成曉華， 杜國強(qiáng)， 師校欣

(河北農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院，河北保定 071001)

草莓(Fragaria×ananassaDuch.)為薔薇科草莓屬多年生草本植物，果實(shí)鮮紅美艷，酸甜適口，營養(yǎng)豐富，是世界第二大漿果類水果，具有適應(yīng)性強(qiáng)、栽培管理容易、結(jié)果早、見效快等優(yōu)點(diǎn)，在我國有大面積的栽培[1]。草莓傳統(tǒng)的繁殖方式多為匍匐莖分株繁殖，原種經(jīng)過多次繁育后病毒積累增加，果品產(chǎn)量、質(zhì)量下降，導(dǎo)致優(yōu)良品種退化，造成大量的經(jīng)濟(jì)損失[2]，而利用草莓莖尖脫毒結(jié)合組織培養(yǎng)快繁技術(shù)進(jìn)行無病毒苗木繁殖可有效解決這個(gè)問題[3-4]。

有關(guān)草莓組織培養(yǎng)的研究報(bào)道主要針對不同草莓品種快繁體系的建立及繼代苗的增殖等[5-9]，而將組培苗應(yīng)用于生產(chǎn)須經(jīng)過不定根誘導(dǎo)培養(yǎng)階段，質(zhì)量良好的根系是組培苗移栽成活的關(guān)鍵?，F(xiàn)有文獻(xiàn)中針對草莓組培苗生根的研究相對較少，且主要集中在基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、糖濃度及激素配比等對草莓不定根誘導(dǎo)的影響[10-11]，不同繼代苗齡和光照條件等對草莓組培苗生根的影響鮮見報(bào)道。本研究針對甜查理、紅顏草莓組培苗根系發(fā)育的影響因子，尤其是苗齡和光環(huán)境等進(jìn)行研究，以提高其根系質(zhì)量，為獲得大量優(yōu)質(zhì)草莓苗供應(yīng)生產(chǎn)奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

甜查理、紅顏草莓組培苗，來自于河北農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)室，其繼代培養(yǎng)基分別為MS+6-芐氨基腺嘌呤(6-BA)1.5 mg/L+吲哚丁酸(IBA)0.2 mg/L+白砂糖 30 g/L+瓊脂6 g/L、MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L+白砂糖30 g/L+瓊脂6 g/L。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 糖濃度對草莓組培苗生根及根系發(fā)育的影響 以1/2MS+0.2 mg/L IBA+6.0 g/L 瓊脂為基本培養(yǎng)基，分別添加15、20、25、30 g/L白砂糖，pH值為5.8～6.0。分別將苗齡為40 d的甜查理、50 d的紅顏草莓繼代苗接種到附加不同白砂糖濃度的生根培養(yǎng)基上，每處理6瓶，每瓶分別接種5株甜查理、紅顏組培苗，重復(fù)3次。

1.2.2 生長素配比對草莓組培苗生根及根系發(fā)育的影響 將苗齡40 d的甜查理、50 d的紅顏組培苗分別接種在1/2 MS+白砂糖25 g/L+瓊脂6.0 g/L、添加不同種類和濃度生長素的培養(yǎng)基上，共6個(gè)處理，pH值為5.8～6.0。每處理6瓶，每瓶分別接種5株甜查理、紅顏組培苗，重復(fù)3次。

1.2.3 繼代苗齡和光照度對草莓組培苗生根及根系發(fā)育的影響 選取繼代苗齡分別為30、40、50、60、70 d的紅顏草莓繼代苗接入1/2 MS+IBA 0.15 mg/L+白砂糖25 g/L+瓊脂6.0 g/L、pH值為5.8～6.0的培養(yǎng)基中，分別置于光照度為 2 000、5 000、8 000 lx的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。每處理6瓶，每瓶接種5株，重復(fù)3次。

1.2.4 不同光源對草莓組培苗生根及根系發(fā)育的影響 在1/2 MS+IBA 0.2 mg/L+白砂糖25 g/L+瓊脂6.0 g/L、pH值為5.8～6.0的生根培養(yǎng)基上接種繼代50 d的紅顏組培苗，分別在日光燈(光照度為2 000 lx)、LED白光燈(光照度為10 000 lx)、自然光(培養(yǎng)室陽面窗臺，光照度平均為 10 000 lx)這3種光源條件下進(jìn)行培養(yǎng)。每處理6瓶，每瓶5株，重復(fù)3次。

1.3 培養(yǎng)條件

培養(yǎng)室培養(yǎng)溫度為(25±3)℃，光照度為2 000 lx，光周期(晝/夜)為14 h/10 h。

1.4 調(diào)查與測定內(nèi)容

接種后30 d調(diào)查各處理的生根數(shù)及生根狀況。統(tǒng)計(jì)生根率和平均生根數(shù)，計(jì)算公式為生根率=(生根株數(shù)/接種株數(shù))×100%；平均生根數(shù)=生根總數(shù)/生根總株數(shù)。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel軟件進(jìn)行整理，采用DPS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 糖濃度對甜查理、紅顏草莓組培苗生根及根系發(fā)育的影響

由表1可見，在不同白砂糖濃度培養(yǎng)基上，甜查理草莓組培苗的生根率差異不顯著(P>0.05)，但生根數(shù)有明顯差別，糖濃度為30 g/L時(shí)生根數(shù)顯著減少(P<0.05)、側(cè)根也明顯減少，而糖濃度為15 g/L時(shí)有利于甜查理組培苗不定根側(cè)根的發(fā)育；在不同白砂糖濃度培養(yǎng)基上，紅顏草莓組培苗的生根率、生根數(shù)差異不顯著(P>0.05)。經(jīng)觀察發(fā)現(xiàn)，4個(gè)糖濃度處理中，甜查理、紅顏組培苗的生根時(shí)間不同，糖濃度為25、30 g/L時(shí)生根相對較早，且利于側(cè)根的發(fā)生。綜合考慮根系發(fā)育質(zhì)量及成本等因素，甜查理、紅顏的組培苗生根的適宜糖濃度分別為15、25 g/L。

