于宏亮，劉峰，王建瑞

(駐馬店市中醫(yī)院，1、檢驗(yàn)科；2、病理科，河南 駐馬店 463000)

血清ALT、AST及HBV-DNA水平聯(lián)合檢測在慢性乙型肝炎患者診斷中的應(yīng)用及相關(guān)生物學(xué)行為的評價

于宏亮1，劉峰1，王建瑞2

(駐馬店市中醫(yī)院，1、檢驗(yàn)科；2、病理科，河南 駐馬店 463000)

目的 探討血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶（GGT）及乙肝病毒DNA（HBV-DNA）水平聯(lián)合檢測在慢性乙型肝炎患者診斷中的應(yīng)用價值及相關(guān)生物學(xué)行為。方法 選取2015年12月～2016年12月駐馬店市中醫(yī)院300例慢性乙型肝炎患者作為觀察組、同期102例健康體檢者作為對照組，檢測比較兩組血清ALT、AST、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶（GGT）及HBV-DNA水平、觀察組不同病情程度患者（輕度組、中度組、重度組）血清ALT、AST、GGT及HBV-DNA水平、觀察組不同組織炎癥活動度分級患者（G1級組、G2級組、G3級組、G4級組）血清ALT、AST、GGT水平。結(jié)果 觀察組血清ALT、AST、GGT及HBV-DNA水平高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；重度組血清ALT、AST、GGT及HBV-DNA水平高于中度組，且中度組上述指標(biāo)水平高于輕度組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；G4級組血清ALT、AST、GGT水平高于G3級組，且G3級組高于G2級組，G2級組高于G1級組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論 血清ALT、AST、GGT及HBV-DNA水平與慢性乙型肝炎發(fā)生、發(fā)展間密切相關(guān)，采用上述指標(biāo)聯(lián)合檢測可為慢性乙型肝炎早期診斷與病變程度、炎癥程度評估提供可靠依據(jù)。

慢性乙型肝炎；ALT；AST；GGT；HBV-DNA；聯(lián)合檢測

慢性乙型肝炎為一種臨床常見多發(fā)肝病，資料報道，2016年我國有9300萬人左右慢性乙肝病毒（HBV）攜帶者，且其中約有2000萬人罹患慢性乙型肝炎[1]。同時HBV長期感染及復(fù)制，可導(dǎo)致肝臟持續(xù)受損，造成慢性乙型肝炎進(jìn)展為肝硬化、肝癌等，對患者生命安全造成嚴(yán)重影響[2，3]。但該病早期較隱匿，無明顯臨床表現(xiàn)，易被臨床醫(yī)師和患者忽視，延誤治療時機(jī)。近年來，AST、ALT、GGT等肝功能酶學(xué)指標(biāo)逐漸被推廣應(yīng)用到各種肝臟疾病診斷中，成為肝病篩查的重要項(xiàng)目，且HBV為病毒復(fù)制主體，通過對血清HBV-DNA水平進(jìn)行檢測可直接、靈敏地反映HBV感染情況[4]。本研究選擇300例慢性乙型肝炎患者及同期102例健康體檢者，采取血清ALT、AST、GGT及HBV-DNA水平檢測，旨在分析上述指標(biāo)聯(lián)合檢測在慢性乙型肝炎患者診斷中的應(yīng)用價值及相關(guān)生物學(xué)行為。

1 資料及方法

1.1 一般資料 選取2015年12月至2016年12月駐馬店市中醫(yī)院300例慢性乙型肝炎患者作為觀察組、同期102例健康體檢者作為對照組，觀察組男186例，女114例，年齡20～75歲，平均年齡（41.95±7.63）歲，依據(jù)臨床癥狀、體征以及實(shí)驗(yàn)室七項(xiàng)血清學(xué)指標(biāo)將慢性乙型肝炎進(jìn)行臨床分度：輕度99例，中度108例，重度93例，根據(jù)活體肝穿刺病理標(biāo)本檢查結(jié)果進(jìn)行肝組織炎癥活動度分級：G1級65例、G2級84例、G3級114例、G4級37例；對照組男66例，女36例，年齡22～74歲，平均年齡（42.07±7.96）歲。兩組基線資料差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。本研究通過我院倫理委員會審核同意。

