盧運(yùn)照　韋鳳省

【摘要】 結(jié)核分枝桿菌是結(jié)核性腦膜炎的主要致病菌，該病菌可以通過侵犯人體各個(gè)器官，不斷加重病情。對(duì)結(jié)核分枝桿菌進(jìn)行檢測(cè)，盡早確診病情，對(duì)患者予以針對(duì)性治療，是提升患者治療效果的關(guān)鍵。但是該病菌的檢測(cè)難度較大，一直是醫(yī)學(xué)難點(diǎn)。近年來關(guān)于結(jié)核性腦膜炎結(jié)核分枝桿菌檢測(cè)方法的研究越來越多，本研究對(duì)相關(guān)研究資料進(jìn)行整理分析，對(duì)相關(guān)診斷結(jié)果進(jìn)行綜述，以期為結(jié)核性腦膜炎的診斷做出科學(xué)指導(dǎo)，提升診斷準(zhǔn)確性。

【關(guān)鍵詞】 結(jié)核性腦膜炎； 結(jié)核分枝桿菌； 檢測(cè)方法

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2017.23.085 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1674-6805（2017）23-0163-02

結(jié)核性腦膜炎是一種腦膜和脊膜的非化膿性炎癥，主要由結(jié)核分枝桿菌引起，其發(fā)病率較高，在各種結(jié)合性疾病患者當(dāng)中有超過3.5%～10.5%的患者發(fā)生結(jié)核性腦膜炎[1]。該病的診斷準(zhǔn)確性低，各種診斷方法對(duì)于結(jié)核分枝桿菌的診斷靈敏性都不高，且患者沒有明顯的臨床癥狀，因此很多患者都不能得到及時(shí)、有效的治療，導(dǎo)致病情發(fā)生惡化，發(fā)展成為惡性病變，危及到其生命安全。腦脊液涂片抗酸染色 、結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)、結(jié)核分枝桿菌DNA檢測(cè)是該病的主要檢測(cè)方法[2]。

1 結(jié)核性腦膜炎結(jié)核分枝桿菌檢測(cè)的價(jià)值

結(jié)核性腦膜炎是一種對(duì)人體各項(xiàng)身體功能損害極大的一種疾病類型，該病屬于一種慢性疾病，發(fā)病極為隱匿，病程長(zhǎng)，由結(jié)核分枝桿菌對(duì)人體的各個(gè)神經(jīng)器官逐步侵蝕發(fā)展[3]。不同患者的臨床癥狀也各不相同，且往往并沒有特異性，主要表現(xiàn)為頭痛、發(fā)熱、乏力、食欲下降、精神狀況差等[4]，這些癥狀常常被患者忽略，不能成為疾病診斷的有效依據(jù)。對(duì)患者進(jìn)行臨床檢測(cè)是診斷該病的主要方法。結(jié)核分枝桿菌是結(jié)核性腦膜炎的病原菌，最早由德國細(xì)菌學(xué)家Robert Koch發(fā)現(xiàn)，并用實(shí)驗(yàn)證明其為結(jié)核性疾病的致病菌[5]。通過臨床檢測(cè)，在人體中檢測(cè)出該種病原菌則可確診病情，但是該種病菌診斷難度大，漏診、誤診發(fā)生率很高，這直接導(dǎo)致我國結(jié)核性腦膜炎的疫情發(fā)生嚴(yán)重惡化，每年死于結(jié)核性腦膜炎的患者逐漸增多[6]。隨著結(jié)核性腦膜炎發(fā)病率的逐年上升，引起了我國醫(yī)學(xué)界眾多學(xué)者的關(guān)注，人們逐漸認(rèn)識(shí)到結(jié)核分枝桿菌檢測(cè)的價(jià)值，紛紛開始投入到結(jié)核性腦膜炎結(jié)核分枝桿菌檢測(cè)研究當(dāng)中[7]，以期發(fā)現(xiàn)安全有效的檢測(cè)方法，提升該種疾病的診出率，減輕疾病對(duì)患者造成的危害。

2 結(jié)核性腦膜炎結(jié)核分枝桿菌檢測(cè)方法

在以往臨床診斷當(dāng)中腦脊液涂片抗酸染色檢測(cè)是對(duì)結(jié)核性腦膜炎的主要診斷方法；隨著診斷方法的增加，結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)也被應(yīng)用于臨床檢測(cè)當(dāng)中，成為結(jié)核性腦膜炎最權(quán)威的診斷方法[8]；近年來，結(jié)核分枝桿菌DNA檢測(cè)也逐漸應(yīng)用于臨床診斷當(dāng)中，并發(fā)展成為診斷金標(biāo)準(zhǔn)[9]。本研究對(duì)各種診斷方法進(jìn)行研究分析。

