張文靜，謝天康，梁 爽，易裕燊，周有東

（1．湖北文理學院，湖北 襄陽 441053；2．襄陽中心醫(yī)院，湖北 襄陽 441053）

利尿藥實驗的改進

張文靜1，謝天康1，梁 爽1，易裕燊1，周有東2*

（1．湖北文理學院，湖北 襄陽 441053；2．襄陽中心醫(yī)院，湖北 襄陽 441053）

目的 利用尿液記滴器分析藥物對家兔尿液生成的影響。方法 麻醉家兔后，將導尿管插入尿道，經(jīng)耳緣靜脈留置針依次給予生理鹽水、50%葡萄糖和0．1%呋塞米，用尿液記滴器收集家兔10分鐘的尿量，用BL－420生物信號采集處理系統(tǒng)記錄數(shù)據(jù)。結(jié)果 50%葡萄糖組和0．1%呋塞米組家兔尿量顯著增加，與生理鹽水組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0．01）；0．1%呋塞米組與50%葡萄糖組家兔尿量比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0．01）。結(jié)論 本次實驗改進表明加大實驗投入、探索和優(yōu)化實驗方法及內(nèi)容，對提高實驗教學水平具有重要作用。

實驗教學；利尿藥；實驗改進

藥理學是一門理論性和實踐性均很強的學科，課程理論來源于實踐，實驗課在藥理學教學中占有十分重要的地位[1]。通過藥理學實驗教學幫助學生加深對理論知識的理解和掌握，有利于培養(yǎng)學生自主學習、獨立思考和團隊合作、發(fā)現(xiàn)問題、分析問題和解決問題的能力[2]。

筆者在藥理學實驗教學中深刻體會到由于實驗經(jīng)費有限，實驗教學不能達到人才培養(yǎng)的預期目標，表現(xiàn)為：儀器設(shè)備較少，定性實驗和驗證性實驗居多，設(shè)計性實驗較少；實驗操作照搬教科書，忽視學生特點和能力，教學過程安排不合理。因此，加大實驗投入、探索和優(yōu)化實驗方法及內(nèi)容、提高實驗教學水平十分必要。本文探討運用尿液記滴器分析藥物對家兔尿液生成的影響，簡化實驗操作步驟，重點觀察藥物對尿液生成的影響，通過生物信號采集系統(tǒng)記錄尿滴趨勢圖形，并獲得重復性好的實驗數(shù)據(jù)，現(xiàn)介紹如下。

1 實驗用物與方法

1.1 實驗動物

健康成年雄性家兔 6 只，體重（1．90±0．08）kg。

1.2 實驗器材

BL－420生物信號采集處理系統(tǒng)與尿液記滴器（成都泰盟公司），一次性無球囊導尿管（河北，桂龍集團），其他常規(guī)哺乳動物實驗器材由本院機能學部實驗室提供。

1.3 實驗藥品

20%的烏拉坦溶液，50%的葡萄糖注射液（湖南中南科倫藥業(yè)有限公司，規(guī)格20 ml：10 g），1%呋塞米注射液（蕪湖康奇制藥有限公司，規(guī)格 2 ml：20 mg），0．9%氯化鈉注射液，即生理鹽水（江蘇科倫藥業(yè)有限公司），肝素鈉注射液（江蘇萬邦生化醫(yī)藥股份有限公司，規(guī)格2 ml：12 500國際單位）。呋塞米采用蒸餾水配制成0．1%工作液，肝素鈉采用生理鹽水配制成工作液2 000國際單位。

1.4 手術(shù)操作及儀器連接

家兔稱重后，通過耳緣靜脈留置針麻醉（20%的烏拉坦，4ml/kg），固定于操作臺。導尿管前端涂抹石蠟油，將導尿管從家兔尿道口輕輕插入[3]，深度約8～10 cm，導尿管另一端連接尿液記滴器（略做改動），記滴器信號連接BL－420生物信號采集與分析系統(tǒng)尿滴通道，開啟軟件系統(tǒng)，選擇“實驗項目”—“泌尿?qū)嶒灐薄澳蛏傻挠绊懸蛩亍薄?待基礎(chǔ)尿量穩(wěn)定后（1～2滴/30 s），依次給予：生理鹽水（2 ml/kg）—50%的葡萄糖（2 ml/kg）—0．1%呋塞米（2 ml/kg），收集給藥后10分鐘尿量，藥物的給予通過觀察尿滴恢復至基礎(chǔ)狀態(tài)為依據(jù)（單位：滴/30 s）。