1.2 納入、排除標(biāo)準(zhǔn)⑴納入標(biāo)準(zhǔn)：觀察組均符合《慢性乙型肝炎防治指南》（2015年版）慢性乙型肝炎臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]；對照組均無HBV感染、肝臟疾病、傳染性疾??；知情同意本研究；⑵排除標(biāo)準(zhǔn)：合并肝癌、肝炎雙重感染、酒精或非酒精性脂肪肝、藥物性肝病者；存在嚴(yán)重心血管系統(tǒng)疾病及精神系統(tǒng)疾病者。

1.3 方法抽取兩組5ml空腹肘靜脈血，離心分離，取上層血清，采用全自動生化分析儀（日立，7180）測定血清 ALT、AST、GGT 水平，試劑盒購于廈門英科新創(chuàng)科技有限公司；應(yīng)用實(shí)時熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)儀 （西安天隆科技有限公司，TL988）以實(shí)時熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法（PCR）測定HBV DNA拷貝數(shù)，試劑盒購自深圳匹基生物工程股份有限公司，嚴(yán)格依照儀器及試劑盒使用說明書進(jìn)行操作。

1.4 觀察指標(biāo)⑴檢測比較兩組血清ALT、AST、GGT及 HBV-DNA水平，ALT臨界值為 40U/L，AST臨界值為40U/L，GGT臨界值為50U/L，HBVDNA臨界值為103copies/m l，當(dāng)超出臨界值則判斷為檢測陽性。⑵對比觀察組不同病情程度患者（輕度組、中度組、重度組）血清ALT、AST、GGT及HBV-DNA水平。⑶對比觀察組不同組織炎癥活動度分級患者（G1級組、G2級組、G3級組、G4級組）血清 ALT、AST、GGT 水平。

1.5 統(tǒng)計學(xué)分析通過SPSS 21.0分析數(shù)據(jù)，計量資料符合正態(tài)分布采?。▁±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較以LSD-t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 比較兩組血清 ALT、AST、GGT及 HBV-DNA水平觀察組血清 ALT、AST、GGT及 HBV-DNA水平高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

2.2 比較觀察組不同病情程度患者血清ALT、AST、GGT及HBV-DNA水平 經(jīng)單因素方差分析可知，3組血清 ALT、AST、GGT 及 HBV-DNA 水平相比，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），兩兩比較，重度組血清ALT、AST、GGT及 HBV-DNA水平高于中度組，且中度組上述指標(biāo)水平高于輕度組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。 見表 2。

2.3 比較觀察組不同組織炎癥活動度分級患者血清ALT、AST、GGT水平經(jīng)單因素方差分析可知，4組血清ALT、AST、GGT水平相比，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），兩兩比較，上述指標(biāo)水平G4級組高于G3級組，G3級組高于G2級組，G2級組高于G1級組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表3。

表1 比較兩組血清ALT、AST、GGT及HBV-DNA水平（x±s）

表2 比較觀察組不同病情程度患者血清ALT、AST、GGT及HBV-DNA水平（x±s）

表3 比較觀察組不同組織炎癥活動度分級患者血清 ALT、AST、GGT 水平(x±s，U/L)

3 討論

慢性乙型肝炎屬內(nèi)科多發(fā)傳染性疾病，具有危害性大、發(fā)病率高、傳染性強(qiáng)等特點(diǎn)，臨床表現(xiàn)為肝臟與脾臟腫大、纖維化等，在HBV長期感染和復(fù)制情況下可導(dǎo)致肝臟炎癥持續(xù)發(fā)展，促使疾病惡化為肝硬化及肝癌等[6，7]。給予患者早期診斷以進(jìn)行有效治療對提高療效、改善預(yù)后極為重要。但慢性乙型肝炎起病較為隱匿，臨床癥狀不明顯，且采用肝組織活檢存在一定創(chuàng)傷性，檢查風(fēng)險較高，同時肝內(nèi)肝炎病灶分布均勻性欠佳，而肝組織活檢僅占據(jù)全部肝臟1/20萬～1/5萬，不能有效反映肝臟整體病變情況[8，9]。故臨床急需尋找一種更為安全、有效、簡潔的慢性乙型肝炎診斷方法。

