何矣然，游義彬

（江津西城醫(yī)院，重慶 402260）

臨床研究

鼻咽癌患者鼻咽分泌物EB病毒DNA的臨床應(yīng)用價(jià)值分析

何矣然，游義彬通訊作者

（江津西城醫(yī)院，重慶 402260）

目的探討鼻咽分泌物EB病毒DNA（EBV-DNA）檢驗(yàn)在鼻咽癌診斷中的應(yīng)用效果。方法將2016年3月3日-2017年9月3日在本院就診的50例鼻咽癌患者（觀察組）和50例慢性鼻咽炎患者（對(duì)照組）作為研究對(duì)象，都接受鼻咽分泌物EB病毒DNA（EBV-DNA）檢驗(yàn)，對(duì)比EBV-DNA陽(yáng)性率和平均值。結(jié)果觀察組EBV-DNA陽(yáng)性率（70.00%）、平均濃度［（4.95±1.16）×102copies/mL］都高于對(duì)照組（8.00%、0×102copies/mL），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論鼻咽分泌物EB病毒DNA的定性、定量檢測(cè)有利于鼻咽癌的診斷。

鼻咽分泌物；EB病毒；DNA；鼻咽癌

鼻咽癌（NPC）發(fā)病初期無(wú)典型癥狀[1]，導(dǎo)致大多數(shù)病人在確診時(shí)已出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的狀況，因此需要提倡鼻咽癌的早期篩查，有必要將其納入常規(guī)體檢項(xiàng)目當(dāng)中。EB病毒長(zhǎng)期潛伏在B淋巴細(xì)胞以及口咽部的上皮細(xì)胞內(nèi)[2]，在胞漿中的存在形式為環(huán)狀DNA，本文為了探討鼻咽分泌物EB病毒DNA（EBV-DNA）檢驗(yàn)在鼻咽癌診斷中的應(yīng)用效果，做了以下研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 從本院收治的鼻咽癌患者（病理確診）、慢性鼻咽炎患者（門診確診）當(dāng)中分別選出50例，依次納入觀察組、對(duì)照組，就診時(shí)間為2016年3月3日-2017年9月3日。

觀察組：男、女患者分別為29例、21例（共50例）；年齡：41歲-76歲，平均年齡（66.64±7.12）歲；病理分期：I期、II期、III期、IV期分別有6例、12例、15例、17例。

對(duì)照組：男、女患者分別為28例、22例（共50例）；年齡：40歲-74歲，平均年齡（66.21±7.05）歲。

對(duì)比兩組患者的各項(xiàng)資料數(shù)據(jù)均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。

1.3 觀察指標(biāo) 對(duì)比兩組EBV-DNA陽(yáng)性率以及平均濃度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料采用率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（Mean±SD）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 EBV-DNA定性檢驗(yàn)結(jié)果 觀察組的EBV-DNA陽(yáng)性率和對(duì)照組相比明顯更高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），詳細(xì)數(shù)據(jù)見表1。

2.2 EBV-DNA定量檢驗(yàn)結(jié)果 觀察組鼻咽癌患者鼻咽分泌物中EBV-DNA的平均濃度為（4.95±1.16）×102copies/mL，對(duì)照組為0×102copies/mL。組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=30.174,P＜0.001）。

3 討論

EB病毒基因在裂解期完全表達(dá)，會(huì)有衣殼抗原、細(xì)胞內(nèi)抗原合成，鼻咽癌患者機(jī)體中的抗EB病毒抗原的有關(guān)抗體水平較高[3]，其中EA/IgA抗體、VCA/IgA抗體的診斷價(jià)值高于其他抗體類型，大部分鼻咽癌病人血清VCA/IgA抗體都為陽(yáng)性，EB病毒在開始復(fù)制時(shí)就會(huì)產(chǎn)生

表1 對(duì)照組、觀察組EBV-DNA的定性檢驗(yàn)結(jié)果［n（%）］

1.2 方法 鼻咽分泌物EBV-DNA檢驗(yàn)方法：先應(yīng)用自制吸管遠(yuǎn)端、鼻咽纖維鏡附帶的吸引系統(tǒng)采集鼻咽分泌物，輕微吹打之后搖勻，將1.50 mL液體放在離心管中離心5 min，轉(zhuǎn)速為每分鐘12,000轉(zhuǎn)，收集沉淀物，在其中滴入DNA提取液，共50.00 μL，搖勻之后放在恒溫（100oC）中保存10 min，再以相同轉(zhuǎn)速離心5 min，將2 μL上清液提取出來用于擴(kuò)增模板制作的材料。在雙末端將熒光探針序列和引物序列進(jìn)行標(biāo)記，在PCR反應(yīng)管中加入提取液，共50.00 μL，制作質(zhì)控品、陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)以及陽(yáng)性、陰性對(duì)照，≥5×102copies/mL表示陽(yáng)性，反之為陰性。EA，因此EA/IgA抗體具有較高的特異性[4]，國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)已經(jīng)將EB病毒納入了I類致癌物質(zhì)當(dāng)中[5]，可見其危害性之大。

熒光定量PCR檢驗(yàn)技術(shù)（FQ-PCR）在臨床中的應(yīng)用價(jià)值較高，在傳統(tǒng)PCR檢測(cè)技術(shù)的基礎(chǔ)上，將熒光標(biāo)記探針加入其中，結(jié)合廣譜技術(shù)、分子雜交技術(shù)以及核酸擴(kuò)增技術(shù)，可對(duì)擴(kuò)增之前標(biāo)準(zhǔn)當(dāng)中核酸模板的數(shù)量加以檢測(cè)，得到定量檢測(cè)數(shù)據(jù)。血清、血漿、腫瘤組織、轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié)當(dāng)中都可提取到EBV-DNA標(biāo)本，但在腫瘤組織和轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié)當(dāng)中提取標(biāo)本的難度較大，且具有創(chuàng)傷性，而在血清或者是血漿中提取標(biāo)本相對(duì)容易。

本研究對(duì)鼻咽癌患者和慢性鼻咽炎患者都進(jìn)行鼻咽分泌物EBV-DNA檢測(cè)，得到定性檢測(cè)結(jié)果和定量檢測(cè)結(jié)果，結(jié)果顯示，觀察組EBV-DNA陽(yáng)性率（70.00%）、平均濃度［（4.95±1.16）×102copies/mL］都高于對(duì)照組（8.00%、0×102copies/mL），差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

可見，鼻咽癌患者鼻咽分泌物EB病毒DNA具有一定的檢驗(yàn)價(jià)值，可初步鑒別鼻咽炎與鼻咽癌，值得采用。

[1]葉倩, 李筱莉, 陳巖松, 等. 聯(lián)合檢測(cè)EB病毒不同抗體及EB病毒DNA在鼻咽癌血清學(xué)診斷中的價(jià)值[J]. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué),2016, 24(19): 3045-3048.

[2]岳楓, 周濤. EB VCA-IgA和EB-DNA檢測(cè)對(duì)兒童傳染性單核細(xì)胞增多癥和鼻咽癌診斷價(jià)值的比較[J]. 中國(guó)急救復(fù)蘇與災(zāi)害醫(yī)學(xué)雜志, 2012, 7(4): 351-353.

[3]羅耀凌, 陳浩, 彭頌國(guó), 等. 聯(lián)合檢測(cè)EB病毒不同抗體及EB病毒DNA在鼻咽癌血清學(xué)診斷中的價(jià)值[J]. 中華醫(yī)學(xué)雜志,2013, 93(44): 3516-3519.