1.5 統(tǒng)計學分析

利用Graphpad Prism 5．0軟件處理實驗數(shù)據(jù)，藥物對尿量的影響采用F檢驗進行單因素方差分析，用Bonferroni法進行組間比較，各亞組之間用t檢驗分析差異，結(jié)果用（±s）表示，P＜0．05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 藥物對尿液生成的定性分析

通過尿液記滴器觀察藥物對尿滴生成趨勢的影響，見圖1。

2.2 藥物對尿液生成的定量分析

通過尿液記滴器量取給藥后10分鐘家兔的尿量，實驗結(jié)果見表1。50%葡萄糖組家兔10分鐘內(nèi)產(chǎn)生的尿量多于生理鹽水組（P＜0．01），0．1%呋塞米組家兔 10 分鐘內(nèi)產(chǎn)生的尿量多于生理鹽水組（P＜0．01），0．1%呋塞米組家兔 10 分鐘內(nèi)產(chǎn)生的尿量多于 50%葡萄糖組（P＜0．01）。

3 討論

利尿藥實驗是藥理學實驗教學的重點內(nèi)容，尿量是本實驗觀察的主要指標。結(jié)合教學探索和相關(guān)文獻報道，導尿管插管術(shù)對家兔損傷小，操作簡便，學生操作成功率高，從而給學生充分的時間來完成對藥物作用的觀察[4]。實驗中采用靜脈留置針進行耳緣靜脈注射給藥，避免多次耳緣靜脈進針對家兔耳緣靜脈的破壞和藥液滲漏，能提高實驗的成功率[5]。在尿液的收集上，用商品化的記滴裝置替代量筒燒杯，采用BL－420生物機能實驗系統(tǒng)記錄尿滴趨勢及測量尿量，方便動態(tài)地觀察尿液生成的趨勢，使尿量的數(shù)據(jù)更加客觀和準確，減少因主觀因素影響產(chǎn)生的誤差，使實驗結(jié)果便于量化處理，實現(xiàn)了本次實驗定性和定量分析的目的，對提高藥理學實驗教學質(zhì)量具有重要意義[6]。此外，在本次實驗改進探索中，筆者認為醫(yī)學基礎(chǔ)實驗課程需要打破傳統(tǒng)實驗教學中依附單一學科的模式，即實驗教學設(shè)計要充分體現(xiàn)各學科的相互滲透、交叉和整合。以本次實驗為例，引導學生回顧膀胱和尿道的解剖結(jié)構(gòu)特點、尿液的濃縮和稀釋生理學機制，適當引入中段尿電解質(zhì)和葡萄糖的測定、實驗數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析等。學生通過實驗課的學習，可以鞏固各學科基本理論、基本知識和基本技能，培養(yǎng)學生初步的科研能力。

圖1 利尿藥物對家兔尿液生成趨勢的影響

表1 不同藥物對家兔尿量的影響（±s，mL/10min）

表1 不同藥物對家兔尿量的影響（±s，mL/10min）

注：與生理鹽水組比較，*P＜0．01；與 50%葡萄糖組比較，#P＜0．01

組別生理鹽水組50%葡萄糖組0．1%呋塞米組尿量3．70±0．47 8．40±0．40*27．50±3．10*#

[1]楊杰，王蘭霞，張武．芻議?？茖哟蔚乃幚頇C能實驗教學改革模式[J]．衛(wèi)生職業(yè)教育，2011，29（16）：99－100．

[2]劉蓮，劉珍珍，胡婭，等．通過藥理學實驗教學改革培養(yǎng)學生科研能力初探[J]．長江大學學報，2015（10）：76－77．

[3]查旭，王望，黃海霞，等．泌尿生理實驗操作技術(shù)改進研究[J]．繼續(xù)醫(yī)學教育，2016（12）：65－67．

[4]蘆玲巧，董曉敏，馬思明，等．家兔循環(huán)系統(tǒng)綜合性實驗技術(shù)改進[J]．繼續(xù)醫(yī)學教育，2015（11）：68－69．

[5]胡晨．提高“尿生成影響因素”實驗成功率的幾點經(jīng)驗[J]．湖州師范學院學報，2014（6）：60－62．

[6]蘇丹，成建華，陳浩宏．有關(guān)“嗎啡鎮(zhèn)痛作用”的藥理學實驗教學改革[J]．四川生理科學雜志，2015（2）：107－108．

G424．31

B

1671－1246（2017）22－0073－02

湖北省教育廳項目（Q20162604）；湖北文理學院教學研究項目（JY2016063）

（*

周有東）