盧慶文，董婭，劉紅霞

(南陽市中心醫(yī)院，河南 南陽473009)

聯(lián)合檢測血清HCV-RNA、HCV-cAg與HCV-Ab對丙型肝炎的診斷價(jià)值分析

盧慶文，董婭，劉紅霞

(南陽市中心醫(yī)院，河南 南陽473009)

目的 探討聯(lián)合檢測血清HCV-RNA、HCV-cAg與HCV-Ab對丙型肝炎的臨床診斷價(jià)值。方法 收集本院2015年3月至2016年4月門診及住院部3000例受檢者的血清標(biāo)本，均采用ELISA方法檢測血清HCV-cAg與HCV-Ab，采用PCR 技術(shù)對 HCV-cAg（+）/HCV-Ab(+)、HCV-cAg（-）/HCV-Ab(+)與 HCV-cAg（+）/HCV-Ab(-)血清標(biāo)本進(jìn)行血清 HCV-RNA檢測。以檢測出的血清HCV-RNA的陽陰性分為HCV-RNA陽性組和HCV-RNA陰性組，并計(jì)算兩組血清標(biāo)本的靈敏度、特異性、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值與Youden指數(shù)，通過卡方檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)分析兩組結(jié)果的相關(guān)性。結(jié)果 在對3000例患者進(jìn)行血清HCV-cAg 與 HCV-Ab 聯(lián)合檢測的血清標(biāo)本中，共檢測出 HCV-cAg（+）/HCV-Ab(+)、HCV-cAg（-）/HCV-Ab(+)與 HCV-cAg（+）/HCV-Ab(-)血清標(biāo)本有 60例，血清 HCV-RNA（+）有 50例，血清 HCV-RNA（-）有 10例。 算得血清 HCV-cAg的靈敏度為20.0%，血清HCV-Ab的靈敏度為95.3%，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；而血清HCV-cAg的陽性預(yù)測值為93.4%，血清HCV-Ab的陽性預(yù)測值為85.7%，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），結(jié)果表明進(jìn)行血清HCV-cAg與HCV-Ab聯(lián)合檢測可以提高血清HCV-RNA的檢出率。結(jié)論 血清HCV-cAg與HCV-Ab的聯(lián)合檢測可以互補(bǔ)兩者的缺點(diǎn)，提高血清HCV-RNA的臨床檢出率，有效降低丙型肝炎窗口期的漏檢率，對于丙型肝炎患者的早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷、早期治療有著重要意義，此聯(lián)合檢測值得臨床廣泛推廣。

丙型肝炎病毒；丙肝病毒核心抗原；丙肝病毒抗體；靈敏度；陽性性檢出率

丙型肝炎（Hepatitis C，HC），簡稱丙肝，是由丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus，HCV)感染引起的一種傳染性疾病，主要通過輸血、針頭注射和密切接觸等方式傳播，在中國人群中，其感染率高達(dá)3.2%[1]。此疾病起病隱匿，大多數(shù)病人無臨床癥狀，部分病人可發(fā)展為肝硬化、肝癌等，對病人健康安全造成極大威脅[2]。HCV是單股正鏈RNA病毒，呈球形，在核衣殼外包繞含脂質(zhì)的囊膜，囊膜上有刺突[3]。臨床上主要通過對血清丙型肝炎RNA(Hepatitis CRNA，HCV-RNA）的檢出來來早期診斷患者是否感染HCV，并能采取有效治療早期阻斷HCV的傳播[4]。本研究對3000例本院門診及住院部血清標(biāo)本進(jìn)行聯(lián)合檢測丙型肝炎病毒核心抗原（Virus core antigen of hepatitis C virus，HCV-cAg）與丙型肝炎抗體(antibody of hepatitis C virus，HCV-Ab），對單項(xiàng)陽性或雙項(xiàng)陽性者再采用PCR技術(shù)進(jìn)行HCV-RNA檢測，探討聯(lián)合檢測血清HCV-cAg與HCV-Ab對血清HCV-RNA檢出率的臨床價(jià)值，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 研究對象納入標(biāo)準(zhǔn)：年齡≧18歲；要進(jìn)行丙型肝炎篩查者；愿意參加本次研究者。排除標(biāo)準(zhǔn)：符合納入標(biāo)準(zhǔn)者；無其他系統(tǒng)性致命疾?。徊辉敢鈪⒓颖敬窝芯空?。收集本院2015年3月至2016年4月門診及住院部3000例受檢者的血清標(biāo)本，其中男性受檢者為1408例，年齡為21～56歲，平均年齡為30.3±4.3歲，女性受檢者為1592例，年齡為23-55歲，平均年齡為34.3±5.3歲。

