□ 徐 鎮(zhèn) 宿遷市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所

1 三氯蔗糖及其測定

三 氯 蔗 糖（Sucralose或TGS CNS：19.016；INS：955），又稱蔗糖素、蔗糖晶、三氯半乳糖，是由英國泰萊公司（Tate&Lyie）與倫敦大學(xué)共同研制并于1976年申請專利的一種新型甜味劑。三氯蔗糖通常為白色粉末狀，其物化性質(zhì)與蔗糖相似，高溫、酸堿性、溫度、pH值對其影響幾乎可以忽略，適用于食品加工中的諸多環(huán)節(jié)。在不同條件下，三氯蔗糖的甜度約為蔗糖的400～800倍，甜味在純正感、呈現(xiàn)速度、感受強(qiáng)度、持續(xù)時(shí)間、無任何后苦味等甜味特性上與蔗糖也保持著高度的相似性，目前是世界上公認(rèn)的強(qiáng)力甜味劑。在我國，三氯蔗糖是批準(zhǔn)使用的甜味劑，在食品加工與儲存過程中表現(xiàn)穩(wěn)定[1]。但三氯蔗糖作為食品制作中的原材料之一，其攝入隨著攝入量的增加也可能會對人體產(chǎn)生不同程度的影響，研究發(fā)現(xiàn)三氯蔗糖及其水解產(chǎn)物有可能會造成DNA的損傷[2]?；谝陨先日崽堑男再|(zhì)、應(yīng)用及其可能存在的危害，國家對食品中三氯蔗糖的含量、測定等方面做出了相應(yīng)的規(guī)定。除此之外，我國專家和研究者也對三氯蔗糖的測定方法展開了一些探究，三氯蔗糖紫外吸收弱，陳璐瑩等人研究了紫外衍生-高效液相色譜法，不再使用選擇性弱的蒸發(fā)光或示差折光檢驗(yàn)器[3]，其他一些學(xué)者還開發(fā)了柱后補(bǔ)償-液相色譜-電噴霧式檢測器測定、安培檢測-離子色譜法等檢測方法，筆者將根據(jù)現(xiàn)有本單位實(shí)驗(yàn)室條件對三氯蔗糖的測定提出優(yōu)化方法及建議。

2 含乳食品中三氯蔗糖的快速測定

2.1 原理

檢測前必須考慮含乳食品中含有較多的蛋白質(zhì)和脂肪等，本試驗(yàn)中采用國標(biāo)中常用的沉淀劑凈化，選用3 μm粒徑色譜柱提高分離能力，用選擇性較好的質(zhì)譜儀作為檢測器，實(shí)現(xiàn)含乳食品中三氯蔗糖的快速測定。

2.2 試劑材料及儀器

本方法中所需材料包括甲酸（色譜純）、乙腈（色譜純）、甲酸銨（色譜純）、水系0.22 μm微孔濾膜和濾器、亞鐵氰化鉀、乙酸鋅、三氯蔗糖標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、實(shí)驗(yàn)用水一級水、高純氮?dú)狻⒏呒儦鍤馀c色譜柱。試驗(yàn)所需儀器包括離心機(jī)、液質(zhì)聯(lián)用儀TSQ QUANTUM ACCESS、超聲清洗儀、電子分析天平。

2.3 樣品前處理方法

稱取5 g（乳粉類稱取1.5 g）樣品于100 mL具塞比色管中，加入約20 mL水渦旋混勻，補(bǔ)水至約70 mL，混勻后超聲處理10 min，冷卻至室溫，加入5 mL亞鐵氰化鉀溶液和5 mL乙酸鋅溶液[4]，用水定容至刻度，上下顛倒數(shù)次混勻，轉(zhuǎn)移50 mL提取液于離心管中，10 000 r/min離心10 min，取離心后的上清液過0.22 μm水系濾器，上機(jī)檢測。

2.4 色譜條件

色譜柱：Hypersil GOLD150 mm×2.1 mm 3 μm，C18。流動相：20%乙腈80% 5 mmol甲酸銨（含0.1%甲酸）。流速300 μL/min；進(jìn)樣量20 μL；柱溫40 ℃。前2 min切進(jìn)廢液管路，2～3.2 min切進(jìn)質(zhì)譜檢測管路3.2～3.5 min切進(jìn)廢液管路

2.5 質(zhì)譜條件

多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）、負(fù)離子模式、噴霧電壓 3500、鞘氣壓力 30、輔助氣壓力 5、離子傳輸管溫度 350、 碰撞氣壓力 1.5。

