王禹，于非，譚巍，劉萬達

(黑龍江省農(nóng)科院園藝分院，哈爾濱 150069)

金線蓮快繁體系的建立

王禹，于非，譚巍，劉萬達

(黑龍江省農(nóng)科院園藝分院，哈爾濱 150069)

試驗采用福建戴云山金線蓮的組培苗為材料，研究適宜生長培養(yǎng)的外植體及培養(yǎng)基；叢生芽增殖最佳培養(yǎng)基；組培苗生根的最佳培養(yǎng)基，以期建立金線蓮組織培養(yǎng)快繁體系，提高繁殖速度和質(zhì)量。結(jié)果表明：福建戴云山金線蓮生長培養(yǎng)的最佳外植體為根狀莖，培養(yǎng)基為MS + 1mg/L 6-BA + 0.2 mg/L NAA；叢生芽增殖的最佳培養(yǎng)基為MS + 2mg/L 6-BA + 0.1mg/L NAA；組培苗生根的最佳培養(yǎng)基為MS + 0.3mg/L IBA + 0.5mg/L NAA。

金線蓮；組織培養(yǎng)；快速繁育； 根狀莖

金線蓮[Anoectochilusroxburghii(Wall.) Lindl]，又名金線蘭、鳥人參等,屬蘭科植物，其生態(tài)分布也較特殊，適應性較窄，主要生長在深山密林下或溪澗旁潮濕的草叢中或竹林下，特別是闊葉林下的陰濕地帶[1]。金線蓮是我國傳統(tǒng)的中藥材，它清涼解毒、滋陰降火、消炎止痛，對無名腫痛、發(fā)燒、止瀉、蛇傷等均有顯著的療效[4]，因此，金錢蓮具有廣闊的開發(fā)利用前景。

由于金線蓮對生態(tài)條件要求較嚴，而適應性較差，傳統(tǒng)的扦插、種子等繁殖方式繁殖率極低，因此建立金線蓮經(jīng)濟、高效的種苗繁殖技術(shù)，具有重要的意義[3]。本試驗以金線蓮組培苗為材料，篩選出適宜組織培養(yǎng)的外植體，外植體生長、叢生芽增殖和生根的培養(yǎng)基，建立起金線蓮組織培養(yǎng)的技術(shù)體系，提高的金線蓮的繁殖速度和數(shù)量。

1 試驗材料

本試驗采用福建戴云山金線蓮的組培苗為材料，采用的培養(yǎng)基均為MS + 生長激素 + 30g/L蔗糖 + 7g/L瓊脂，pH=5.7；培養(yǎng)溫度為25℃；光照時間14h/d。

2 實驗內(nèi)容與方法

2.1 適宜生長培養(yǎng)的外植體

將金線蓮組培苗的莖和根狀莖分別切成2cm大小，接種到生長培養(yǎng)基上，生長激素，采用6-BA、NAA；每瓶接種5個外植體，接種6瓶，30天后調(diào)查萌芽情況。萌芽率(%)=萌芽的外植體數(shù)/接種的總外植體數(shù)×100%。

2.2 不同生長激素對叢生芽增殖的影響

將組培苗的根狀莖切成2cm大小，接種到增殖培養(yǎng)基上，生長激素采用6-BA、NAA、TDZ；每瓶接種5個已萌芽的外植體，接種6瓶，30d后調(diào)查增殖情況。增殖系數(shù)=增殖后芽個數(shù)/接種的總芽個數(shù)。

2.3 不同生長激素對組培苗生根的影響

選取長成3cm高的組培苗，切成帶3～4個芽的叢狀，轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基上，生長激素采用6-BA、NAA、 IBA，每瓶接種5個叢生芽，接種6瓶，30d后調(diào)查組培苗生根情況。生根比率(%)=生根的叢生芽個數(shù)/接種的總叢生芽個數(shù)×100%；生根條數(shù)=每個叢生芽生出的根條數(shù)。

3 結(jié)果與分析

3.1 適宜生長培養(yǎng)的外植體選擇

表1 不同外植體生長情況

從表1看出金線蓮適宜的外植體為根狀莖，易于叢生芽產(chǎn)生。隨著6-BA濃度的升高叢生芽產(chǎn)生速度加快，并且適當添加NAA可促進叢生芽的產(chǎn)生，但6-BA濃度高于3mg/L時，會導致芽黃化，生長發(fā)育不良。因此，金線蓮根狀莖的最適宜生長培養(yǎng)基為MS + 1mg/L 6-BA + 0.2 mg/L NAA。

