賴 飛 張 晶 賴 冬

(廈門市第二醫(yī)院輸血科，福建 廈門 361021)

老年肺癌患者淋巴細胞亞群、白細胞介素-6、腫瘤壞死因子-α在外周血中的表達及意義

賴 飛 張 晶1賴 冬

(廈門市第二醫(yī)院輸血科，福建 廈門 361021)

目的探討老年肺癌患者淋巴細胞亞群、白細胞介素(IL)-6、腫瘤壞死因子(TNF)-α在外周血中的表達及意義。方法流式細胞儀檢測老年肺癌患者抗凝全血中淋巴細胞亞群的表達；通過酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測血清IL-6、TNF-α的水平，并分別與正常老年人結果進行對比。結果小細胞肺癌組與非小細胞肺癌組CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+和自然殺傷(NK)細胞表達水平均明顯低于正常組(P<0.05)；CD3+CD8+、CD3-CD19+略高于正常組，但無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。與正常組比較，小細胞肺癌組與非小細胞肺癌組血清IL-6、TNF-α水平均明顯高于正常組(P<0.05)。Ⅲ～Ⅳ期組CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+、CD3-CD19+和NK細胞數(shù)均低于Ⅰ～Ⅱ期組，且CD3+CD8+細胞數(shù)高于Ⅰ～Ⅱ期組，但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，Ⅲ～Ⅳ期組血清IL-6、TNF-α水平明顯高于Ⅰ～Ⅱ期組(P<0.05)。結論老年肺癌患者存在免疫功能及細胞因子網(wǎng)絡紊亂，共同參與了肺癌的發(fā)病機制。

小細胞肺癌；非小細胞肺癌；淋巴細胞亞群；白細胞介素-6；腫瘤壞死因子-α

肺癌的發(fā)生、發(fā)展與轉(zhuǎn)歸是多因素、多階段的，與機體免疫系統(tǒng)間的相互作用十分復雜，它包括多種細胞及細胞因子間的相互作用與調(diào)節(jié)〔1〕。外周血中淋巴細胞亞群表達是反映細胞免疫功能的重要指標，細胞因子白細胞介素(IL)-6、腫瘤壞死因子(TNF)-α等在炎性反應及免疫調(diào)節(jié)方面均起到重要作用。研究顯示，淋巴細胞亞群、IL-6、TNF-α等異常表達與惡性腫瘤的發(fā)病有關〔2，3〕。本研究分析老年肺癌患者淋巴細胞亞群、IL-6、TNF-α的表達及意義。

1 對象與方法

1.1研究對象 收集廈門市第二醫(yī)院2014年1月至2015年1月老年肺癌患者66例為研究組，均經(jīng)纖維支氣管鏡或腫塊穿刺病理學檢查明確診斷為肺癌，其中非小細胞肺癌38例，小細胞肺癌28例；Ⅰ期 8例、Ⅱ期13例、Ⅲ期26例和Ⅳ期19例；年齡60～74〔平均(67.35±4.31)〕歲,平均體重(52.42±11.38)kg，抽血化驗前均未接受放化療、分子靶向治療。選擇年齡、性別匹配的健康體檢者30例作為正常組，男17例，女13例，年齡60～78〔平均(68.15±5.39)〕歲，平均體重(55.42±13.68)kg。

1.2檢測方法 空腹抽取肺癌患者靜脈血兩管，一管為無抗凝劑全血4 ml，經(jīng)離心處理后吸取血清，于-80℃冰箱冷凍保存，采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測IL-6、TNF-α含量;另一管為EDTA2抗凝全血2 ml，2 h內(nèi)用于淋巴細胞亞群分析(流式細胞術，美國Beckman公司)。正常組集中采血，同樣進行IL-6、TNF-α檢測和淋巴細胞亞群分析。

1.3統(tǒng)計學方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行獨立樣本t檢驗和單因素方差分析。

2 結 果

2.1各組外周血淋巴細胞亞群比較 與正常組比較，小細胞肺癌組與非小細胞肺癌組淋巴細胞亞群中CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+和自然殺傷(NK)細胞計數(shù)均明顯低于正常組(P<0.05)；CD3+CD8+、CD3-CD19+略高于正常組，但無統(tǒng)計學差異(P>0.05)，見表1。

表1 各組外周血淋巴細胞亞群比較

與正常組比較：1)P<0.05，下表同

2.2各組血清IL-6、TNF-α水平比較 與正常組比較，小細胞肺癌組與非小細胞肺癌組血清IL-6、TNF-α水平均明顯高于正常組(P<0.05)。見表2。

2.3不同臨床分期肺癌患者淋巴細胞亞群比較 Ⅲ～Ⅳ期組CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+、CD3-CD19+和NK細胞均低于Ⅰ～Ⅱ期組，而CD3+CD8+計數(shù)略高于Ⅰ～Ⅱ期組，但兩組比較均無統(tǒng)計學差異(P>0.05)，見表3。

