孫景賢，劉敏博，李家祥，楊夢(mèng)羽，胡婉彬，常亞青，黃顯雅，段立柱，湛垚垚

( 大連海洋大學(xué) 水產(chǎn)與生命學(xué)院，農(nóng)業(yè)部北方海水增養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，遼寧 大連116023 )

兩種海水酸化模式對(duì)中間球海膽早期發(fā)育及存活的影響

孫景賢，劉敏博，李家祥，楊夢(mèng)羽，胡婉彬，常亞青，黃顯雅，段立柱，湛垚垚

( 大連海洋大學(xué) 水產(chǎn)與生命學(xué)院，農(nóng)業(yè)部北方海水增養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，遼寧 大連116023 )

采用二氧化碳法和強(qiáng)酸法模擬海水酸化效應(yīng)，研究?jī)煞N海水酸化模式對(duì)中間球海膽早期發(fā)育及存活的影響。試驗(yàn)結(jié)果顯示，兩種海水酸化模式均能降低中間球海膽胚胎的上浮率和四腕浮游幼體的存活率；顯微觀察得知，兩種海水酸化模式下，中間球海膽四腕浮游幼體均出現(xiàn)對(duì)稱(chēng)性缺失和骨針外露現(xiàn)象，且對(duì)稱(chēng)性缺失程度隨海水pH的降低而升高；掃描電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，兩種海水酸化模式下，中間球海膽四腕浮游幼體骨針的表面及橫截面均有溶蝕痕跡，且溶蝕程度隨海水pH的降低而加劇。結(jié)果提示，海水酸化可通過(guò)降低胚胎上浮率、浮游幼體存活率以及破壞幼體對(duì)稱(chēng)性和骨針結(jié)構(gòu)影響中間球海膽的早期發(fā)育及存活。

海水酸化；中間球海膽；早期發(fā)育；存活；骨針

工業(yè)革命以來(lái)，由于化石燃料的大量燃燒和森林的退化，CO2在大氣中的體積分?jǐn)?shù)已從工業(yè)革命前的約0.28‰升至目前的0.395‰，這些CO2中的30%～40%被海洋所吸收，導(dǎo)致海水酸化現(xiàn)象的產(chǎn)生[1]。海水酸化的本質(zhì)是由于大氣中增加的CO2和海水中的H2O反應(yīng)形成H2CO3,放出了H+,使海水的pH下降。增多的H+和碳酸鹽離子結(jié)合形成碳酸氫鹽,導(dǎo)致碳酸根離子減少[2]。聯(lián)合國(guó)政府間氣候變化專(zhuān)門(mén)委員會(huì)報(bào)告顯示，自1880年以來(lái)，海洋平均pH下降了0.12，預(yù)計(jì)到本世紀(jì)末(2100年)，地球海水的平均pH將會(huì)再降0.3～0.5[3]。有研究表明，地球海水表面的pH正在以難以預(yù)計(jì)的速度下降[4]，不斷加劇的海水酸化現(xiàn)象不僅破壞了海水碳酸鹽體系的動(dòng)態(tài)平衡，也同時(shí)改變了海洋生物的棲息環(huán)境和生存環(huán)境，勢(shì)必會(huì)對(duì)海洋生物與海洋生態(tài)系統(tǒng)產(chǎn)生深遠(yuǎn)的影響[5]。Doney等[6-7]曾指出，海水酸化對(duì)海洋環(huán)境下的食物鏈以及生態(tài)系統(tǒng)會(huì)產(chǎn)生深遠(yuǎn)、復(fù)雜的影響，想要全面地認(rèn)識(shí)和了解未來(lái)海水酸化將對(duì)海洋生態(tài)系統(tǒng)、食物鏈乃至全球生態(tài)系統(tǒng)造成的作用和影響，就必須全面地評(píng)估海洋生物對(duì)海水酸化的應(yīng)答。迄今為止，已被評(píng)估的生物僅占海洋物種總數(shù)的2%[8]。