2.1 腦脊液涂片抗酸染色檢測(cè)

腦脊液涂片抗酸染色檢測(cè)結(jié)果為陽性則可以對(duì)判定患者為結(jié)核性腦膜炎。此種檢測(cè)方法最早由埃利希（F.Ehrlich）發(fā)明，他在1882年進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)此種檢測(cè)方法并將其應(yīng)用于臨床檢測(cè)當(dāng)中，但是診斷準(zhǔn)確性并不理想[10]。齊爾（Ziehl）對(duì)該種方法進(jìn)行改進(jìn)，其中齊爾-尼爾森（Ziehl-Neelsen）染色法和齊爾-加貝特（Ziehl-Gabbet）染色法是最具代表性的腦脊液涂片抗酸染色方法，臨床當(dāng)中多采用齊爾-尼爾森染色法對(duì)患者的結(jié)核分枝桿菌進(jìn)行檢測(cè)[11]。有研究對(duì)此中檢驗(yàn)方法進(jìn)行了研究分析，指出該種檢測(cè)方法具有局限性。齊爾-尼爾森染色法要求患者每毫升腦脊液中至少有5000～50 000個(gè)結(jié)核分枝桿菌[12]。但是大多數(shù)患者腦脊液中的結(jié)核桿菌數(shù)量并不能滿足檢測(cè)要求，因此其檢測(cè)準(zhǔn)確性不能有效保證。Thwaites對(duì)其檢測(cè)方法進(jìn)行改進(jìn)，采用腰穿抽取腦脊液的方法對(duì)患者進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)陽性率大大提升[13]。但是有研究指出該種檢測(cè)方法一次診出率水平很低，大多數(shù)患者要經(jīng)過幾次檢測(cè)才能做出準(zhǔn)確診斷，而多次腰穿會(huì)增加患者發(fā)生并發(fā)癥的風(fēng)險(xiǎn)，對(duì)患者的生命安全造成嚴(yán)重威脅?；谠摲N診斷方法診斷準(zhǔn)確性低、安全性不理想等幾方面考慮，很多學(xué)者提出對(duì)此種診斷方法進(jìn)行改進(jìn)，以提升其診斷準(zhǔn)確性，降低診斷本身對(duì)患者造成的身體損害[14]。

近年來隨著醫(yī)學(xué)診斷水平的不斷發(fā)展，有研究者發(fā)現(xiàn)在對(duì)患者的腦脊液進(jìn)行檢測(cè)前，使用Triton X-100處理液對(duì)其進(jìn)行處理后在進(jìn)行檢測(cè)[15]，能夠有效提升其檢測(cè)的準(zhǔn)確性，我國采用該種檢測(cè)方法后，結(jié)核分枝桿菌檢出率達(dá)到100%[16]。

2.2 結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)

結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)方式是目前檢測(cè)結(jié)核性腦膜炎分支桿菌應(yīng)用最多的一種方法，曾在臨床當(dāng)中長(zhǎng)期應(yīng)用，診斷價(jià)值較好[17]。結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)主要有液體培養(yǎng)法和固體培養(yǎng)法兩種方法。

固體培養(yǎng)法耗時(shí)長(zhǎng)，培養(yǎng)往往需要3周，培養(yǎng)后需要進(jìn)行敏感性試驗(yàn)，而試驗(yàn)的時(shí)間大約為4周，整個(gè)培養(yǎng)過程近兩個(gè)月[18]。采用此種方法進(jìn)行檢驗(yàn)，往往會(huì)延誤患者的病情診治時(shí)間，最終可能使患者錯(cuò)失最佳治療時(shí)間。因此該種方法不便于在臨床當(dāng)中推廣運(yùn)用。

液體培養(yǎng)法，通過在液體中分支桿菌進(jìn)行培養(yǎng)，分支桿菌的生長(zhǎng)速度快，且藥敏試驗(yàn)時(shí)間短，具有較高的臨床應(yīng)用價(jià)值[19]。此種方法在臨床當(dāng)中的應(yīng)用較多。以往臨床當(dāng)中多應(yīng)用L-J培養(yǎng)方法，現(xiàn)階段臨床當(dāng)中應(yīng)用較多的是BACTEC、MGIT960培養(yǎng)系統(tǒng)及MODS技術(shù)。

Baveja曾對(duì)BACTEC的臨床應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行研究部分析，研究發(fā)現(xiàn)此種培養(yǎng)方法在臨床中的應(yīng)用價(jià)值明顯高于PCR檢測(cè)和傳統(tǒng)的L-J培養(yǎng)方法[20]。

