呂永楠 李曉艷 陳晶晶 任瑋 劉歡

雌雄激素協(xié)同作用聯(lián)合KLF4發(fā)揮抗動脈粥樣硬化效應探究

呂永楠 李曉艷 陳晶晶 任瑋 劉歡

作者單位：430060 湖北省武漢市，武漢大學人民醫(yī)院心內科

目的 探討睪酮、雌二醇和KLF4與急性心肌梗死相關性，評估其對冠心病的臨床應用價值。方法 選擇2017年1～5月我院心內科住院急性心肌梗死男性患者162例為試驗組，134名健康男性為對照組。血清KLF4濃度采用酶聯(lián)免疫吸附法測定，血清雌、雄激素檢測采用化學發(fā)光免疫法測定。結果 對照組睪酮濃度高于試驗組［（450.05±14.42）ng/dl比（33.49±2.43）ng/dl，P＜0.01］；試驗組雌二醇較對照組明顯升高［（277.32±13.84）pg/ml比（37.68±1.29）pg/ml，P＜0.01］；試驗組 KLF4 濃度較對照組明顯升高［（38.53±5.61）ng/ml比（15.83±2.99）ng/ml，P＜0.01］。在 AMI相關性分析中，KLF4與睪酮呈負相關，KLF4 與雌二醇呈正相關（P＜0.05）。結論 雌、雄激素協(xié)同作用聯(lián)合KLF4對防治動脈粥樣梗化（AS）具有臨床應用價值，為冠心病防治提供新的治療思路。

急性心肌梗死； 睪酮； 雌二醇； KLF4

動脈粥樣硬化（atherosclerotic，AS）是一種多因素導致的慢性炎癥反應性疾病[1]。研究證實，炎癥在AS初始階段和進展階段發(fā)揮關鍵作用，貫穿于AS全過程，從內皮細胞的損傷到復合型病變的產(chǎn)生，大量炎性因子參與其中，對AS病理過程發(fā)揮了關鍵的作用[2]。同時，炎癥與斑塊的不穩(wěn)定性密切相關，易導致嚴重心血管事件發(fā)生，如急性冠脈綜合征、心源性猝死等，因此抑制炎癥是AS防治的關鍵環(huán)節(jié)。研究發(fā)現(xiàn)，核轉錄因子KLF4具有保護血管內皮細胞、抑制炎癥因子浸潤、減少AS斑塊形成和防止血栓形成的作用[3]。同時，研究已經(jīng)證實，性激素包括睪酮（testosterone）和雌二醇（estradiol）對AS中的炎癥反應具有不同程度的抑制作用?；谌梭w生理狀態(tài)，每個人都有雌、雄激素存在，但不同性別雌性激素比例有差異[4]。因此，本研究通過對急性心肌梗死（AMI）患者和健康人群雌、雄激素和KLF4濃度檢測，探討雌雄激素協(xié)同作用通過KLF4發(fā)揮抗動脈粥樣硬化效應的作用機制，為AS的防治提供新途徑，具有重要的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 根據(jù)冠心病診斷標準[5]，選擇2017年1～5月在武漢大學人民醫(yī)院心內科住院的162例男性AMI患者為試驗組；選取134名健康男性為對照組。所有試驗組患者均排除冠心病之外腦梗死、肺栓塞、靜脈血栓等血栓性疾病、感染性疾病、免疫性疾病、腫瘤、肝腎功能不全等疾病。

1.2 檢測指標與方法

1.2.1 血清KLF4檢測 研究對象均在禁食8 h后清晨采血，待標本血液凝固后分離血清，置入有蓋試管中-70℃貯存。檢測時從冰箱取出，待室溫溶解后，酶聯(lián)免疫吸附法測定KLF4濃度。

1.2.2 血清雌雄激素檢測 性激素睪酮和雌二醇利用德國Simenns Advia Centaur XP儀器，采用競爭性直接化學發(fā)光免疫測定技術檢測。

1.3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 19.0統(tǒng)計學軟件進行統(tǒng)計分析。計量資料均呈正態(tài)分布且方差齊，以±s表示，兩兩比較采用t檢驗；KLF4與睪酮、雌二醇相關性分析采用Pearson相關性分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 兩組雌、雄激素指標分析 對照組睪酮濃度明顯高于試驗組［（450.05±14.42）ng/dl比（33.49±2.43）ng/dl，P＜0.01］；試驗組雌二醇較對照組明顯升高［（277.32±13.84）pg/ml比（37.68±1.29）pg/ml，P＜0.01］。見表 1、圖 1。

2.2 兩組KLF4指標分析 試驗組KLF4濃度較對照組明顯升高［（38.53±5.61）ng/ml比（15.83±2.99）ng/ml，P＜0.01］，見表 2、圖 2。

