徐 鵬,胡國艷,邱萍英,何柯新,洪劍浩,林裕龍

(廣州醫(yī)科大學(xué)附屬腦科醫(yī)院檢驗科，廣州 510370)

雙相情感障礙(BD)是一種常見的重性精神疾病，全球有超過3億5千萬例患者[1-2],其臨床表現(xiàn)多樣、病程復(fù)雜、自殺風(fēng)險大、預(yù)后轉(zhuǎn)歸不良，嚴重影響患者的日常生活和社會功能。心境穩(wěn)定劑、非典型抗精神病藥物和抗抑郁藥物是改善患者臨床癥狀的重要手段[3]；但臨床實踐中由于個體藥物代謝能力的差異，治療無效和藥物不良反應(yīng)[4](ADR)事件時有發(fā)生。近年來藥物基因組學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，藥物代謝酶(如CYP2C19)的基因多態(tài)性是導(dǎo)致酶活性差異及臨床藥物代謝個體差異的主要原因之一[5-6]。

CYP2C19是P450酶系超家族中的一種重要藥物代謝酶，其活性強弱決定藥物代謝速率的快慢。CYP2C19的基因具有高度的遺傳多態(tài)性，其中CYP2C19*1是編碼正常催化酶活性的野生型基因，CYP2C19*2和CYP2C19*3是最常見的功能缺失型等位基因，覆蓋中國人群99%以上的缺失型等位基因，與藥物代謝關(guān)系也最為密切。因此本研究主要針對CYP2C19*1、CYP2C19*2和CYP2C19*3這3種等位基因進行探討分析。

目前國內(nèi)少有關(guān)于雙相情感障礙人群的CYP2C19基因多態(tài)性和代謝表型的大樣本量研究報道，本研究通過選取本院收治的1 043例雙相情感障礙患者進行CYP2C19基因多態(tài)性研究，為臨床合理用藥提供理論參考和指導(dǎo)?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2014年1月至2016年11月在廣州醫(yī)科大學(xué)附屬腦科醫(yī)院住院的雙相情感障礙患者1 043例，對其臨床資料進行回顧性分析。其中男594例、女449例，平均年齡(33.3±10.7)歲。所有患者均為漢族，符合《國際疾病分類(第10版)》(ICD-10)雙相情感障礙診斷標(biāo)準，為使基因型分布更具有客觀性，本研究排除所有有血緣關(guān)系的家族性患者以及診斷不明確或合并其他精神障礙的患者。

1.2儀器與試劑 Baio CYP2C19基因檢測試劑盒(DNA微陣列芯片法)、Baio DNA提取純化試劑盒、BaiO雜交顯色試劑盒、引物合成、聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)儀、e-Hyb全自動雜交儀、BaiO BE-2.0生物芯片識讀儀等主要試劑與儀器均由上海百傲科技有限公司提供。

1.3方法 用乙二胺四乙酸抗凝管抽取所有患者空腹外周靜脈血2 mL，用DNA 提取試劑盒提取基因組全血DNA,-20 ℃存儲備用；利用上海百傲科技有限公司的CYP2C19基因芯片檢測系統(tǒng)檢測目的基因，依次進行全血DNA提取模板、PCR擴增目的基因、芯片雜交顯色、芯片色斑信號放大、ArrayDoctorV2.0掃描及判讀結(jié)果，給出CYP2C19基因SNP信息，并設(shè)陽性及陰性對照進行質(zhì)量控制，各步驟嚴格按照儀器及Baio CYP2C19基因檢測試劑盒說明進行操作。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS19.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)處理。用Hardy-Weinberg平衡進行群體遺傳分析以檢驗樣本的群體代表性，用基因計數(shù)法計算基因型頻率和等位基因頻率，不同性別之間CYP2C19基因型和代謝表型以百分率及例表示，組間比較用χ2檢驗，檢驗水準α=0.05，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1Hardy-Weinberg遺傳平衡定律檢驗 對收集到的1 043例雙相情感障礙患者CYP2C19基因G681A位點的檢測數(shù)據(jù)進行Hardy-Weinberg遺傳平衡定律檢驗，計算檢驗結(jié)果P=0.702;CYP2C19基因G636A位點的Hardy-Weinberg遺傳平衡定律檢驗結(jié)果P=0.077。兩位點基因型頻率的平衡檢驗差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，樣本具有本區(qū)域群體代表性。見表1。