表3 不同臨床分期肺癌患者淋巴細胞亞群比較

2.4不同臨床分期肺癌患者血清IL-6、TNF-α水平比較 Ⅲ～Ⅳ期肺癌患者血清IL-6〔(125.5±8.43)ng/L〕、TNF-α〔(121.13±13.45)ng/L〕水平均明顯高于Ⅰ～Ⅱ期患者〔(109.3±9.33)ng/L,(101.27±11.6)ng/L,P<0.05〕。

3 討 論

隨著對免疫機制的深入研究，研究者們發(fā)現(xiàn)機體的免疫功能與肺癌的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)歸密切相關〔4～6〕。目前淋巴細胞亞群及NK細胞越來越多被用于監(jiān)測腫瘤的發(fā)展及判斷療效和預后〔7〕。既往有研究發(fā)現(xiàn)，老年肺癌患者的免疫功能異常紊亂，與對照者相比CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+明顯下降，而CD8+變化不明顯，本實驗結果與其相近〔8，9〕。肺癌患者的細胞免疫功能明顯被抑制，這可能與腫瘤在整個發(fā)生、發(fā)展、增殖等各個階段都能產(chǎn)生抑制機體免疫功能的細胞因子，改變了腫瘤患者機體的正常免疫功能狀態(tài)，使其抗腫瘤免疫功能急劇下降，同時增加了患者體內(nèi)腫瘤的躲避免疫逃逸及免疫監(jiān)視功能〔10〕。外周血淋巴細胞亞群的分布情況改變在腫瘤復發(fā)以及預后監(jiān)測中同樣具有重要價值。NK細胞在抑制惡性腫瘤擴散及抗腫瘤免疫方面都起著重要的作用，它通過直接分泌細胞毒因子對侵犯、轉(zhuǎn)移的腫瘤細胞產(chǎn)生強大的殺傷作用，從而阻止腫瘤的擴散〔11〕。因此NK細胞數(shù)量減少導致機體的免疫功能下降，往往是腫瘤發(fā)展和發(fā)生遠處轉(zhuǎn)移的重要原因〔12〕。本研究提示肺癌患者NK細胞減少與腫瘤細胞擴增密切相關，但與肺癌的進展關系有待進一步研究。

多種細胞因子與腫瘤的發(fā)生發(fā)展、預后、轉(zhuǎn)歸有著密切聯(lián)系〔13〕。細胞因子在免疫防御反應中起到調(diào)節(jié)中心作用，有的還直接影響腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移。IL-6與多種腫瘤發(fā)生、發(fā)展密切相關，它能促進腫瘤血管的生成，利于癌細胞的生長和轉(zhuǎn)移〔14〕，研究表明大多數(shù)炎癥性疾病IL-6含量增高〔15，16〕。本研究顯示，肺癌組血清IL-6水平顯著高于正常人，可能與肺癌患者癌組織浸潤刺激IL-6的分泌與釋放有關。TNF-α主要是一種由巨噬細胞和單核細胞產(chǎn)生的促炎癥細胞因子，一方面具有抗腫瘤、抗感染等作用，對機體有利。另一方面在病理情況下參與機體的炎癥、發(fā)熱和休克等反應〔17〕。在發(fā)病過程TNF-α的釋放可以直接引起細胞損傷，也能通過刺激其他促炎癥介質(zhì)如IL-1、白三烯的釋放擴大炎癥級聯(lián)反應。本研究顯示化療前肺癌患者血清TNF-α水平顯著增高，提示過量的TNF-α水平導致組織嚴重損傷，同時局部肺組織缺氧亦刺激肺泡巨噬細胞分泌TNF-α。綜上所述，老年肺癌患者存在免疫功能及細胞因子網(wǎng)絡紊亂，導致機體免疫功能降低，淋巴細胞亞群與細胞因子IL-6、TNF-α共同參與了肺癌的發(fā)病機制，并與肺癌的發(fā)生、發(fā)展和預后密切相關。

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R734.2

A

1005-9202(2017)23-5856-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.23.049

1 廈門市第二醫(yī)院驗檢科

賴 冬(1975-)，男，主任技師，主要從事免疫學研究。

賴 飛(1974-)，女，碩士，主管技師，主要從事免疫學研究。

〔2016-07-19修回〕

(編輯 苑云杰/曹夢園)