朱凱林

（武漢名韓醫(yī)療美容門診部 湖北 武漢 430050）

本院從2015年1月-2017年2月，收治面部凹陷需要填充脂肪患者40例，采用人臍帶血干細胞混合自體脂肪顆粒修復患者顏面部凹陷畸形，以期為臍帶血干細胞應用于自體脂肪顆粒填充提供更多的理論依據(jù)，并對其進行隨訪。以評價該技術的長期臨床療效。

1.臨床資料

40例，均為女性，年齡25～42歲，平均年齡32歲；采用人臍帶血干細胞混合脂肪顆粒方法，美容性面部年輕化豐全面術22例、全面部皮下軟組織萎縮癥豐面治療5例、面部萎縮癥矯治13例；所有受術者在術前、術后均拍攝照片和隨訪；客觀測量驗證顆粒脂肪注射移植術后的壽命。

2.手術方法

2.1 hUCBSC混懸液制備

足月分娩健康產(chǎn)婦（乙型肝炎病毒標志、艾滋病、梅毒抗體等檢測陰性）臍帶血由湖北省干細胞庫提供，產(chǎn)婦及家屬均簽署知情同意書，實驗方案經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會批準。取新鮮臍帶血（6h內(nèi)用畢），用磷酸緩沖液（PBS）等倍稀釋后置于50ml離心管中，按1∶1比例加至人淋巴細胞分離液，4℃、2000r/min離心20min后臍帶血分5層，中間白膜層即為單個核細胞：用移液器小心吸取富含單個核細胞的懸液放人另一離心管內(nèi)，4℃、1000r/min離心15min，PBS洗滌3次；用低糖DMEM培養(yǎng)液懸浮，計數(shù)細胞濃度為5×105/m1,hUCBSC混懸液制備成功。

2.2 脂肪組織制備

顆粒脂肪組織準備常規(guī)吸脂后脂肪組織離心（1200g*10min）。離心后液體由上至下分為油脂層、脂肪層、沉淀層（含大量血細胞成分）。吸出油脂層，棄去。將脂肪層重新收集至50ml離心管，加人等量生理鹽水，混勻。離心（1200g，5min）。收集脂肪層中顆粒脂肪組織，備用。

2.3 干細胞一脂肪復合組織形成和移植

將臍帶血干細胞液和顆粒脂肪組織混合，混勻10min，使干細胞充分附著顆粒脂肪，形成干細胞一脂肪復合組織。移植部位以1%利多卡因浸潤麻醉，用微量可控注射器進行干細胞一脂肪復合組織局部注射，注射深度為皮下層，進行多點均勻注射。注射后局部適度加壓包扎。

2.4 臨床療效評價

通過術前和術后照相，對比變化。評價標準：明顯改善（原有癥狀消失或明顯減輕）、有效（原有癥狀部分消失，需重復治療）和無效（原有癥狀無變化）。皮膚檢測∶采用VISIA專業(yè)皮膚圖像分析系統(tǒng)（美國）檢測術前術后皮膚皺紋、斑點、毛孔、紋理的變化。在正面遮照條件下分析密度和大小，由系統(tǒng)自帶軟件轉化為定量數(shù)據(jù)。通過定量數(shù)據(jù)評價術前和術后變化?；颊咧饔^評價∶采用問卷調(diào)查方式進行，評價標準分為滿意（自覺改善明顯，效果持久）、有效（自覺有部分改善）、不滿意（自覺無明顯改善，或改善維持時間過短）。

3.結果

干細胞一脂肪復合組織移植后，通過12個月臨床隨訪，觀察癥狀均有不同程度的改善，其中，明顯改善者20例，有效者17例。皮膚在皺紋、斑點、毛孔、紋理4個方面定量分析數(shù)據(jù)均降低，顯示移植后皮膚特性發(fā)生改變。37例患者對治療效果滿意或自覺有效，3例面部老化患者自覺效果不明顯，總滿意率92.5%（圖1）。無患者出現(xiàn)感染、排斥和其他不良反應發(fā)生。

圖1 干細胞一脂肪復合組織修復右面部凹陷前后對比

4.討論

人臍帶血干細胞是臍帶以及胎盤近胎兒側血管內(nèi)的血液，包括間充質干細胞以及造血干細胞，其是一種具有多向分化潛能以及高度自我更新能力的干細胞。臍帶血干細胞取材方便，來源廣泛，增殖分化能力強，免疫原性弱，移植物抗宿主病發(fā)生率低，越來越多地被應用于臨床治療各種類型的疾病[4-6]。人臍帶血干細胞發(fā)揮作用的機制可能包括向功能細胞分化和分泌生長因子兩方面。

人臍帶血干細胞可以分泌多種生長因子，如表皮生長因子、成纖維細胞生長因子、血管內(nèi)皮生長因子，進而使膠原合成和血管生成增加，使皮膚質地發(fā)生變化[7]，且人臍帶血干細胞在真皮層的微環(huán)境中，可分化為成纖維細胞，而皮膚成纖維細胞在皮膚衰老過程中亦發(fā)揮關鍵作用。成纖維細胞是細胞外基質蛋白、糖蛋白、粘附分子和各種細胞因子的來源[8]，并直接影響角質形成細胞、脂肪細胞和肥大細胞。本研究探討人臍帶血干細胞在臨床中的應用，將體外培養(yǎng)的人臍帶血干細胞回注到患者皺紋部位的真皮淺層，如頸紋、魚尾紋、鼻唇溝、眉間紋等，結果顯示，皺紋均得到明顯改善?？梢?，人臍帶血干細胞可進行除皺治療，其在面部年輕化中的應用將受到更多的關注。

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