有研究指出MGIT960培養(yǎng)系統(tǒng)是應(yīng)用價(jià)值最高的一種檢驗(yàn)系統(tǒng)[21]。有研究曾對(duì)MGITTM 960快速培養(yǎng)系統(tǒng)在結(jié)核病診斷中的應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行系統(tǒng)研究，發(fā)現(xiàn)MGITTM 960快速培養(yǎng)系統(tǒng)檢測(cè)陽性率為57.2%，明顯高于傳統(tǒng)的L-J培養(yǎng)方法[12]。有研究指出MGIT960培養(yǎng)系統(tǒng)的臨床應(yīng)用價(jià)值明顯高于其他檢測(cè)系統(tǒng)[22]。

MODS技術(shù)是在液態(tài)培養(yǎng)的基礎(chǔ)上使用顯微鏡對(duì)藥物敏感型進(jìn)行檢測(cè)的方法，該種檢測(cè)方法的優(yōu)勢(shì)在于能夠有效降低報(bào)陽時(shí)間，一般8～14 d就可以完成檢測(cè)。

2.3 結(jié)核分枝桿菌DNA檢測(cè)

結(jié)核分枝桿菌DNA檢測(cè)是一種新型檢測(cè)技術(shù)。聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)（PCR）是對(duì)分支桿菌進(jìn)行DNA檢測(cè)的主要方法，該種檢測(cè)方法的特異性較好，可達(dá)到98%[23]。PCR的方法有很多，主要包括多重PCR技術(shù)、巢式PCR技術(shù)、環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)（LAMP）、利福平耐藥實(shí)時(shí)熒光定量核酸擴(kuò)增技術(shù)（Xpert MTB/RIF）幾種類型。每種檢測(cè)技術(shù)各有其優(yōu)勢(shì)，多重PCR技檢測(cè)成本低，檢測(cè)效率高，敏感性強(qiáng)；巢式PCR技術(shù)在常規(guī)PCR技術(shù)基礎(chǔ)上進(jìn)行改進(jìn)，提升了循環(huán)次數(shù)，因此其檢測(cè)敏感性也得到了極大的提升。有研究指出此種檢測(cè)方法的檢測(cè)敏感性可達(dá)到100%[24]。而且該種方法操作簡(jiǎn)單，檢測(cè)步驟少，避免了檢測(cè)過程中的交叉污染，能夠有效避免假陽性率。LAMP技術(shù)實(shí)現(xiàn)了常溫下對(duì)分支桿菌進(jìn)行檢測(cè)，且檢測(cè)的經(jīng)濟(jì)價(jià)值高，反應(yīng)時(shí)間短，其檢測(cè)效果明顯優(yōu)于多重PCR技術(shù)和巢式PCR技術(shù)。Xpert MTB/RIF技術(shù)是近年來應(yīng)用較多的一種檢測(cè)技術(shù)，有研究曾對(duì)其臨床應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行研究，以180例檢測(cè)者為研究對(duì)象進(jìn)行研究分析，對(duì)比Xpert MTB/RIF、T-SPOT·TB及BACTEC MGIT960檢測(cè)準(zhǔn)確性。研究發(fā)現(xiàn)Xpert MTB/RIF的診斷效果明顯優(yōu)于其他檢測(cè)方法。雖然該種檢測(cè)效果得到一致肯定，但是其檢測(cè)費(fèi)用較高，因此并不作為臨床檢測(cè)的首要選擇[25]。

關(guān)于結(jié)核性腦膜炎分支桿菌的檢測(cè)已經(jīng)成為醫(yī)學(xué)當(dāng)中關(guān)注的一個(gè)重點(diǎn)問題，提升分支桿菌的檢測(cè)準(zhǔn)確性能夠盡快確定患者的病情，并指導(dǎo)臨床醫(yī)生對(duì)患者盡快展開有效的治療，從而提升患者的臨床治療效果。不可否認(rèn)，近年來關(guān)于結(jié)核性腦膜炎分支桿菌的診斷技術(shù)不斷發(fā)展，已經(jīng)取得了突破性的進(jìn)展，但是現(xiàn)階段診斷準(zhǔn)確性仍不理想，有很多患者由于誤診、漏診錯(cuò)失最佳治療時(shí)機(jī)。因此關(guān)于結(jié)核性腦膜炎分支桿菌的檢測(cè)準(zhǔn)確性還有待于進(jìn)一步提升。相信在未來的研究發(fā)展中會(huì)有更行之有效的檢測(cè)方法應(yīng)用于臨床當(dāng)中。

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（收稿日期：2017-04-14）