當(dāng)前，評(píng)估海水酸化對(duì)海洋生物影響的主要方式是在實(shí)驗(yàn)室條件下通過(guò)模擬海水酸化條件而進(jìn)行的，模擬海水酸化的主要方法有CO2法[9]和強(qiáng)酸法[10]兩種，CO2法是指通過(guò)持續(xù)向海水中通入CO2氣體而達(dá)到模擬海水酸化的目的，而強(qiáng)酸法是指在海水中加入HCl、H2SO4等強(qiáng)酸來(lái)降低海水的pH。目前，人們已經(jīng)利用CO2法或強(qiáng)酸法研究了海水酸化對(duì)海藻[10]、珊瑚[11]、棘皮動(dòng)物[12]、軟體動(dòng)物[13-14]、魚(yú)類(lèi)[15-16]等海洋生物的生長(zhǎng)和發(fā)育的影響。

海膽屬棘皮動(dòng)物門(mén)、游在亞門(mén)、海膽綱，其早期發(fā)育可大致分為3個(gè)階段，即胚胎發(fā)育、浮游幼體以及匍匐變態(tài)階段[17]。其中，胚胎的健康發(fā)育是其后兩個(gè)發(fā)育階段的基礎(chǔ)和保障，浮游幼體階段則是關(guān)聯(lián)胚胎發(fā)育和匍匐變態(tài)兩個(gè)階段的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。有研究表明，海膽在其胚胎發(fā)育和浮游幼體發(fā)育階段對(duì)于環(huán)境因子(pH、鹽度、溫度等)的變化最為敏感，若這兩個(gè)時(shí)期的生長(zhǎng)發(fā)育受到影響，日后將會(huì)對(duì)該物種群落的地理分布、種群數(shù)量、遺傳多樣性以及環(huán)境適應(yīng)能力等產(chǎn)生復(fù)雜而深刻的影響[18]，對(duì)經(jīng)濟(jì)海膽而言，早期發(fā)育的健康與否將直接影響海膽日后的出苗率和成體海膽的產(chǎn)量，進(jìn)而影響海膽產(chǎn)業(yè)和漁業(yè)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展。

中間球海膽(Strongylocentrotusintermedius)原產(chǎn)于日本北海道和俄羅斯遠(yuǎn)東等地沿海，1989年自日本引入[19]，現(xiàn)已在大連、山東等地形成一定的人工養(yǎng)殖規(guī)模，是我國(guó)北方沿海最重要的經(jīng)濟(jì)海膽種類(lèi)。本研究以中間球海膽為對(duì)象，通過(guò)比較和分析CO2酸化脅迫和HCl酸化脅迫兩種模擬海水酸化模式下中間球海膽胚胎發(fā)育、浮游幼體存活及形態(tài)學(xué)變化等，探究海水酸化對(duì)中間球海膽早期發(fā)育及存活的影響，為更好地為評(píng)估海水酸化對(duì)經(jīng)濟(jì)類(lèi)海膽以及海洋生態(tài)的影響提供更多的參考資料，為進(jìn)一步評(píng)估海水酸化對(duì)海洋漁業(yè)的發(fā)展提供線(xiàn)索。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)用中間球海膽，平均殼徑(59.79±1.84) mm，購(gòu)自大連海寶漁業(yè)有限公司，于大連海洋大學(xué)農(nóng)業(yè)部北方海水增養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室1 t循環(huán)水水槽中暫養(yǎng)5 d后用于試驗(yàn)，暫養(yǎng)期間投喂海帶(Sacchrinajaponica)，養(yǎng)殖海水pH 8.00±0.03，溫度(20.06±0.12) ℃，鹽度31.23±0.13。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 酸化海水的制備

試驗(yàn)使用“實(shí)驗(yàn)室模擬海洋酸化系統(tǒng)”(專(zhuān)利號(hào)：ZL 2013 2 0267332.7)作為酸化海水制備裝置，CO2海水酸化模式的海水按照文獻(xiàn)[20]中方法進(jìn)行制備，HCl海水酸化模式的海水按照文獻(xiàn)[12]中方法進(jìn)行制備。根據(jù)政府間氣候變化專(zhuān)門(mén)委員會(huì)對(duì)2100年的海水pH的預(yù)測(cè)[3]，本試驗(yàn)設(shè)置1個(gè)自然海水組，2個(gè)CO2脅迫組以及2個(gè)強(qiáng)酸(HCl)脅迫組，每組設(shè)置3個(gè)平行，組別設(shè)置及處理?xiàng)l件見(jiàn)表1。