表1 糖濃度對甜查理、紅顏組培苗生根及根系發(fā)育的影響

注：同列數(shù)據(jù)后不同小寫字母表示處理間差異顯著(P<0.05)；側(cè)根中標(biāo)注“-”“+”分別表示無側(cè)根、有側(cè)根產(chǎn)生，且“+”越多，表示產(chǎn)生的側(cè)根越多。下表同。

2.2 生長素配比對甜查理、紅顏草莓組培苗生根及根系發(fā)育的影響

由表2可見，在不同生長素配比的培養(yǎng)基上，甜查理和紅顏組培苗都較容易生根，同一品種各處理的生根率、生根數(shù)相互間顯著不差異(P>0.05)。綜合考慮側(cè)根發(fā)育情況和成本因素，甜查理、紅顏草莓組培苗生根選用的激素配比分別為0.1 mg/L IBA、0.15 mg/L IBA +0.5 mg/L IAA 。

表2 生長素配比對甜查理、紅顏草莓組培苗生根及根系發(fā)育的影響

2.3 繼代苗齡和光照度對草莓組培苗生根及根系發(fā)育的影響

由表3可見，在2 000～8 000 lx光照度下，30～70 d苗齡的紅顏組培苗均有較高的生根率，且同一光照度下各處理間差異不顯著(P>0.05)，而生根條數(shù)有一定差異；較弱的光照條件(2 000 lx)較適于30～40 d苗齡繼代苗的生根，并獲得較高的生根數(shù)，但側(cè)根發(fā)生很少，而苗齡增加到50～70 d時(shí)，紅顏組培苗的生根數(shù)明顯減少；5 000～8 000 lx的光照度有利于側(cè)根的產(chǎn)生及根系發(fā)育，50～60 d苗齡的紅顏組培苗在 5 000 lx 光照度下根系發(fā)育明顯改善，側(cè)根相對較多；60～70 d 苗齡紅顏組培苗在光照度8 000 lx下比光照度2 000～5 000 lx 產(chǎn)生更多的根系。

表3 繼代苗齡和光照度對紅顏草莓組培苗生根及根系發(fā)育的影響

2.4 不同光源對草莓組培苗生根及根系發(fā)育的影響

由表4可見，在3個(gè)光源條件下，紅顏組培苗的生根率、生根條數(shù)差異不顯著(P>0.05)；從側(cè)根多少及根系發(fā)育情況看，自然光下培養(yǎng)的組培苗生長健壯，側(cè)根發(fā)育多，而自然光最接近外界自然條件，更有利于移栽苗適應(yīng)外界的環(huán)境條件；從組培苗生長狀態(tài)看，自然光及LED燈下培養(yǎng)的組培苗有部分葉片變黃，這可能是由于在自然光或距組培苗較近的LED燈光下，培養(yǎng)容器內(nèi)的溫度會局部升高，從而導(dǎo)致這一現(xiàn)象發(fā)生。

表4 光源和光照度對紅顏組培苗生根及根系發(fā)育的影響

3 結(jié)論與討論

在不同的糖濃度、生長素配比、繼代苗齡、光照度及光源處理中，甜查理、紅顏草莓組培苗均能得到較高的生根率，說明這2個(gè)草莓品種的組培苗生根相對比較容易，這與郭靖等的研究結(jié)論[10]一致。但從組培實(shí)用化的角度來說，僅得到較高的生根率還不夠，還須綜合考慮根系的發(fā)育情況，如生根數(shù)、側(cè)根發(fā)生及地上部莖葉的生長狀況等，以利于移栽成活，并獲得生長健壯的優(yōu)質(zhì)草莓苗。本試驗(yàn)結(jié)果表明，隨糖濃度的升高，甜查理側(cè)根發(fā)生明顯減少。結(jié)合生根率、生根數(shù)及側(cè)根發(fā)生情況，較低的糖濃度(15 g/L)利于甜查理組培苗的生根，而25 g/L的糖濃度利于紅顏組培苗生根。

光環(huán)境是影響草莓組培苗生長和根系發(fā)育的重要因素。常規(guī)培養(yǎng)室2 000 lx的光照度條件下，草莓組培苗莖葉鮮綠，生根率高，但根系細(xì)弱、側(cè)根少；隨著光照度的增加，根系強(qiáng)壯，發(fā)根數(shù)增加，產(chǎn)生側(cè)根也增多。結(jié)合苗齡來看，苗齡為 30～40 d的幼嫩組培苗在弱光下容易生根，苗齡>50 d的組培苗適宜在較強(qiáng)光照下進(jìn)行生根。

試驗(yàn)結(jié)果表明，放于培養(yǎng)室陽面窗臺培養(yǎng)的紅顏草莓組培苗根系生長健壯，側(cè)根發(fā)育相對較多，且窗臺的環(huán)境最接近外界條件，利于組培苗出瓶移栽后對外界環(huán)境的適應(yīng)，同時(shí)光照度增加，組培苗的光合能力也增加[12]，更容易獲得生長健壯的移栽苗。因此，草莓組培苗生根階段可減少在培養(yǎng)室的誘導(dǎo)生根時(shí)間，盡早移至溫室加強(qiáng)光照鍛煉。但是，強(qiáng)光照下易使培養(yǎng)瓶內(nèi)局部溫度升高，造成部分組培苗葉片變黃、干枯，應(yīng)注意瓶內(nèi)溫度的控制。

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