梁艷君 譚喜梅 黃燕瓊 秦華珍#

1 浙江中醫(yī)藥大學附屬第三醫(yī)院 浙江 杭州 310005

2 廣西中醫(yī)藥大學 廣西 南寧 530001

3 廣西中醫(yī)藥大學附屬瑞康醫(yī)院 廣西 南寧 530011

紅豆蔻等3味山姜屬中藥的提取工藝研究*

梁艷君1譚喜梅2黃燕瓊3秦華珍2#

1 浙江中醫(yī)藥大學附屬第三醫(yī)院 浙江 杭州 310005

2 廣西中醫(yī)藥大學 廣西 南寧 530001

3 廣西中醫(yī)藥大學附屬瑞康醫(yī)院 廣西 南寧 530011

目的：研究紅豆蔻、草豆蔻、益智3味中藥的最佳提取工藝。方法：運用L9（34）正交試驗設計法優(yōu)選工藝，采用提取溶劑、溶劑倍量、提取時間、提取次數(shù)為因素的正交設計，以干膏率作為篩選指標。結果：最佳提取工藝為：采用60%乙醇，溶劑倍量為30倍，提取時間為4h，提取次數(shù)2次。結論：所得結果的提取方法簡單、效率高。

紅豆蔻 草豆蔻 益智 正交試驗 提取工藝

紅豆蔻、草豆蔻、益智均為姜科山姜屬（Alpinia L.）中藥，本實驗采用L9（34）正交試驗優(yōu)選提取條件，以藥材干膏率為考察指標，確定3味中藥的最佳提取工藝條件，從而較完全地提取出有效成分，為后期進行中藥親緣關系物質(zhì)基礎與藥性、效用相關研究奠定基礎。

表1 提取方法對藥材提取率的影響

1 材料

試驗用紅豆蔻、草豆蔻、益智藥材經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學中藥鑒定學教研室田慧教授鑒定均為姜科山姜屬（Alpinia L.）藥物。

2 方法與結果

2.1 單因素考察[1]：分別對提取方法[2]、乙醇體積分數(shù)、乙醇用量及提取時間進行單因素考察。每個試驗組[3]均稱取藥材粗粉10g，分別加入相應的溶劑，提取，過濾，得濾液。所得濾液均減壓回收溶劑，置于干燥的蒸發(fā)皿中水浴揮干溶劑，減壓干燥至恒重，稱重，計算干膏率，具體方法如下，結果見表1～5。由表1可知，紅豆蔻、草豆蔻和益智采用加熱回流提取方法提取率較高，所以選擇加熱回流提取法。由表2可知，3味山姜屬中藥采用甲醇提取率較高，但因甲醇毒性較大，所以選擇乙醇作為提取溶劑。由表3可知，采用60%乙醇回流提取所得干膏率最高，75%及80%乙醇回流提取所得干膏率也較高，但差別不大。由表4可知，隨著料液比的增加，藥材的提取率也隨之增加，但乙醇用量對提取得到的干膏率影響不大。由表5可知，采用加熱回流提取方法，隨著提取時間的延長藥材提取率相應增加，但提取時間到4h和5h時提取率增加不明顯。

表2 提取溶劑對藥材提取率的影響

表3 乙醇濃度對藥材提取率的影響

表4 乙醇用量對藥材提取率的影響

表5 提取時間對藥材提取率的影響

2.2 正交試驗設計與結果：根據(jù)單因素試驗結果，采用L9（34）正交設計[4]對乙醇濃度（%）、提取時間（h）、乙醇用量（倍）、空白對照進行正交試驗[5]，每個因素設3個水平[6]，詳見表6。

表6 正交試驗因素水平安排表

繼以干膏率為考察指標，進行提取工藝優(yōu)選，試驗結果見表7～12。由表7可知，影響紅豆蔻藥材干膏提取率的因素大小順序是A＞B＞C，最佳因素排列為A2B2C3，即加入30倍量的60%乙醇回流提取2次，每次4小時，提取得到的干膏量最多。

由表8可知，影響草豆蔻藥材干膏提取率的因素大小順序是A＞B＞C，最佳因素排列為A2B2C3，即加入30倍量的60%乙醇回流提取2次，每次4小時，提取得到的干膏量最多。

由表9可知，影響益智藥材干膏提取率的因素大小順序是A＞B＞C，最佳因素排列為A2B3C3，即加入30倍量的60%乙醇回流提取2次，每次5小時，提取得到的干膏量最多。

表7 紅豆蔻正交試驗表與結果

表8 草豆蔻正交試驗表與結果

表9 益智正交試驗表與結果

表10 紅豆蔻方差分析結果

表11 草豆蔻方差分析結果

表12 益智方差分析結果

另由表10～12的方差分析結果可知，乙醇濃度、提取時間和乙醇用量對3味藥材的干膏提取率影響均有顯著性差異。

根據(jù)上述實驗結果發(fā)現(xiàn)，影響紅豆蔻、草豆蔻和益智3味山姜屬中藥干膏提取率的因素存在一定的差異性，為了能夠更好地比較其化學成分的差異，應選擇一致的提取工藝條件。綜合考慮這3味中藥的化學成分性質(zhì)和上述實驗結果，可以得出結論，采用60%乙醇提取得到的浸膏量最多，所以確定這3味中藥提取工藝為：采用60%乙醇，溶劑倍量為30倍，提取時間為4h，提取次數(shù)2次。

2.3 最佳工藝驗證：按照已優(yōu)選的最佳提取工藝對3批樣品進行提取、制備、按前述方法對干膏率進行測定，結果見表13。

表13 工藝驗證結果

3 討論

由于山姜屬中藥化學成分復雜多樣，而浸膏得率在一定程度上可反映出中藥材中多種有效成分的提取率。本研究選擇浸膏得率作為考察指標，采用單因素考察和正交設計方法優(yōu)選出的紅豆蔻、草豆蔻和益智3味山姜屬中藥的提取工藝為采用60%乙醇，溶劑倍量為30倍，提取時間為4h，提取次數(shù)2次。該方法穩(wěn)定、可行，重復性好，為中藥提取、化學成分分析及其藥理作用研究奠定了基礎。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典·一部[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：VID33-34.

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[4]袁濤，楊偉俊，薛文采，等.正交試驗設計優(yōu)化復方刺山柑膠囊水提取工藝[J].環(huán)球中醫(yī)藥，2013，6（6）：416-420.

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2017-05-16