表1 試驗(yàn)組別與處理?xiàng)l件

每日采用pH計(jì)(HI 9124，HANNA，意大利)和水質(zhì)儀(YSI 6920)對(duì)各試驗(yàn)組海水的pH、溫度和鹽度進(jìn)行監(jiān)測(cè)，確保試驗(yàn)前后海水參數(shù)的穩(wěn)定性。試驗(yàn)前后海水化學(xué)參數(shù)情況見(jiàn)表2。

1.2.2 配子的獲得

按照文獻(xiàn)[21]中的方法對(duì)中間球海膽進(jìn)行人工催產(chǎn)和配子的收集。使用顯微鏡在人工授精前預(yù)先檢查配子的形態(tài)和活性，采用試受精率在95%以上的配子作為本試驗(yàn)授精用配子。為避免由于個(gè)體差異而帶來(lái)的試驗(yàn)誤差，本試驗(yàn)使用多雌(3只)對(duì)多雄(3只)的授精方法。

1.2.3 酸化脅迫

按照文獻(xiàn)[20]中的方法進(jìn)行CO2法的酸化脅迫，按照文獻(xiàn)[12]中的方法進(jìn)行強(qiáng)酸法(HCl)的酸化脅迫，將活力良好的中間球海膽配子分別置于自然海水對(duì)照組和各個(gè)海水酸化脅迫組中進(jìn)行授精。

1.2.4 樣本和數(shù)據(jù)的收集

采用五點(diǎn)取樣法[19]分別于授精后18 h和70 h時(shí)分別收集各試驗(yàn)組樣品，每組各1 mL，重復(fù)3次，計(jì)算不同脅迫條件下，中間球海膽胚胎的上浮率及四腕浮游幼體的存活率：

上浮率/%=18 h采樣所得胚胎數(shù)量/初始密度×100%

存活率/%=70 h采樣所得浮游幼體數(shù)量/初始密度×100%

于光學(xué)顯微鏡下(50i，Nikon)觀察各組中間球海膽四腕浮游幼體的形態(tài)；參照文獻(xiàn)[22]中方法制備中間球海膽四腕浮游幼體骨針，并于掃描電鏡(Quanta200，F(xiàn)EI)下觀察各試驗(yàn)組中間球海膽四腕浮游幼體骨針鈣化超顯微結(jié)構(gòu)。

1.2.5 數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)所得數(shù)據(jù)全部采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)的整理及圖表的繪制采用Excel 2010，對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS 16.00進(jìn)行，對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行顯著性分析利用單因素方差分析Tukey檢驗(yàn)，差異顯著性水平設(shè)置為α=0.05，差異極顯著水平設(shè)置為α=0.01。

表2 試驗(yàn)前后海水化學(xué)參數(shù)情況

2 結(jié)果與分析

2.1 兩種海水酸化模式對(duì)中間球海膽胚胎上浮率的影響

與自然海水組相比，授精18 h后，海水酸化處理組中間球海膽胚胎上浮率隨海水pH的降低而呈逐漸降低趨勢(shì)(圖1)。通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，CO2酸化脅迫能夠顯著降低中間球海膽胚胎的上浮率，其中CO2酸化脅迫組1上浮率與自然海水組相比呈顯著性差異(P<0.05)，而CO2酸化脅迫組2上浮率與自然海水組相比差異極顯著(P<0.01)(圖1a)；2個(gè)HCl酸化處理組中間球海膽上浮率與自然海水組相比均無(wú)顯著性差異(P>0.05)(圖1b)。當(dāng)△pH=-0.3時(shí)，兩種海水酸化模式對(duì)中間球海膽上浮率的影響無(wú)顯著性差異(P>0.05)，而當(dāng)△pH=-0.5時(shí)，CO2酸化脅迫組中間球海膽上浮率低于HCl酸化脅迫組，且差異極顯著(P<0.01)(圖1c)。

