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        柚皮苷對(duì)AB果蠅模型阿爾茨海默病的壽命影響

        2017-12-28 16:00:27李靈芝應(yīng)曜宇
        現(xiàn)代養(yǎng)生·下半月 2017年7期
        關(guān)鍵詞:柚皮苷阿爾茨海默病壽命

        李靈芝 應(yīng)曜宇

        [摘要]目的:從行為學(xué)角度,觀察柚皮苷對(duì)轉(zhuǎn)基因果蠅阿爾茨海默?。ˋD)模型的影響。方法:采用Ga14/USA系統(tǒng)建立AB果蠅模型;連續(xù)給藥后進(jìn)行行為學(xué)實(shí)驗(yàn),觀察柚皮苷對(duì)AD果蠅壽命的影響。對(duì)照組和模型組培養(yǎng)基中加入等容積培養(yǎng)菌(酵母菌)后,給藥組分別給予20mm01/L和50mmol/L柚皮苷,抑制劑組分別給予20mmol/L柚皮苷、20mmol/L L-NAME和50mmol/L柚皮苷、40mmol/L L-NAME。通過爬行實(shí)驗(yàn)觀察柚皮苷對(duì)阿爾茨海默癥果蠅壽命的影響。結(jié)果:與對(duì)照組比較,模型組果蠅壽命明顯減少;與模型組相比,柚皮苷治療組能明顯增加果蠅壽命;與治療組相比,抑制劑組能顯著減少果蠅壽命。結(jié)論:柚皮苷對(duì)AD果蠅模型壽命具有保護(hù)作用,其作用機(jī)制可能與其激活eNOS表達(dá)有關(guān)。

        [關(guān)鍵詞]柚皮苷;阿爾茨海默病;eNOS;壽命

        阿爾茲海默癥(Alzheimer's disease,AD)一種表現(xiàn)為認(rèn)知水平的進(jìn)行性障礙、記憶力的損害、精神行為的異常表現(xiàn)以及情感的障礙為特征的神經(jīng)退行性疾病,大腦皮質(zhì)彌漫性萎縮、神經(jīng)元的空泡缺失是AD的顯著病理特征,AD的主要致病因素是p一淀粉樣蛋白(Ap)在腦神經(jīng)元間過量沉積,不同途徑直接或間接誘導(dǎo)產(chǎn)生了相關(guān)癥狀。

        大量的實(shí)驗(yàn)研究表明,黃烷酮類化合物對(duì)AD的治療有效。目前己有報(bào)道表明中藥單體柚皮苷,具有獨(dú)特的改善線粒體的功能障礙和較強(qiáng)的抗生物氧化的特性。

        從行為學(xué)角度,研究黃烷酮類藥物柚皮苷對(duì)AD果蠅壽命的改善作用,并在AD中對(duì)柚皮苷抗氧化作用進(jìn)行機(jī)制初探,為治療AD提供更多藥物靶點(diǎn)。

        1材料

        1.1動(dòng)物

        轉(zhuǎn)基因果蠅品系w1118,USA-AB42。

        1.2藥物

        柚皮苷,L-NAME(sigma公司)。

        2方法

        2.1AD

        正常對(duì)照組使用果蠅品系w1118。致病性果蠅USA-AB42分別作為AD組、給藥組及抑制劑組使用。

        2.2培養(yǎng)基制作

        普通玉米培養(yǎng)基,加熱攪拌均勻后加0.5ml丙酸倒入高壓蒸汽滅菌后的培養(yǎng)瓶中,每瓶加入0.7g酵母粉。

        2.3實(shí)驗(yàn)分組

        本實(shí)驗(yàn)共設(shè)6組,包括實(shí)驗(yàn)對(duì)照組、轉(zhuǎn)基因的AD果蠅模型組、AD+柚皮苷(20mmol/L)、AD+柚皮苷(50mmol/L)、AD+柚皮苷(20mmol/L)+抑制劑L-NAME(20mmol/L)、AD+柚皮苷(50mmol/L)+抑制劑L-NAME(40mmol/L)。

        3結(jié)果

        (1)與正常對(duì)照組比較,模型組平均壽命均顯著降低(P<0.001),藥物干預(yù)組果蠅平均壽命也降低(P<0.001),抑制劑組果蠅平均壽命也降低(P<0.001)。

        (2)與AD果蠅模型組比較,低濃度的柚皮苷組果蠅的壽命提高(P<0.05),高濃度的柚皮苷組果蠅壽命明顯提高(P<0.001)。結(jié)果提示柚皮苷對(duì)AD果蠅的壽命具有一定的保護(hù)作用,且高濃度藥物實(shí)驗(yàn)證明保護(hù)效果越明顯。

        (3)與低濃度柚皮苷組相比,低濃度藥物抑制劑L-NAME組果蠅壽命降低(P<0.05)。

        (4)與高濃度柚皮苷組相比,高濃度藥物抑制劑L-NAME組果蠅壽命明顯地降低(P<0.001)。結(jié)果提示柚皮苷對(duì)AD果蠅壽命的保護(hù)作用可能是通過激活eNOS蛋白來實(shí)現(xiàn)的,如表1所示。

        4討論

        果蠅最早是作為遺傳學(xué)研究的工具之一,研究操作的難度要求不高。本研究中,壽命計(jì)數(shù)被采用來檢測(cè)果蠅壽命,在果蠅行為學(xué)研究中,該行為范式基礎(chǔ)且應(yīng)用廣泛。

        本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示,柚皮苷對(duì)AD果蠅壽命的保護(hù)作用可能是通過激活eNOS蛋白來實(shí)現(xiàn)的。在此之前一部分藥物在有很多相關(guān)報(bào)道被證實(shí)了對(duì)AD模型果蠅具有治療作用,但是柚皮苷相關(guān)AD治療作用以及該藥通過eNOS表達(dá)來發(fā)揮作用的相關(guān)報(bào)道未見。更進(jìn)一步的形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)研究還需要進(jìn)行以藥物及機(jī)制驗(yàn)證,以對(duì)其藥理作用進(jìn)行說明和分析,以為臨床阿爾茨海默病的治療提供更多的藥物選擇靶點(diǎn)。

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