侯勇等[10]研究指出，肝臟病毒對肝臟造成損害時可引起血清學(xué)生化指標(biāo)變化，對慢性乙型肝炎患者血清生化指標(biāo)進(jìn)行檢查，可有效反映其肝臟損傷及炎癥情況，指導(dǎo)臨床治療。AST、ALT、GGT等血清學(xué)肝功能指標(biāo)為反映肝功能損傷較為敏感的檢測項(xiàng)目，AST主要存在于肝臟、腎臟、腦、骨骼肌、心臟中，且20%處于胞漿內(nèi)，80%處于線粒體內(nèi)，其高水平可提示存在肝細(xì)胞損傷，且表達(dá)水平與肝病病變程度呈正相關(guān)，但其在中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病、肌肉損傷、心力衰竭、心肌梗死等非肝性疾病中亦會出現(xiàn)一定程度升高，檢查不具有特異性[11，12]；ALT僅存在于肝細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)，對肝臟疾病特異性較高，當(dāng)肝細(xì)胞出現(xiàn)變性時，細(xì)胞膜通透性明顯提高，使其由細(xì)胞內(nèi)逸出，并侵入血液循環(huán)，致使血清ALT水平升高[13]；GGT主要由肝細(xì)胞線粒體分泌，局限于肝臟內(nèi)膽管上皮和細(xì)胞質(zhì)中，通過膽管排泄，在健康人群血清中水平較低，而當(dāng)肝細(xì)胞與其周圍組織遭受炎癥刺激時，可致使肝細(xì)胞破壞與細(xì)胞膜通透性提高，進(jìn)而導(dǎo)致血清GGT水平升高[14]。本研究結(jié)果顯示，觀察組血清ALT、AST、GGT水平高于對照組，重度組血清 ALT、AST、GGT水平高于中度組，中度組上述指標(biāo)水平高于輕度組，且上述指標(biāo)水平G4級組高于G3級組，G3級組高于G2級組，G2級組高于G1級組（P＜0.05）。 充分說明血清 ALT、AST、GGT 水平與慢性乙型肝炎發(fā)生、發(fā)展間具有密切關(guān)系，為反映慢性乙型肝炎病變程度、炎癥分級的靈敏指標(biāo)。

HBV為嗜肝脫氧核糖核酸病毒，其核心部分包括核心抗原、DNA聚合酶、環(huán)狀雙股DNA，屬病毒復(fù)制主體，通過對血清HBV-DNA水平進(jìn)行檢測可最直接、靈敏地反映HBV感染狀況。早期臨床病例分析常認(rèn)為慢性乙型肝炎HBV-DNA水平和肝損傷程度無明顯相關(guān)，但近年來研究表明，血液HBV-DNA水平較高者病情加重危險程度更高，且其高水平表達(dá)與肝硬化、肝細(xì)胞癌等密切相關(guān)，通過降低血清HBV-DNA水平，可明顯緩解肝臟組織學(xué)病變，改善患者預(yù)后[15]。本研究結(jié)果顯示，觀察組血清HBV-DNA水平高于對照組，重度組血清HBV-DNA水平高于中度組，且中度組上述指標(biāo)水平高于輕度組（P＜0.05）。表明HBV-DNA為早期診斷及反映患者病變程度的敏感指標(biāo)之一。

綜上所述，血清 ALT、AST、GGT及 HBV-DNA水平與慢性乙型肝炎發(fā)生、發(fā)展間具有密切關(guān)系，采用上述聯(lián)合檢測可為慢性乙型肝炎早期診斷與病變程度、炎癥程度評估提供依據(jù)，指導(dǎo)臨床治療。

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R512.6+2，R446.11+2，R446.62，Q523

A

1674-1129(2017)05-0760-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2017.05.045

2017-05-09；

2017-08-08)