陸學(xué)云

（江蘇糧滿(mǎn)倉(cāng)農(nóng)化有限公司，江蘇揚(yáng)州 225247）

30%吡唑醚菌酯·葉菌唑水乳劑的高效液相色譜分析方法研究

陸學(xué)云

（江蘇糧滿(mǎn)倉(cāng)農(nóng)化有限公司，江蘇揚(yáng)州 225247）

采用高效液相色譜法測(cè)定30%吡唑醚菌酯·葉菌唑水乳劑，使用C18色譜柱，以乙腈＋0.3%冰乙酸水溶液（體積比70∶30）為流動(dòng)相，在柱溫25℃、波長(zhǎng)230 nm、流量1.0 mL/min色譜條件下進(jìn)行分析。吡唑醚菌酯和葉菌唑的標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.032和0.028，變異系數(shù)分別為0.16%和0.27%，線(xiàn)性相關(guān)系數(shù)均為0.999 8，平均回收率分別為99.4%和99.6%。

吡唑醚菌酯；葉菌唑；高效液相色譜；分析

吡唑醚菌酯（pyraclostrobin）是巴斯夫公司于1993年發(fā)現(xiàn)的新型甲氧基丙烯酸酯類(lèi)殺菌劑。其為線(xiàn)粒體呼吸抑制劑，通過(guò)阻止細(xì)胞色素b和c1間電子傳遞而起效。吡唑醚菌酯高效、廣譜，毒性低，且對(duì)非靶標(biāo)生物安全，對(duì)使用者和環(huán)境友好。吡唑醚菌酯不僅具有保護(hù)、治療、鏟除活性，還是一個(gè)植物保健品，能夠促進(jìn)植物生長(zhǎng)[1]。葉菌唑（metconazole）為三唑類(lèi)殺菌劑，通過(guò)抑制麥角甾醇生物合成起效。其殺菌譜廣，活性高，兼具保護(hù)和治療活性。葉菌唑主要用于谷物防治多種葉部病害，其既可采用莖葉處理又可用于種子處理[2]。

吡唑醚菌酯與葉菌唑復(fù)配不僅能有效延緩抗性的產(chǎn)生，而且對(duì)小麥多種病害有很好的防治效果。目前有關(guān)吡唑醚菌酯和葉菌唑液相色譜分析方法已見(jiàn)報(bào)道，而二者復(fù)配產(chǎn)品的分析方法尚未見(jiàn)公開(kāi)報(bào)道[3-5]。本文建立了在同一色譜條件下同柱分離測(cè)定吡唑醚菌酯與葉菌唑的方法。該方法操作簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確，可以為企業(yè)生產(chǎn)過(guò)程質(zhì)量控制和質(zhì)檢機(jī)構(gòu)質(zhì)量檢測(cè)提供參考。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 試劑

乙腈：色譜純；水：2次蒸餾水；吡唑醚菌酯標(biāo)樣（≥99.0%）、葉菌唑標(biāo)樣（≥99.0%），北京勤誠(chéng)亦信科技開(kāi)發(fā)有限公司；30%吡唑醚菌酯·葉菌唑水乳劑（20%吡唑醚菌酯＋10%葉菌唑），江蘇糧滿(mǎn)倉(cāng)農(nóng)化有限公司制。

1.2 儀器

高效液相色譜儀：島津LC-20AT，具可變波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器；色譜工作站；色譜柱：不銹鋼柱（250 mm×4.6 mm），內(nèi)裝Inertsil ODS-3（5 μm）填充物；微量進(jìn)樣器：50 μL；過(guò)濾器：濾膜孔徑約0.45 μm；超聲波清洗器。

1.3 液相色譜操作條件

流動(dòng)相：乙腈＋0.3%冰乙酸水溶液（體積比70∶30）；流量：1.0 mL/min；柱溫：25℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：230 nm；進(jìn)樣體積：25 μL。保留時(shí)間：葉菌唑約7.7 min；吡唑醚菌酯約11.7 min。

上述色譜操作條件系典型操作參數(shù)。實(shí)際操作時(shí)，可根據(jù)不同儀器的特點(diǎn)，對(duì)給定的操作參數(shù)進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整，以期獲得最佳效果。典型的高效液相色譜圖見(jiàn)圖1、圖2。

圖1 標(biāo)樣高效液相色譜圖

圖2 試樣高效液相色譜圖

1.4 測(cè)定步驟

1.4.1 溶液的配制

分別稱(chēng)取葉菌唑標(biāo)樣0.03 g、吡唑醚菌酯標(biāo)樣0.06 g（精確至0.000 2 g），置于同一50 mL容量瓶中，加入約30 mL乙腈，在超聲波水浴中振蕩5 min，冷卻，乙腈定容。準(zhǔn)確移取5 mL標(biāo)樣母液于50 mL容量瓶中，用乙腈稀釋并定容，備用。

稱(chēng)取30%吡唑醚菌酯·葉菌唑水乳劑試樣0.3 g（精確至0.000 2 g），置于50 mL容量瓶中，加入約30mL乙腈，在超聲波水浴中振蕩5 min，冷卻，用乙腈定容。準(zhǔn)確移取5 mL上述溶液于50 mL容量瓶中，用乙腈定容，過(guò)濾，備用。

1.4.2 測(cè)定及計(jì)算

在上述操作條件下，待儀器基線(xiàn)穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至相鄰2針標(biāo)樣溶液峰面積相對(duì)變化小于1.0%，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測(cè)定。