2.2 兩種海水酸化模式對(duì)中間球海膽浮游幼體存活率的影響

受精后70 h，檢測(cè)計(jì)算各試驗(yàn)組中間球海膽浮游幼體存活率發(fā)現(xiàn)，海水酸化可顯著降低中間球海膽浮游幼體的存活率，且呈現(xiàn)浮游幼體存活率隨海水pH降低而降低的趨勢(shì)(圖2)。與自然海水組相比，當(dāng)△pH=-0.3時(shí)，CO2酸化脅迫組1和HCl酸化脅迫組1中間球海膽浮游幼體存活率成顯著下降趨勢(shì)(P<0.05)(圖2a,b)；當(dāng)△pH=-0.5時(shí)，CO2酸化脅迫組2和HCl酸化脅迫組2中間球海膽浮游幼體存活率與自然海水組相比均顯著降低，且差異極顯著(P<0.01)。同一pH條件下，兩種模擬海水酸化模式對(duì)中間球海膽浮游幼體存活率的影響并無(wú)顯著性差異(P>0.05)(圖2c)。

圖1 兩種海水酸化模式對(duì)中間球海膽胚胎上浮率的影響a. CO2法模擬海水酸化對(duì)中間球海膽胚胎上浮率的影響；b. HCl法模擬海水酸化對(duì)中間球海膽胚胎上浮率的影響；c. 兩種酸化模式下中間球海膽胚胎上浮率的比較.*表示與自然海水組相比差異顯著(P<0.05)；**表示與自然海水組相比差異極顯著(P<0.01).

圖2 兩種海水酸化模式對(duì)中間球海膽浮游幼體存活率的影響a.CO2法模擬海水酸化對(duì)中間球海膽浮游幼體存活率的影響；b. HCl法模擬海水酸化對(duì)中間球海膽浮游幼體存活率的影響；c.兩種酸化模式下，中間球海膽浮游幼體存活率的比較. *表示與自然海水組相比差異顯著(P<0.05)；**表示與自然海水組相比差異極顯著(P<0.01).

2.3 兩種模擬海水酸化模式對(duì)中間球海膽四腕浮游幼體形態(tài)的影響

在光學(xué)顯微鏡下對(duì)中間球海膽四腕浮游幼體的形態(tài)進(jìn)行觀察，發(fā)現(xiàn)自然海水組中間球海膽浮游幼體形態(tài)對(duì)稱(chēng)性良好，骨針發(fā)育完整(圖3)。與自然海水組浮游幼體相比，CO2酸化脅迫組中間球海膽四腕浮游幼體則出現(xiàn)體長(zhǎng)變短、骨針外露、一側(cè)骨針缺失及對(duì)稱(chēng)性缺失現(xiàn)象，這些現(xiàn)象隨著pH的降低而加劇(圖3a)。同樣，HCl酸化脅迫組中的中間球海膽浮游幼體與自然海水組相比也出現(xiàn)了對(duì)稱(chēng)性缺失、骨針外露、一側(cè)骨針發(fā)育不全的現(xiàn)象，且這些現(xiàn)象也隨pH的降低而加劇(圖3b)?！鱬H=-0.5時(shí)，CO2酸化脅迫組中間球海膽四腕浮游幼體體長(zhǎng)變短、骨針外露、一側(cè)骨針發(fā)育不全及對(duì)稱(chēng)性缺失現(xiàn)象較HCl酸化脅迫組明顯(圖3)。

圖3 兩種海水酸化模式對(duì)中間球海膽四腕浮游幼體形態(tài)的影響a. CO2法模擬海水酸化對(duì)中間球海膽四腕浮游幼體形態(tài)的影響；b. HCl法模擬海水酸化對(duì)中間球海膽四腕浮游幼體形態(tài)的影響.箭頭指示外露骨針；紅色虛線(xiàn)表示四腕浮游幼體不對(duì)稱(chēng)程度.

