王起來，馬寅芙，付建華，林秀英，劉 磊，蘆小單，方艷秋，譚 巖

(吉林省人民醫(yī)院 醫(yī)學診治實驗中心，吉林 長春130021)

血清和卵泡液抗苗勒管激素在IVF-ET中的檢測價值

王起來，馬寅芙，付建華，林秀英，劉 磊，蘆小單，方艷秋*，譚 巖

(吉林省人民醫(yī)院 醫(yī)學診治實驗中心，吉林 長春130021)

目的探討非多囊卵巢綜合征(PCOS)不孕患者在體外受精-胚胎移植(IVF-ET)中血清和卵泡液抗苗勒管激素(AMH)與臨床結(jié)果的預測價值。方法選取進行IVF-ET患者(非PCOS原因不孕)共103例，根據(jù)獲卵數(shù)分為低獲卵組、正常組、高獲卵組。檢測自然月經(jīng)周期第3天、取卵日和移植日血清AMH值以及卵泡液AMH值。依據(jù)統(tǒng)計學方法分析獲卵數(shù)及臨床妊娠與AMH水平的關系。結(jié)果低獲卵組、正常組、高獲卵組三組間竇卵泡數(shù)、總胚胎數(shù)在各組間比較均具有統(tǒng)計學差異(P<0.05)；三組自然月經(jīng)周期第3天、取卵日和移植日血清AMH值以及卵泡液AMH水平存在差異，均為低獲卵組<正常組<高獲卵組，組間成對比較差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；卵泡液AMH水平妊娠組高于非妊娠組，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結(jié)論血清和卵泡液AMH水平可作為預測獲卵數(shù)的指標，而卵泡液AMH水平高低與臨床妊娠具有相關性，可作為預測妊娠結(jié)局的指標。

IVF-ET；AMH；卵泡液

(ChinJLabDiagn,2017,21:2062)

生存環(huán)境惡化，生活、工作壓力增加，生育年齡的推遲等因素導致現(xiàn)代社會育齡夫婦中不孕不育患者比率大幅增高。輔助生殖技術是解決這類患者生育問題唯一途徑。體外受精-胚胎移植(IVF-ET)是ART中最常用的手段，依據(jù)患者卵巢儲備功能而定的促排卵(COS)方案又是IVF-ET中最關鍵的一環(huán)。因此，患者卵巢儲備功能評估就顯得尤為重要。已有較多研究證實基礎血清AMH是卵巢儲備評估的可靠指標[1]。然而AMH與IVF-ET臨床妊娠的關系尚不明確，而卵泡液內(nèi)AMH在卵泡發(fā)育過程并促進優(yōu)勢卵泡成熟中發(fā)揮重要作用[2]，那么卵泡液AMH能否與IVF-ET中獲卵及卵母細胞質(zhì)量存在關系進而影響妊娠結(jié)局有待我們進一步研究。

1 資料與方法

1.1 研究對象

選取2014年3月至2015年3月在吉林省人民醫(yī)院生殖醫(yī)學中心接受IVF-ET助孕治療的不孕癥患者(非PCOS原因不孕或單純男方因素)103例進行研究。依據(jù)獲卵數(shù)分為低獲卵組(獲卵數(shù)<5枚)、正常組(5枚≤獲卵數(shù)≤15枚之間)、高獲卵組(獲卵數(shù)>15枚)。

1.2 控制性超排卵方案及IVF-ET

依據(jù)不孕癥患者基本情況(年齡、體重指數(shù)、基礎內(nèi)分泌等)，分別采用長方案、短方案進行超促排卵。取卵后，依據(jù)顯微鏡觀察卵丘-卵母細胞復合體評估卵母細胞成熟情況。依據(jù)胚胎形態(tài)參數(shù)，移植Ⅰ-Ⅱ級胚胎2枚。移植后14天檢測hCG(>5MIU/ml)為生化妊娠，移植后35天陰道B超可見孕囊為臨床妊娠。

1.3 血清AMH測定

自然月經(jīng)周期第3天、取卵日和移植日采空腹靜脈血留樣。自然月經(jīng)周期第3天AMH值為基礎AMH值。AMH采用酶聯(lián)免疫法檢測(深圳亞輝龍生物科技有限公司)，操作依照說明書進行。

1.4 卵泡液AMH測定

取卵日，經(jīng)陰道B超引導穿刺取卵，收集卵泡液，2 500 g離心2 min，去沉淀，上清為所需卵泡液，測定AMH方法同1.3。

1.5 統(tǒng)計學分析

2 結(jié)果

2.1 低獲卵組、正常組、高獲卵組一般情況及獲卵數(shù)、胚胎數(shù)比較

低獲卵組、正常組、高獲卵組3組間年齡和體質(zhì)量指數(shù)(BMI)比較不具有統(tǒng)計學差異(P>0.05)；但是竇卵泡數(shù)、獲卵數(shù)、總胚胎數(shù)在各組間比較均具有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。見表1。