將測(cè)得的2針試樣溶液以及試樣前后2針標(biāo)樣溶液中吡唑醚菌酯（或葉菌唑）的峰面積分別進(jìn)行平均。試樣中吡唑醚菌酯（或葉菌唑）的質(zhì)量分?jǐn)?shù)w（%）按下式計(jì)算。

式中：A1—標(biāo)樣溶液中吡唑醚菌酯（或葉菌唑）峰面積的平均值；A2—試樣溶液中吡唑醚菌酯（或葉菌唑）峰面積的平均值；m1—吡唑醚菌酯（或葉菌唑）標(biāo)樣的質(zhì)量，g；m2—試樣的質(zhì)量，g；P—標(biāo)樣中，吡唑醚菌酯（或葉菌唑）質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜條件的選擇

對(duì)不同種類(lèi)及體積比的流動(dòng)相進(jìn)行實(shí)驗(yàn)對(duì)比。采用乙腈＋0.3%冰乙酸水溶液為流動(dòng)相（體積比70∶30），流量在1.0 mL/min的條件下，有效成分與雜質(zhì)能獲得較好分離，且峰形對(duì)稱(chēng)，保留時(shí)間適當(dāng)。

吡唑醚菌酯、葉菌唑在230 nm波長(zhǎng)下有較好的吸收，而且所用試劑幾乎無(wú)響應(yīng)，因此選擇230 nm為檢測(cè)波長(zhǎng)。

2.2 分析方法的線(xiàn)性相關(guān)性測(cè)定

分別稱(chēng)取葉菌唑標(biāo)樣0.05 g和吡唑醚菌酯標(biāo)樣0.05 g（精確至0.000 2 g）于25 mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度，充分搖勻。用移液管取1.0 mL上述母液，置于另一10 mL容量瓶中，乙腈定容。最后用移液管準(zhǔn)確移取1次稀釋液0.5 mL、1.0 mL、1.5 mL、2.0 mL、2.5 mL于5個(gè)10 mL容量瓶中，乙腈定容，搖勻。在上述液相色譜條件下進(jìn)行測(cè)定，并以吡唑醚菌酯（或葉菌唑）質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。吡唑醚菌酯的線(xiàn)性方程為y=377 469 x＋25 638，相關(guān)系數(shù)為0.999 8。葉菌唑的線(xiàn)性方程為y=366 837 x＋39 460，相關(guān)系數(shù)為0.999 8。

2.3 分析方法的精密度測(cè)定

稱(chēng)取30%吡唑醚菌酯·葉菌唑水乳劑樣品，進(jìn)行5次平行測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果

統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果顯示：吡唑醚菌酯的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.032，變異系數(shù)為0.16%；葉菌唑的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.028，變異系數(shù)為0.27%。

2.4 分析方法的準(zhǔn)確度測(cè)定

采用標(biāo)樣添加法，在已知含量的試樣中分別添加一定量的標(biāo)樣，按照上述測(cè)定方法進(jìn)行測(cè)定。測(cè)得吡唑醚菌酯的平均回收率為99.4%，葉菌唑的平均回收率為99.6%，見(jiàn)表2。

表2 準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3 結(jié)論

本方法可同時(shí)測(cè)定30%吡唑醚菌酯·葉菌唑水乳劑中吡唑醚菌酯、葉菌唑質(zhì)量分?jǐn)?shù)。方法精密度和準(zhǔn)確度較高，線(xiàn)性關(guān)系良好，具有簡(jiǎn)便、快速，分離效果好等特點(diǎn)，是一種可行的分析方法，可滿(mǎn)足產(chǎn)品檢驗(yàn)的要求。

[1]楊麗娟,柏亞羅.甲氧基丙烯酸酯類(lèi)殺菌劑——吡唑醚菌酯[J].現(xiàn)代農(nóng)藥,2012,11(4):46-50;56.

[2]劉長(zhǎng)令.國(guó)外農(nóng)藥品種手冊(cè)（增補(bǔ)本）[M].沈陽(yáng):全國(guó)農(nóng)藥工業(yè)信息站,2000:164-165.

[3]王秀云,葉進(jìn)剛,張曉茹,等.12%己唑醇·吡唑醚菌酯懸浮劑的高效液相色譜分析[J].世界農(nóng)藥,2014,36(2):55-57.

[4]徐妍,丁維成,王昌錦,等.30%唑醚·戊唑醇懸浮劑的高效液相色譜分析方法[J].現(xiàn)代農(nóng)藥,2016,15(1):19-21.

[5]陳根良,夏俊,劉春杰,等.葉菌唑原藥高效液相色譜分析方法研究[J].農(nóng)藥科學(xué)與管理,2014,35(9):43-45.

Analytical Method of Pyraclostrobin＋Metconazole 30%EW by HPLC

LU Xue-yun
(Jiangsu Liangmancang Agrochemical Co.,Ltd.,Jiangsu Yangzhou 225247,China)

An analysis method of pyraclostrobin+metconazole 30%EW was developed by HPLC.The mobile phase was acetonitrile+acetic acid aqueous solution,with volume ratio of 70∶30.The results showed that the standard deviations of pyraclostrobin and metconazole were 0.032 and 0.028,the relative standard deviations were 0.16%and 0.27%,the linear correlation coefficients were both 0.999 8,the average recoveries were 99.4%and 99.6%,respectively.The method met the requirements of analysis.

pyraclostrobin;metconazole;HPLC;analysis

TQ 450.7

A

10.3969/j.issn.1671-5284.2017.06.012

2017-07-07；

2017-07-27

陸學(xué)云（1964—），男，工程師，主要從事農(nóng)藥生產(chǎn)技術(shù)的管理工作。E-mail：xueyun1596@163.com

（責(zé)任編輯：柏亞羅）