2.4 兩種模擬海水酸化模式對(duì)中間球海膽四腕浮游幼體骨針超顯微結(jié)構(gòu)的影響

掃描電鏡結(jié)果顯示，自然海水組中間球海膽四腕浮游幼體骨針的表面和橫截面比較光滑，鈣化結(jié)構(gòu)較為均勻且致密，無(wú)溶蝕痕跡(圖4)。隨著海水pH值的降低，兩種海水酸化模式下，中間球海膽四腕浮游幼體呈現(xiàn)出鈣化結(jié)構(gòu)疏松和溶蝕現(xiàn)象，且疏松及溶蝕程度隨海水pH值的降低而加劇。其中，CO2酸化脅迫組1四腕浮游幼體的骨針表面雖然也比較致密均勻，但相比自然海水組則更為粗糙，可觀察到明顯的溶蝕痕跡；CO2酸化脅迫組2四腕浮游幼體的骨針結(jié)構(gòu)疏松，溶蝕現(xiàn)象十分嚴(yán)重，有大量、明顯的溶蝕痕跡(圖4b)；HCl酸化脅迫組1四腕浮游幼體的骨針表面與自然海水組相比，結(jié)構(gòu)依然致密，但表面更加粗糙，有溶蝕痕跡，HCl酸化脅迫組2四腕浮游幼體的骨針表面，與自然海水組相比，結(jié)構(gòu)疏松，被溶蝕程度嚴(yán)重，骨針表面密布溶蝕痕跡(圖4c)。pH相同時(shí)，兩種海水酸化模式對(duì)中間球海膽四腕幼體骨針結(jié)構(gòu)的影響程度較為一致，不存在明顯的差異。

圖4 兩種酸化脅迫模式對(duì)中間球海膽浮游幼體骨針結(jié)構(gòu)的影響a.中間球海膽四腕浮游幼體骨針模式圖；b.CO2法模擬海水酸化對(duì)中間球海膽浮游幼體骨針結(jié)構(gòu)的影響；c. HCl法模擬海水酸化對(duì)中間球海膽浮游幼體骨針結(jié)構(gòu)的影響；箭頭指示溶蝕部位.

3 討 論

3.1 兩種海水酸化模式對(duì)中間球海膽胚胎上浮率和四腕浮游幼體存活率的影響

在傳統(tǒng)的經(jīng)濟(jì)海膽育苗中，海膽胚胎的上浮率和浮游幼體的存活率是衡量海膽成活率和出苗率的重要指標(biāo)[17]。而海洋酸化的加劇會(huì)降低海洋生物的呼吸代謝酶活性，改變其呼吸代謝方式，會(huì)嚴(yán)重影響海洋生物的存活能力[23]。本研究結(jié)果顯示，CO2海水酸化模式和HCl海水酸化模式均可顯著降低中間球海膽胚胎的上浮率和四腕浮游幼體的存活率，這一結(jié)果與Kurihara等[12]的研究結(jié)果具有一定相似性。推測(cè)其原因，可能是由于海水pH的降低改變了中間球海膽胚胎內(nèi)部[H+]-[OH-]離子的動(dòng)態(tài)平衡，導(dǎo)致[H+]在胞內(nèi)大量堆積，破壞了其內(nèi)部的離子調(diào)節(jié)系統(tǒng)，進(jìn)而引發(fā)細(xì)胞組織滲透壓的改變，造成細(xì)胞的損傷或破裂，最終導(dǎo)致其無(wú)法繼續(xù)生存[24]。值得注意的是，當(dāng)△pH=-0.5時(shí)，相較于HCl海水酸化脅迫而言， CO2海水酸化脅迫可顯著降低中間球海膽胚胎的上浮率。有報(bào)道指出[25]，由CO2過(guò)量排放而導(dǎo)致的海水酸化可通過(guò)影響南極硅藻(Nitzschialecointei)的碳代謝而抑制其生長(zhǎng)，因此，筆者推測(cè)CO2海水酸化脅迫對(duì)中間球海膽早期存活的影響比HCl海水酸化脅迫的更為復(fù)雜，需進(jìn)一步開(kāi)展相關(guān)的分子生物學(xué)研究，以探明其復(fù)雜的基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。