2.6 方法摸索結(jié)果

（1）流動相溶解：直接注射入質(zhì)譜，負(fù)離子模式下三氯蔗糖一級質(zhì)譜圖，母離子主要為395和397。

（2）三氯蔗糖色譜圖：離子對分別為（395，359）和（397，361），選擇豐度較大的離子對（395，359）為定量離子。

（3）方法線性范圍0.1～20 μg/mL；校正曲線方程 y=12125.2+23684.3x R2=0.9969。

（4）方法檢出限：取樣量為5 g時(shí)為0.000 5 g/kg

2.7 加標(biāo)方法及結(jié)果

加標(biāo)方法：GB 22255-2014《食品中三氯蔗糖（蔗糖素）的測定》中三氯蔗糖檢出限為0.002 5 g/kg，GB2760-2014《食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》中乳制品允許添加量為0.3 g/kg，乳粉為1.0 g/kg。本文的方法檢出限為0.000 5 g/kg。選擇這3個點(diǎn)添加測試，按前處理方法稱樣處理。三氯蔗糖加標(biāo)回收率和精密度見表2。

表1 三氯蔗糖監(jiān)測中離子對、碰撞能量等條件參數(shù)

表2 三氯蔗糖加標(biāo)回收率和精密度（n=6）

2.8 方法優(yōu)劣的比較

相對于現(xiàn)存的一些液相色譜測定方法，本方法的優(yōu)勢包括以下幾個方面。第一，前處理過程簡單，可同時(shí)快速處理多批樣品。而標(biāo)準(zhǔn)中含蛋白脂肪的樣品處理速度很慢而且不宜批量操作。本方法在前處理過程中沒有采取標(biāo)準(zhǔn)上固相萃取凈化，導(dǎo)致提取液中可能含有一些鹽類，但質(zhì)譜儀上配有切換閥，可以實(shí)現(xiàn)將部分雜質(zhì)切換到廢液管路，減少了雜質(zhì)對質(zhì)譜內(nèi)部的污染。第二，質(zhì)譜可以通過離子對定性，選擇性好，標(biāo)準(zhǔn)上的兩款檢測器選擇性都比較差，主要是通過保留時(shí)間定性，定性結(jié)果的可靠性較低。第三，檢出限比標(biāo)準(zhǔn)上的低，三氯蔗糖含量在標(biāo)準(zhǔn)上檢出限附近時(shí)仍然有較好的響應(yīng)，能準(zhǔn)確測定出標(biāo)準(zhǔn)上檢出限水平添加量時(shí)樣品中三氯蔗糖含量。其他研究者也提出了一些方法，但有的需要衍生，前處理不簡單，而且有的所選儀器不是通用儀器，很多檢測機(jī)構(gòu)沒有這種儀器。本法的缺點(diǎn)是，使用的質(zhì)譜儀器比標(biāo)準(zhǔn)上的儀器價(jià)格高很多，雖然很多縣一級檢測機(jī)構(gòu)都已購買，但一般的生產(chǎn)企業(yè)難以承受質(zhì)譜高昂的價(jià)格。

3 結(jié)語

國家對食品中三氯蔗糖的使用用量、測定等進(jìn)行了規(guī)范與控制，在食品安全監(jiān)督抽檢中，三氯蔗糖是各種含乳飲料產(chǎn)品的必檢項(xiàng)目。本文圍繞含乳試品中三氯蔗糖的快速測定展開探討，以國家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)與規(guī)定為基礎(chǔ)與參考，結(jié)合具體實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，提出含乳食品中三氯蔗糖的快速測定方法及流程，并具體分析了其應(yīng)用方法的優(yōu)劣。該方法也適用于其他種類食品中三氯蔗糖的快速測定，可極大地提高檢測效率和可靠性。

[1]姜維強(qiáng)三氯蔗糖在食品中的運(yùn)用[J].化工設(shè)計(jì)通訊,2017(3).

[2]張玉,吳慧明,徐麗紅,等.三氯蔗糖的安全性研究進(jìn)展[J].食品工業(yè)科技,2011(11).

[3]陳璐瑩,劉亞攀,冉雪琴,等.紫外衍生-高效液相色譜法測定保健食品和飲料中的三氯蔗糖[J].四川大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版,2014(5).

[4]國家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會,國家食品藥品監(jiān)督管理總局.GB 5009.28-2016食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測定[S].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2017.