表1 兩組睪酮和雌二醇濃度（±s）

表1 兩組睪酮和雌二醇濃度（±s）

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表2 對照組和試驗組KLF4濃度（±s）

表2 對照組和試驗組KLF4濃度（±s）

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圖1 對照組和試驗組血清睪酮和雌二醇濃度

圖2 對照組和試驗組血清KLF4濃度

2.3 試驗組KLF4與睪酮、雌二醇的相關性 試驗組KLF4與睪酮呈負相關，相關系數(shù)-0.197，P=0.003。試驗組KLF4與雌二醇呈正相關，相關系數(shù)0.151，P=0.033。

3 討論

研究證實，性別和年齡是冠心病獨立危險因子，提示性激素與冠心病的發(fā)生有密切關系[6]。雌雄激素比例失衡，導致免疫功能紊亂，上調炎癥因子表達，促進炎癥反應，并且與低密度脂蛋白膽固醇密切相關，低密度脂蛋白膽固醇是AS獨立危險因子，最終促使冠心病發(fā)病風險急劇升高[7]。既往研究證實，雌激素對心血管具有保護作用。但是雌激素替代治療相關臨床試驗薈萃研究提示，單純口服雌激素會增加患者凝血功能，增加靜脈血栓形成和腦卒中風險[8,9]。因此，單純給予患者雌激素替代治療會造成體內雌雄激素水平失衡。研究發(fā)現(xiàn)，雄激素為激素替代治療提供了新思路，睪酮可以有效降抑制炎癥因子IL-1、IL-6、TNF-α表達，并增強抗炎因子IL-4和IL-10表達，還可以提高機體纖維蛋白溶解系統(tǒng)作用和抗凝血酶Ⅲ的活性，起到抗血栓形成的作用，延緩AS病理進展，降低血栓形成和卒中風險[10]。

本研究發(fā)現(xiàn)，試驗組雌二醇水平較對照組明顯升高，睪酮激素水平下降，提示AMI患者在急性心血管事件中，雌雄激素比例失調，功能紊亂，促進炎癥事件發(fā)展，誘導不穩(wěn)定斑塊破裂和急性血栓形成。因此，給予AMI患者雌雄激素干預治療具有一定的臨床應用前景。

KLF4是Krüppel樣因子家族成員之一，屬鋅脂蛋白類轉錄因子，在血管內皮細胞中具有特異性表達[3]。研究發(fā)現(xiàn)，促炎因子刺激和剪切應力可誘導KLF4的表達[11]；KLF4過表達可上調eNOS和血栓調節(jié)蛋白[12]；KLF4缺失可增加 TNF-α誘導的VCAM-1和TF的表達，KLF4可抑制炎癥因子IL-1、IL-6等表達[13]。本研究中，試驗組患者KLF4濃度較對照組升高，提示AMI患者內皮細胞損傷，誘導炎癥因子過表達，促使KLF4表達進而抑制炎癥反應，發(fā)揮抗炎作用。

雌雄激素協(xié)同聯(lián)合KLF4發(fā)揮抗AS作用具有一定的可行性。試驗組相關性分析發(fā)現(xiàn)，KLF4與雌激素呈正相關，與睪酮呈負相關。糾正AMI患者雌雄激素功能紊亂，聯(lián)合KLF4共同發(fā)揮抗AS作用，有利于保護血管內皮細胞，防止炎癥反應進展，具有一定的臨床應用價值，為冠心病防治提供新的治療思路。

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The synergistic effect of estradiol and testosterone joint KLF4 play against anti-atherosclerotic effect

Lü Yong-nan，LI Xiao-yan，CHEN Jing-jing，et al.Department of Cardiology，Renmin Hospital of Wuhan University，Wuhan 430060，China

ObjectiveThis study focused on the relationship between testosterone，estradiol，KLF4 and acute myocardial infarction （AMI）to investigate the value of clinical application in coronary atherosclerotic heart disease（CHD）.MethodsWe enrolled 162 AMI male patients who admitted to the Department of Cardiology at Renmin Hospital of Wuhan University between January 2017 and May 2017 into the experimental group，and enrolled 134 healthy men into the control group.The enzyme-linked immunosorbent assays （ELISAs）were used to measure the serum KLF4 level.Testosterone and estradiol were assessed through a competitive immunoassay using direct chemiluminescent technology.ResultsThe serum levels of KLF4 and estradiol were higher in the experimental group than in the control group.KLF4 （38.53±5.61）ng/ml vs （15.83±2.99）ng/ml，estradiol （277.32±13.84）pg/ml vs （37.68±1.29）pg/ml.The serum levels of testosterone was lower in the experimental group than in the control group（450.05±14.42）ng/dl vs（33.49± 2.43）ng/dl.KLF4 positively correlated with the level of estradiol，which negative correlated with the level of testosterone（P＜0.05）.ConclusionThe synergistic effect of estradiol and testosterone jointed KLF4 plays anti-atherosclerotic effect，and had very important clinical value.

Acute myocardial infarction； Testosterone； Estradiol； KLF4

LI Xiao-yan，E-mail：xy.li@whu.edu.cn

國家自然科學基金（項目編號：81170307）

李曉艷，E-mail：xy.li@whu.edu.cn

10.3969/j.issn.1672－5301.2017.10.006

R542.2+2

A

1672-5301（2017）10-0886-03

2017-06-11）