表1 低獲卵組、正常組、高獲卵組一般情況及獲卵數(shù)、胚胎數(shù)比較

注：*表示與低獲卵組比較P<0.05；#表示與正常組比較P<0.05。

2.2 低獲卵組、正常組、高獲卵組血清及卵泡液AMH水平的比較

IVF-ET中低獲卵組、正常組、高獲卵組的基礎血清、取卵日血清、移植日血清AMH水平和卵泡液AMH水平存在差異，均為低獲卵組<正常組<高獲卵組，并且通過組間成對比較差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 不同獲卵數(shù)組間血清及卵泡液AMH水平的比較

注：*表示與低獲卵組比較P<0.05；#表示與正常組比較P<0.05。

2.3 IVF患者臨床妊娠結(jié)局與AMH水平比較

根據(jù)是否臨床妊娠，將103例患者分為妊娠組(56例)與非妊娠組(47例)。兩組間基礎血清、取卵日血清、移植日血清AMH水平比較差異均不具有統(tǒng)計學意義(P>0.05)；但卵泡液AMH水平妊娠組高于非妊娠組，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 臨床妊娠與各組AMH水平的關系

注：*表示P<0.05

3 討論

抗苗勒管激素(AMH)是由竇前及小竇卵泡的顆粒細胞分泌的，隨著卵泡的成熟其表達水平也顯著下降[2]。血清中AMH水平在女性青春期后開始升高，很快達到峰值并在整個女性生育周期中持續(xù)存在，其作用為調(diào)控始基卵泡的募集，保持卵泡有序發(fā)育，促進卵泡優(yōu)勢選擇，維持每月卵泡的成熟[3,4]。血清AMH水平取決于卵巢竇卵泡數(shù)量，可以用于評估卵巢儲備功能并準確預測卵巢反應性[5]。在本研究結(jié)果顯示控制性超排卵周期中，患者獲卵數(shù)存在明顯的不同，依據(jù)獲卵數(shù)進行分組，比較發(fā)現(xiàn)自然月經(jīng)周期第3日、取卵日、移植日血清AMH水平和卵泡液AMH水平在不同反應組均存在統(tǒng)計學差異。而且各組的血清AMH水平月經(jīng)第3日>取卵日，反應出控制性超排卵周期中卵泡在Gn刺激下發(fā)育，血清AMH值隨著竇卵泡數(shù)的減少而降低，外源性Gn藥物超促排卵(COH)的刺激周期下卵泡發(fā)育過程中，血清AMH的下降反映了竇卵泡逐漸減少并最后形成成熟卵泡的過程[6]，這也同時證實了AMH主要表達于早期卵泡[7]，所以可反映卵泡的動態(tài)發(fā)育過程。提示血清AMH水平能較好地預測卵巢對COH的反應，血清AMH水平與可獲得卵母細胞數(shù)的相關性最高。

IVF-ET臨床妊娠結(jié)局有多方面因素決定，包括獲卵率、卵母細胞成熟率、受精率、胚胎質(zhì)量等[8，9]。血清AMH并不能反應所有相關指標，因此血清AMH水平預測臨床妊娠結(jié)局存在爭議。卵泡液是卵母細胞發(fā)育的微環(huán)境，其中存在眾多活性因子構成精密復雜的調(diào)控始基卵泡啟動的信息網(wǎng)絡。這些活性因子分為促卵泡生長因子和抑制因子兩類，其中AMH屬于重要的抑制性細胞因子。Fanchin研究[10，11]顯示取卵日獲得的中小卵泡(8-12 mm)卵泡液中AMH的水平比大卵泡(16-20 mm)高兩倍，提示AMH水平隨著卵泡的成熟而持續(xù)下降；但在COH周期中，取卵日卵泡液AMH水平和胚胎種植率以及臨床妊娠率呈正相關，而基礎或取卵日血清AMH水平卻和它無相關性[12]。在本研究結(jié)果顯示臨床妊娠組卵泡液AMH水平顯著高于非妊娠組，提示高卵泡液AMH可能與卵泡成熟相關，能提高臨床妊娠率。

綜上所述，血清和卵泡液AMH水平可作為預測獲卵數(shù)的指標，而卵泡液AMH水平高低與臨床妊娠具有相關性。

[1]胡蓉,張曉梅,吳 昕，等.抗苗勒氏管激素(AMH)預測卵巢儲備功能及反應性的研究[J].生殖與避孕,2009,29(8):515，557.

