孟繁磊，宋志峰，張振都，何智勇，蔡紅梅，魏春雁

（吉林省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測技術(shù)研究所；農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估實(shí)驗(yàn)室（長春），吉林長春130033）

超高液相色譜法測定黃瓜中的4種苯并咪唑類農(nóng)藥殘留量

孟繁磊，宋志峰，張振都，何智勇，蔡紅梅，魏春雁*

（吉林省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測技術(shù)研究所；農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估實(shí)驗(yàn)室（長春），吉林長春130033）

建立檢測黃瓜中的多菌靈、噻菌靈、甲基硫菌靈、2-氨基苯并咪唑殘留量的超高液相色譜方法。黃瓜樣品用乙腈勻漿提取，鹽析凈化后，經(jīng)C18柱分離，甲醇—水體系為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，可調(diào)波長檢測器分別在275nm、265nm、300nm和275nm處檢測，保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。結(jié)果4種農(nóng)藥在1~100mg/L的范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r2=0.9987~0.9992）。該方法前處理步驟簡單，分析速度快，能夠滿足農(nóng)殘分析的要求。

超高液相色譜法；黃瓜；農(nóng)殘

多菌靈等苯并咪唑類農(nóng)藥是常用的低毒殺菌，能防治多種作物病害，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中廣泛使用。已報(bào)道的苯并咪唑類農(nóng)藥分析方法有分光光度法[1-2]、氣相色譜法[3]、液相色譜法[4-5]、液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法[6-7]等。本研究在總結(jié)各種方法的基礎(chǔ)上，結(jié)合本實(shí)驗(yàn)室條件，篩選出適合黃瓜中4種苯并咪唑類農(nóng)藥前處理及檢測方法，同時(shí)為檢測其他基質(zhì)上4種農(nóng)藥殘留提供技術(shù)支持。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

超高液相色譜儀：Waters公司；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：德國 IKA公司；渦旋混勻器：德國IKA公司；

乙腈、甲醇、丙酮：色譜級(jí)，賽默飛世爾科技公司；無水硫酸鎂：分析純，廣州分析試劑廠；N-丙基乙二胺（PSA）、C18：美國安捷倫公司。

多菌靈、噻菌靈、甲基硫菌靈、2-氨基苯并咪唑：純度≥98%，北京壇墨質(zhì)檢科技有限公司。

1.2 色譜條件

色譜柱：ACQUITYUPLCBEHC18（100×2.1mm，1.7μm）；流動(dòng)相：甲醇溶液+水（40+60）；流速：0.5mL/min；柱溫：40℃；進(jìn)樣量：5μL。檢測波長，見表1。

表1 檢測波長切換表

1.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

分別稱取0.01g多菌靈、噻菌靈、甲基硫菌靈、2-氨基苯并咪唑，用丙酮溶解定容至100mL，搖勻，零下18℃保存。然后用流動(dòng)相配制成濃度分別為 1mg/L、2mg/L、5mg/L、10mg/L、100mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液?；旌蠘?biāo)準(zhǔn)溶液的色譜圖，見圖1。

1.4 樣品處理

1.4.1 提取 稱取20g試樣于具塞離心管中，加入25mL乙腈，10000r/min高速勻漿2min，加入無水硫酸鎂和氯化鈉的混合物（質(zhì)量比 1∶1）15g，蓋上蓋子劇烈振搖 1min，5000r/min離心5min，使乙腈和水分層。

1.4.2 凈化 移取上層乙腈1mL置于預(yù)先加有50mgPSA、50mgC18、150mg無水 MgSO4的2mL離心管內(nèi)，2000r/min渦旋2min，5000r/min離心5min，取上層清液0.5mL，加入 0.5mL超純水中，過0.22μm的濾膜，供UPLC分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 檢測波長的確定

通過紫外分光光度計(jì)對(duì)多菌靈、噻菌靈、甲基硫菌靈、2-氨基苯并咪唑標(biāo)準(zhǔn)品的掃描，確定了最大吸收波長分別在275nm、265nm、300nm、275nm處。

圖1 4種苯并咪唑類農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品的色譜圖

2.2 線性關(guān)系和檢出限

將1.3中的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液按照1.2的色譜條件進(jìn)行測定，峰面積為縱坐標(biāo)（y），濃度 C（mg/L）為橫坐標(biāo)（x）繪制工作曲線，以信噪比（S/N）=3時(shí)的測定濃度為測定低限，結(jié)果見表2。結(jié)果表明，4種農(nóng)藥的濃度與對(duì)應(yīng)的峰面積呈良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)在0.9987~0.9996之間，測定低限不大于0.1mg/kg。

表2 4種苯并咪唑類農(nóng)藥的回歸方程、線性范圍和測定低限

2.3 方法的回收率與精密度

本試驗(yàn)采用加標(biāo)的方式來進(jìn)行回收率的測定。稱取18份空白黃瓜基質(zhì)，加入不同濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，進(jìn)行回收率和重復(fù)性實(shí)驗(yàn)，每個(gè)添加濃度平行測定6次，按照1.4進(jìn)行樣品處理、1.2色譜條件測定，結(jié)果見表3。4種苯并咪唑類農(nóng)藥的回收率為86.89%~100.21%，RSD為1.98%~5.26%，表明該方法提取測定黃瓜中的4種苯并咪唑類農(nóng)藥準(zhǔn)確可行及重復(fù)性良好。

表3 黃瓜樣品中添加回收率（n=6）

3 結(jié)論

本方法建立了超高效液相色譜同時(shí)測定黃瓜中多菌靈、噻菌靈、甲基硫菌靈、2-氨基苯并咪唑殘留量的方法，該方法簡便快速、操作簡便、結(jié)果可靠，為其他蔬菜中苯并咪唑類農(nóng)藥的檢測提供參考。

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TS255.7

A

10.14025/j.cnki.jlny.2017.22.026

孟繁磊，碩士，助理研究員，研究方向：食品質(zhì)量安全。

魏春雁，教授，研究方向：食品及農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測。