精密度試驗(yàn)

精密稱取紫丁香苷對(duì)照品適量，加流動(dòng)相使溶解，制成濃度為5μg·mL-1的供試品溶液。照上述色譜條件，精密吸取10μl，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄峰面積。結(jié)果，RSD=0.66%，表明本方法精密度良好。

2.5 對(duì)照品的線性考察

精密稱取適量紫丁香苷對(duì)照品，加入流動(dòng)相溶液使溶解分別配制成每毫升含1、2、4、8、16、32微克的溶液。分別精密上述溶液吸取10μL，注人液相色譜儀，依照2.1項(xiàng)下的色譜條件測(cè)定，記錄色譜峰。以峰面積（Y）為縱坐標(biāo)，對(duì)照品進(jìn)樣量（X）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明，紫丁香苷在1～32μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.6 重現(xiàn)性試驗(yàn)

稱取同一批的紫丁香苷樣品6份，按測(cè)定方法項(xiàng)下的方法制備供試品溶液，測(cè)定含量，并計(jì)算樣品的RSD值，結(jié)果RSD為0.91%，結(jié)果表明此方法的重現(xiàn)性良好。

2.7 準(zhǔn)確度試驗(yàn)

取對(duì)照品適量，精密稱取已知含量的樣品9份，置量瓶中，分別精密加入紫丁香苷對(duì)照品，按項(xiàng)下方法制備成80%、100%、120%。取模擬樣品照“ 含量測(cè)定”項(xiàng)下方法試驗(yàn)，計(jì)算回收率為99.6%，RSD為0.88%。

2.8 樣品含量測(cè)定

3 討論

分別考察甲醇-0.03mol·L-1醋酸銨（60∶40），乙腈-甲醇-0.1mol/L醋酸溶液（25∶15∶60），甲醇-水（45∶55），乙腈-水（15∶85），乙腈-0.1%甲酸水（20∶80），乙腈-甲醇-0.1mol/L醋酸溶液（10∶15∶75）不同比例的流動(dòng)相，結(jié)果以乙腈-甲醇-0.1mol/L醋酸溶液（10∶15∶75）為流動(dòng)相為流動(dòng)相，供試品各峰分離效果最好，故選用乙腈-甲醇-0.1mol/L醋酸溶液（10∶15∶75）為流動(dòng)相為流動(dòng)相。本實(shí)驗(yàn)采用高效液相法效果好、方法簡(jiǎn)便、快捷、準(zhǔn)確、專屬性好，可用于刺五加膠囊中紫丁香苷的含量測(cè)定。

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