3.2 適宜叢生芽增殖的生長激素篩選

表2 生長激素對叢生芽增殖的影響

從表2得出金線蓮叢生芽增殖的最佳培養(yǎng)基為MS + 2mg/L 6-BA + 0.1 mg/L NAA，增殖系數(shù)可達到4.3。且隨著6-BA和TDZ濃度的升高金線蓮叢生芽增殖加快；雖然添加NAA可促進叢生芽的產(chǎn)生，但濃度高會導致其增殖速度減慢，生長加快，因此要適當添加。

3.3 篩選適宜組培苗生根的生長激素

表3 生長激素對組培苗生根的影響

從表3得出，組培苗生根的最佳培養(yǎng)基為MS + 0.3mg/L IBA + 0.5mg/L NAA，隨著IBA濃度升高，生根條數(shù)增多和生根率增高，并且適當?shù)奶砑覰AA有利于組培苗生長。

4 結(jié)論與討論

福建戴云山金線蓮生長培養(yǎng)的最佳外植體為根狀莖，培養(yǎng)基為MS + 1mg/L 6-BA + 0.2mg/L NAA；叢生芽增殖的最佳培養(yǎng)基為MS + 2mg/L 6-BA + 0.1mg/L NAA；組培苗生根的最佳培養(yǎng)基為MS + 0.1mg/L IBA + 0.5mg/L NAA。

在實驗過程中發(fā)現(xiàn)，金線蓮在生長培養(yǎng)時，有時芽萌發(fā)較慢，可達到50天后萌芽，及時更換培養(yǎng)基即可。在增殖培養(yǎng)過程中，添加NAA可促進叢生芽的產(chǎn)生，但濃度高會導致增殖率下降，從而生長加快，因此要適當添加。在生根培養(yǎng)過程中，要綜合考慮組培苗的生根率和是否健壯，選擇激素配比。

[1]羅曉青,申剛,蒙秋伊,等.興仁金線蓮組織培養(yǎng)與快繁試驗[J].西南農(nóng)業(yè)學報,2014,27(1):331-334.

[2]張鐵.金線蓮組織培養(yǎng)研究進展[J].文山學院學報,2013,26(6):11-14.

[3]劉潤東,郭文杰,林忠寧,等.金線蓮組織培養(yǎng)及營養(yǎng)成分的分析研究[J].廣西農(nóng)業(yè)科學,2006,37(5):506-509.

[4]陳兆貴.金線蓮組織培養(yǎng)和移栽技術(shù)研究[J].惠州學院學報,2007,27(6):14-17.

[5]李麗容,金開正.鐵線蓮組培快繁技術(shù)研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學,2016(15):138-139.

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[7]靳松,陳澤斌,夏體淵.金線蓮試管苗高效快繁技術(shù)研究[J].時珍國醫(yī)國藥,2016(6):1491-1493.

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TheEstablishmentofRapidPropagationSystemofAnoectochilusroxburghii

Wang Yu,Yu Fei,Tan Wei,Liu Wanda

(Horticultural Sub-academy of Heilongjiang Academy of Agriculture Sciences,Harbin,150069)

In this experiment,the materials is somaclone ofAnoectochilusroxburghiiin Fujian Dai Yunshan,we study suitable for growth of explant and medium; Plant growth regulator effects on adventitious bud proliferation and rooting of tissue culture seedling,in order to establish aAnoectochilusroxburghiitissue culture rapid propagation system.It will be used to improve the speed and quality breeding. The results show that the best of explants is rhizomes; optimum adventitious bud regeneration medium for MS + 1mg/L 6-BA + 0.2 mg/L NAA; Best adventitious bud proliferation culture medium for MS + 2mg/L 6-BA + 0.1 mg/L NAA; The best rooting culture medium for MS + 0.1mg/L IBA + 0.5 mg/L NAA.

Anoectochilusroxburghii；Tissue culture；Rapid breeding；Rhizomes

2017-08-18

王禹(1982-)，女，碩士研究生,助理研究員，從事植物組織培養(yǎng)的研究，E-mail:liuwanda1982@126.com。

DOI.:10.13268/j.cnki.fbsic.2017.06.014

S567.23

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