表1 CYP2C19基因型Hardy-Weinberg遺傳平衡檢驗

2.2CYP2C19基因型分布和等位基因分布 本研究人群中，*1/*1型基因頻率40.6%最多，*1/*2型基因頻率次之，*3/*3型基因頻率最少；不同性別間的CYP2C19的基因型頻率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=2.839,P=0.725)，見表2。CYP2C19等位基因型別頻率分布以*1型63.4%最多，*2次之，*3型最少；不同性別間的等位基因型別頻率分布差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=2.087,P=0.352)，見表3。CYP2C19單核苷酸多態(tài)性(SNP)分布顯示,681位點G>A堿基突變率(31.8%)明顯高于636位點的G>A堿基突變率(4.8%)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，見表4。

表2 CYP2C19基因型分布[n(%)]

表3 CYP2C19等位基因型別頻率分布[n(%)]

注:每例受檢者2條等位基因,故每個位點總數(shù)均為2 086條

表4 CYP2C19基因多態(tài)性分布[n(%)]

注:每例受檢者2條等位基因,故每個位點總數(shù)均為2 086條；與636位點比較，*P<0.01

2.3CYP2C19代謝表型頻率分布 中等代謝型(*1/*2、*1/*3)頻率最多，快代謝型(*1/*1)頻率次之，慢代謝型(*2/*2、*2/*3、*3/*3)頻率最少；不同性別間的CYP2C19表型分布差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.217,P=0.897)。見表5。

表5 CYP2C19代謝型分布[n(%)]

3 討 論

雙相情感障礙在世界范圍內(nèi)發(fā)病率高達2%～5%[2]，好發(fā)于各個年齡階段,表現(xiàn)為反復(fù)發(fā)作的心境和活動水平明顯紊亂，嚴重影響患者的日常生活和社會功能，患者往往需要長期甚至終身服藥以控制病情。臨床治療中常規(guī)憑借經(jīng)驗用藥的方式易引發(fā)藥物不良反應(yīng)。隨著藥物基因組學(xué)的發(fā)展，藥物代謝酶基因多態(tài)性的研究越來越受到臨床醫(yī)師的重視，充分評估、權(quán)衡患者的基因特征實施個體化治療有助于控制臨床ADR事件的發(fā)生。

CYP2C19是人體內(nèi)的一種重要的藥物代謝酶，參與多種治療雙相情感障礙藥物(如丙戊酸鹽、西酞普蘭、氟西汀等)在人體內(nèi)的代謝[7]。其基因具有高度的遺傳多態(tài)性，目前已報道并命名的等位基因共有48種，其中CYP2C19*1是具有正常催化酶活性的野生型基因，CYP2C19*17為催化酶活性增強的等位基因，其余均為功能缺失型等位基因；中國人群中99%以上的功能缺失型等位基因均為CYP2C19*2和CYP2C19*3型等位基因[8]。功能缺失型等位基因會導(dǎo)致酶活性降低，代謝能力下降，常規(guī)劑量的藥物也會導(dǎo)致較高的血藥水平。大量研究表明,CYP2C19基因型存在著廣泛的地域、種族差異[9-10]，調(diào)查不同人群的CYP2C19基因多態(tài)性的分布特征有助于指導(dǎo)臨床用藥。

本研究中，CYP2C19基因型和等位基因頻率分析顯示,*1/*1型比例占雙相情感障礙患者的40.6%，提示有59.4%的患者CYP2C19的基因存在變異(發(fā)生單突變或雙突變)，突變率較高；681位點的變異頻率明顯高于636位點，等位基因雜合子變異(G/A)遠高于純合子變異(A/A)；所有受檢對象中，僅發(fā)現(xiàn)5例*3/*3(636AA,681GG)基因型。上述數(shù)據(jù)可推測有約60.0%的雙相情感障礙患者在服用經(jīng)CYP2C19酶代謝的藥物時存在潛在的藥物蓄積風(fēng)險。快代謝型、中等代謝型、慢代謝型3種代謝表型所占比例分別為40.5%、45.8%、13.7%，雖然慢代謝型的比例最少，但鑒于我國人口基數(shù)及雙相情感障礙的高發(fā)病率，慢代謝型雙相情感障礙患者的數(shù)量仍然十分龐大。慢代謝型患者在使用經(jīng)CYP2C19代謝的藥物時，需注意降低服藥劑量以避免ADR事件的發(fā)生。

本研究中，不同性別人群之間CYP2C19基因型及表型差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，提示在與CYP2C19基因多態(tài)性分布的研究中，不必過多地考慮性別因素。

綜上所述，本研究樣本量較大，群體代表性良好，統(tǒng)計結(jié)果對于雙相情感障礙人群的CYP2C19基因多態(tài)性分布研究具有一定的指導(dǎo)意義。

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