1.2 方法采用上海博谷生物科技有限公司的96T/48T規(guī)格的HCV-cAg ELISA試劑盒和Thermo MK3酶標(biāo)儀對3000例受檢者血清進(jìn)行HCV-cAg檢測，對HCV-cAg（+）陽性者進(jìn)行二次復(fù)檢；采用上海博谷生物科技有限公司的96T/48T規(guī)格的HCV-Ab ELISA試劑盒和Thermo MK3酶標(biāo)儀對3000例受檢者血清進(jìn)行HCV-Ab檢測，對HCVAb（+）陽性者進(jìn)行二次復(fù)檢；采用北京康源泰博生物科技有限公司的熒光定量PCR儀（Exicycler TM96）對3000例受檢者血清進(jìn)行HCV-RNA測量，拷貝數(shù)＞1.0×103為HCV-RNA陽性。聯(lián)合檢測3000例受檢者血清HCV-cAg與HCV-Ab后，在單項(xiàng)陽性或雙項(xiàng)陽性的基礎(chǔ)上再進(jìn)行PCR檢測，以血清HCV-RNA的陽陰性分為HCV-RNA陽性組和HCV-RNA陰性組?；颊呔谀挲g、性別和病史等基本資料方面上無明顯差別統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＞0.05）。

1.3 評價(jià)指標(biāo)分析比較兩組的HCV-RNA檢測率，通過靈敏度、特異性、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值與Youden指數(shù)這些指標(biāo)來比較兩組的HCV-RNA檢出率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理經(jīng)雙人錄入數(shù)據(jù)后，采用SAS 9.0統(tǒng)計(jì)軟件對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。以百分率或例來表示計(jì)數(shù)資料，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示計(jì)量資料，通過卡方檢驗(yàn)來比較兩組率，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清 HCV-RNA、HCV-cAg與 HCV-Ab的測定比較在3000例受檢者的血清標(biāo)本中，HCV-cAg陽性有22例，陰性38例，HCV-Ab陽性有57例，陰性3例，HCV-RNA陽性有50例，陰性10例，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)果表明聯(lián)合血清HCV-cAg與HCV-Ab對血清HCV-RNA的陽性檢出率有一定相關(guān)性，兩者的聯(lián)合檢測可以提高血清HCV-RNA的陽性檢出率，結(jié)果詳見表1。

表1 血清HCV-RNA、HCV-cAg與HCV-Ab測定結(jié)果關(guān)系比較（例）

2.2 血清HCV-cAg與HCV-Ab聯(lián)合測定的比較在3000例受檢者的血清標(biāo)本中，HCV-RNA（+）與HCV-cAg（+）者有 20 例，HCV-RNA（+）與 HCVAb（+）者共有 52 例，HCV-RNA（-）與 HCV-cAg（-）者有 4 例，HCV-RNA（-）與 HCV-Ab（-）者有 1例，兩組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），結(jié)果表明兩者的聯(lián)合測定對血清HCV-RNA的陽性檢出率有一定相關(guān)性，能提高血清HCV-RNA的陽性檢出率，結(jié)果詳見表2。

2.3 比較血清HCV-cAg與HCV-Ab聯(lián)合測定結(jié)果分析其對HCV-RNA檢出率的診斷價(jià)值，在3000例受檢者的血清標(biāo)本中，HCV-cAg靈敏度20.0%，HCV-Ab靈敏度95.3%，HCV-cAg的陽性預(yù)測值為93.4%，HCV-Ab的陽性預(yù)測值為85.7%，HCV-cAg的Youden指數(shù)為 72.7%，HCVAb的Youden指數(shù)為98.1%，兩者具有差異統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=31.58，P＜0.05），結(jié)果表明兩者的聯(lián)合測定可以提高對HCV-RNA的靈敏度、特異性、陽性預(yù)測值和Youden指數(shù)，兩者的檢測可以相互補(bǔ)充，即能提高HCV的早期檢出率。