3.2 兩種模擬海水酸化模式對(duì)中間球海膽四腕浮游幼體形態(tài)的影響

發(fā)育良好的形態(tài)是影響海膽浮游幼體生存的關(guān)鍵因素之一，不良的浮游幼體形態(tài)將會(huì)影響海膽浮游幼體的攝食和生態(tài)分布[26]。本研究結(jié)果顯示，CO2海水酸化模式和HCl海水酸化模式下中間球海膽四腕浮游幼體均出現(xiàn)體長(zhǎng)變短、骨針外露、一側(cè)骨針缺失以及對(duì)稱(chēng)性喪失等現(xiàn)象，相比于HCl海水酸化模式，CO2海水酸化模式對(duì)中間球海膽四腕浮游幼體形態(tài)的影響更為嚴(yán)重，這一結(jié)果與對(duì)白棘三列海膽(Tripneustesgratilla)[27]、馬糞海膽(Hemicentrotuspulcherrimus)和梅氏長(zhǎng)海膽(Echinometramathaei)[12]的研究結(jié)果一致。Matson等[28]通過(guò)試驗(yàn)證實(shí)，海洋酸化并不影響紫球海膽(Strongylocentrotuspurpuratus)的蛋白質(zhì)代謝和脂類(lèi)代謝，但是，他們推測(cè)紫球海膽可能是通過(guò)減小身體體積節(jié)省能量的方式來(lái)緩解海水酸化的脅迫效應(yīng)，據(jù)此推測(cè)，與紫球海膽同屬于球海膽科的中間球海膽也應(yīng)該是通過(guò)減小身體體積的方式應(yīng)答海水酸化的脅迫效應(yīng)，但其分子機(jī)制仍需進(jìn)一步的深入研究。

3.3 兩種模擬海水酸化模式對(duì)中間球海膽四腕浮游幼體骨針超顯微結(jié)構(gòu)的影響

3.4 小結(jié)

綜上所述，海水酸化可影響中間球海膽的早期發(fā)育及存活，進(jìn)而對(duì)中間球海膽產(chǎn)業(yè)和海洋生態(tài)產(chǎn)生一定的影響。相比由HCl引起的海水酸化而言，由CO2過(guò)量排放而引起的海水酸化對(duì)中間球海膽早期發(fā)育和存活的影響更為復(fù)雜，關(guān)于其詳細(xì)的作用機(jī)制，還需要進(jìn)一步在分子水平上進(jìn)行更深入的研究，才能使我們更加清晰和全面地了解中間球海膽響應(yīng)海水酸化的機(jī)制。

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EffectsofTwoKindsofSeawaterAcidificationScenarioonEarlyDevelopmentandSurvivalinSeaUrchinStrongylocentrotusintermedius

SUN Jingxian, LIU Minbo, LI Jiaxiang, YANG Mengyu, HU Wanbin, CHANG Yaqing, HUANG Xianya, DUAN Lizhu, ZHAN Yaoyao

( Key Laboratory of Mariculture & Stock Enhancement in North Chinas Sea, Ministry of Agriculture, Dalian Ocean University, Dalian 116023, China )

The carbon dioxide (CO2) method and strong acid (HCl) method were used to simulate seawater acidification scenario to study the effects of seawater acidification on early development and survival in the sea urchinStrongylocentrotusintermedius. Results showed that the percent hatched blastulae and four-armed larval survival rate were decreased as seawater pH decreased compared to that in the control; as compared to the larvae reared in control condition, the symmetry of four-armed larvae were affected either in CO2-induced seawater acidification conditions or HCl-induced seawater acidification conditions; scanning electron microscopy(SEM) revealed that the surface and cross-section of spicules of the sea urchin larvae in control group were smooth, dense and uniform. However, corrosion was observed in both surface and cross-section of spicules of the sea urchin larvae cultured in both CO2-induced seawater acidification and HCl-induced seawater acidification scenarios as compared to that in the control, the corrosion degree being increased as seawater pH decreased. The finding suggested that both CO2-induced seawater acidification and HCl-induced seawater acidification affected the early development and survival of the sea urchin negatively, especially CO2-induced seawater acidification.

seawater acidification;Strongylocentrotusintermedius; early development; survival; spicule

10.16378/j.cnki.1003-1111.2017.04.005

S968.9

A

1003-1111(2017)04-0429-07

2016-04-26；

2016-09-06.

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(41206128).

孫景賢(1991—), 碩士研究生；研究方向: 生物化學(xué)與分子生物學(xué). E-mail: 537739sun@gmail.com. 通訊作者: 湛垚垚(1978—), 副教授, 博士；研究方向: 海洋生物學(xué)、生物化學(xué)與分子生物學(xué).E-mail:zhanyaoyao@dlou.edu.cn.