[2]王冬雪,吳小華.超促排卵過程中抗苗勒管激素動態(tài)變化及其與臨床結(jié)局的相關性[J].中華生殖與避孕雜志,2017,37(2):111.

[3]何藝磊,李 蓉,喬 杰.抗苗勒氏管激素與卵巢儲備及反應性相關研究進展[J].生殖與避孕,2016,36(8):653.

[4]邵靜宜,馬艷萍,李云秀.抗苗勒氏管激素與生殖[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志,2012,20(5):13.

[5]胡琳莉,孫瑩璞.卵巢儲備功能與卵巢反應性評估[J].中國實用婦科與產(chǎn)科雜志,2015,31(1):18.

[6]陳 雅,葉碧綠,鄭九嘉，等.血清及卵泡液抗苗勒管激素在多囊卵巢綜合征患者體外受精促排卵治療中的價值[J].中國臨床藥理學與治療學,2015,20(12):1405.

[7]陳 曉,季銀芬,徐 鍵.抗苗勒氏管激素(AMH)與多囊卵巢綜合征(PCOS)卵泡發(fā)育異常的關系[J].生殖與避孕,2014,34(5):383，400.

[8]廖嬌蕾,張 瓊,李艷萍.子宮內(nèi)膜厚度差預測IVF-ET妊娠結(jié)局的臨床觀察[J].生殖與避孕,2015,35(10):680.

[9]陳 藝,劉海鵬,李蘇萍，等.抗苗勒氏管激素水平對IVF-ET妊娠結(jié)局的預測價值評估[J].生殖醫(yī)學雜志,2016,25(6):522.

[10]Fanchin R,Louafi N,Mendez Lozano DH,et al.Per-follicle measurements indicate that anti-mtillerian hormone secretion is modulated by the extent of follicular development and luteinization and may reflect qualitatively the ovarian follicular status[J].Fertil Steril,2005,84(1):167．

[11]Fanchin R,Yaieb J,Lozano DH,et al.High reproducibility of serum anti-mtillerian hormone measurements suggest a multistaged follicular secretion and strengthens its role in the assessment of ovarian follicular status[J].Hum Reprod,2005,20(4):923．

[12]Wunder D,Bersinger N,Yared M,et al.Statistically significant changes of antimiillerian hormone and inhibin levels during the physiologicm enstrual cycle in reproductive age women[J]．Fertil Steri,2008,89(4):927.

Detectionvalueofanti-MullerianhormoneinserumandfollicularfluidinIVF-ET

WANGQi-lai，MAYin-fu,FUJian-hua,etal.

(CenterforMedicalTreatmentandDiagnosis,JilinProvincePeople’sHospital,Changchun130021,China)

ObjectiveTo investigate the predictive value of serum and follicular anti-Mullerian hormone (AMH) in patients with non-PCOS (infertility polycystic ovary syndrome) in vitro fertilization and embryo transfer (IVF-ET) and its clinical value.MethodsSelected for IVF-ET patients (non-PCOS causes infertility) a total of 103 cases,according to the number of oocytes were divided into low-ovulation group,normal group,high-egg group.On the 3rd day of natural menstrual cycle,serum AMH value of ovulation day and transplantation day and AMH value of follicular fluid were detected.According to statistical methods to analyze the relationship between the number of oocytes and clinical pregnancy and AMH levels.ResultsThe number of follicles and the total number of embryos in three groups of low ovum group,normal group and high ovulation group were statistically different (P<0.05).On the third day of natural menstrual cycle,the ovulation day AMH levels in follicular fluid and AMH levels in follicular fluid were all lower than those in control group (allP<0.05) Group than non-pregnancy group,the difference was statistically significant (P<0.05).ConclusionSerum and follicular fluid AMH levels can be used as an index to predict the number of oocytes,while the level of follicular fluid AMH levels associated with clinical pregnancy,pregnancy prediction can be used as an index.

IVF-ET；AMH；Follicular fluid

本文受吉林省衛(wèi)生技術創(chuàng)新項目(2017J022、2016J015、2016ZC016)和吉林省科技廳項目(20150622024JC，20150414023GH，20160622008JC、20160414021GH)資助

*通訊作者

1007-4287(2017)12-2062-03

R446

A

王起來(1982-)，男，主管檢驗師，碩士，主要從事生殖醫(yī)學臨床檢驗及科研工作;方艷秋(1968-)，女，教授，博士，主要從事生殖醫(yī)學相關研究。

2017-01-25)