表2 血清HCV-cAg與HCV-Ab聯(lián)合測定結(jié)果關(guān)系比較（例）

表3 血清HCV-cAg與HCV-Ab聯(lián)合測定結(jié)果對HCV的診斷價(jià)值關(guān)系比較（%）

3 討論

丙肝是一種起病隱匿的傳染性疾病，早期不易發(fā)現(xiàn)，臨床上無明顯癥狀，但可逐步發(fā)展為肝硬化、肝癌[5]。血清HCV-RNA的檢測是感染HCV的診斷依據(jù)，臨床上常常以檢測血清HCV-RNA與HCV-Ab的陰陽性來判斷是否感染HCV[6]。有研究[7]發(fā)現(xiàn)，臨床上采用ELISA方法檢測血清HCVAb，靈敏度高達(dá)94.0%，特異性高達(dá)99.9%，且技術(shù)要求不高，價(jià)格便宜，易于實(shí)行，但抗體出現(xiàn)較晚，在感染HCV的早期，機(jī)體尚未產(chǎn)生HCV-Ab，所以血清HCV-Ab陰性不一定說明患者沒有感染HCV，早期感染有可能檢測不到HCV-Ab陽性，或者患者長期使用免疫抑制劑也會導(dǎo)致血清HCVAb檢測陰性，而且檢測到血清HCV-Ab陽性也不能區(qū)別是現(xiàn)癥感染或既往感染[8]。雖然檢測血清HCV-RNA陽性可診斷HCV感染，但其實(shí)驗(yàn)技術(shù)要求高、設(shè)備昂貴、影響因素多，最重要的是窗口期短，大約為14d，臨床上作為常規(guī)檢測也不實(shí)際[9]。兩者的臨床檢測尚有一定的局限性，所以本次研究主要探討聯(lián)合檢測血清HCV-cAg與HCVAb在提高感染HCV診斷率的應(yīng)用價(jià)值。

近年來有文獻(xiàn)[10，11]報(bào)道表明，血清 HCV-cAg與HCV-RNA同時(shí)出現(xiàn)，其檢測陽性表明HCV的早期感染，臨床上采用ELISA法檢測，技術(shù)要求不高，簡便易行，不需要添加特殊設(shè)備，在實(shí)驗(yàn)室易于進(jìn)行。

在本次研究的3000例患者進(jìn)行HCV-cAg與HCV-Ab聯(lián)合檢測的血清標(biāo)本中，共檢測出HCV-cAg（+）/HCV-Ab(+)、HCV-cAg（-）/HCV-Ab(+)與HCV-cAg（+）/HCV-Ab(-)血清標(biāo)本 60 例，血清HCV-RNA（+）有 50 例，血清 HCV-RNA（-）有 10例。HCV-cAg陽性有22例，陰性38例，HCV-Ab陽性有57例，陰性3例，血清HCV-cAg的陽性預(yù)測值為93.4%，說明其可作為早期感染HCV的診斷指標(biāo)。其中，發(fā)現(xiàn)在血清HCV-cAg陽性的標(biāo)本中，有3例血清HCV-Ab陰性，但在3例血清HCV-Ab的基礎(chǔ)上再進(jìn)行PCR檢測得有2例HCV-RNA陽性，溫先勇[12]等人指出這可能是患者在早期感染HCV時(shí)，機(jī)體尚未出現(xiàn)HCV-cAg，所以檢測到血清HCV-cAg為陰性。但在HCV-RNA陽性的結(jié)果中，發(fā)現(xiàn)有2例HCV-cAg陽性者，這說明血清HCV-cAg陽性與HCV-RNA陽性不是完全一致，吳大先[13]等人指出這有可能是因?yàn)镋LISA檢測試劑盒的原因?qū)е录訇栃缘慕Y(jié)果，或者在長時(shí)間下HCV-RNA發(fā)生了降解而檢測出HCV-RNA陰性中。研究還發(fā)現(xiàn)，在3000例受檢者的血清標(biāo)本中，HCV-cAg靈敏度20.0%，HCV-Ab靈敏度95.3%，HCV-cAg的陽性預(yù)測值為93.4%，HCV-Ab的陽性預(yù)測值為 85.7%，HCV-cAg的Youden指數(shù)為72.7%，HCV-Ab的Youden指數(shù)為98.1%，這說明聯(lián)合檢測可以提高兩者的靈敏度，陽性預(yù)測值，Youden指數(shù)，從而可以大大提高HCV的檢出率。但實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)在50例血清HCV-RNA陽性的標(biāo)本中，有血清HCV-cAg的陽性率僅為40%，與文獻(xiàn)[14]報(bào)道一致。楊清梅[15]等人認(rèn)為其原因可能是：由于標(biāo)本的血清HCV-cAg深度較低，未達(dá)到酶學(xué)檢測下限或標(biāo)本中血清HCV-cAg和用于核心抗原檢測的單克隆抗體競爭結(jié)合抗原而造成血清HCV-cAg假陰性；本研究所用的血清HCV-cAg檢測試劑盒主要檢測的是血清中游離的血清HCV-cAg，而不是總血清HCV-cAg，因而結(jié)合的HCV-cAg未被檢測出來[16]。

綜上所述，HCV-cAg與HCV-Ab的聯(lián)合檢測可以互補(bǔ)兩者的不足，提高血清HCV-RNA的臨床檢出率，有效降低丙型肝炎窗口期的漏檢率，對于丙型肝炎患者的早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷、早期治療有著重要意義，此聯(lián)合檢測值得臨床廣泛推廣。

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R512.6+3，R446.62，Q522

A

1674-1129(2017)05-0752-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2017.05.042

2017-04-18；

2017-08-06)