史酉川，鄭云朵， 李 昂， 陳寶江

（河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，河北保定071001）

啤酒酵母對生長獺兔免疫性能及抗氧化能力的影響

史酉川，鄭云朵， 李 昂， 陳寶江*

（河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，河北保定071001）

為探討啤酒酵母對生長獺兔免疫性能及抗氧化能力的影響，試驗(yàn)選用60日齡左右，體重相近的生長獺兔80只，隨機(jī)分成4個(gè)組，每組5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)4只。對照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)1，2，3組分別飼喂添加5、10、15 kg/t啤酒酵母的試驗(yàn)日糧。試驗(yàn)期28 d。結(jié)果表明：啤酒酵母對獺兔的免疫器官發(fā)育有促進(jìn)作用，并且可提高其免疫力和抗氧化能力，與對照組相比，試驗(yàn)組的超氧化物歧化酶（SOD）活性提高7.14%～21.43%（P＜0.01）；總抗氧化能力提高84.62%～147.69%（P＜ 0.01）。綜合分析，啤酒酵母在獺兔日糧中的適宜添加量為10 kg/t。

生長獺兔；啤酒酵母；免疫性能；抗氧化力

啤酒酵母是啤酒工業(yè)的副產(chǎn)物，主要是由啤酒釀造后沉淀殘?jiān)稍锒?。在啤酒的制作過程當(dāng)中，每制造1000 t啤酒，就會有2～3 t的酵母生成，將啤酒酵母充分而有效的利用，既能夠緩解環(huán)境污染帶來的危害，又能節(jié)約糧食、降低成本，并為畜牧業(yè)的發(fā)展提供飼料保證，對于實(shí)踐生產(chǎn)的應(yīng)用有著重要意義。

啤酒酵母是真菌類，酵母菌屬，是單細(xì)胞的微生物，其干物質(zhì)中蛋白質(zhì)含量為50%左右，含有包括所有必需氨基酸在內(nèi)的19種氨基酸，是優(yōu)良的蛋白質(zhì)來源，在其存貯過程中會因?yàn)樽匀芏a(chǎn)生大量的小肽，其中功能性的小肽具有增加機(jī)體免疫能力、改善機(jī)體生理功能的作用；啤酒酵母細(xì)胞壁中含有30%多糖物質(zhì)，具有很強(qiáng)的抗原激活特性，是一種非特異性的免疫增強(qiáng)劑，對于多種動物都具有增強(qiáng)免疫能力的作用（李春松等，2012）；酵母細(xì)胞壁可以在不影響其他飼料成分的同時(shí)起到清除毒素的作用（沈波等，2014）；此外還富含生長激素、B族維生素、輔酶A、輔酶I、礦物質(zhì)及未知生長因子等（沈劍峰等，2001）。試驗(yàn)研究表明，啤酒酵母可以增強(qiáng)動物的免疫功能，提高動物的抗病能力，改善動物的腸道機(jī)能，并且已經(jīng)在畜禽及部分水產(chǎn)動物的研究中獲得了一定結(jié)果（胡瑛，2007）。但是啤酒酵母在獺兔生產(chǎn)中應(yīng)用的研究報(bào)道較少，缺乏生產(chǎn)應(yīng)用和理論機(jī)制方面的研究，限制了其在獺兔生產(chǎn)中的應(yīng)用。

本試驗(yàn)通過在獺兔的日糧中添加不同量的啤酒酵母，探討其對生長獺兔免疫性能以及抗氧化能力的影響，為研究啤酒酵母的作用機(jī)理以及其在獺兔日糧中的合理應(yīng)用提供指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 啤酒酵母由河北康源潤生生物有限公司提供，蛋白質(zhì)含量為45%，多糖含量大于25%。

1.2 試驗(yàn)動物及飼養(yǎng)管理 選用60日齡左右、體重近似的健康獺兔80只，公母各半，隨機(jī)分成4個(gè)組，每組5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)4只獺兔。試驗(yàn)預(yù)飼期7 d，正式期21 d。試驗(yàn)兔入舍前，將兔籠、用具及兔舍徹底清潔并消毒。試驗(yàn)獺兔單籠飼養(yǎng)，專人負(fù)責(zé)管理，每天早晨8點(diǎn)和晚上6點(diǎn)各飼喂1次，飼喂方案見表1，飼喂量掌握在留有剩余，自由采食、飲水；維持兔舍的潔凈、干燥，保持自然透風(fēng)和光照，并實(shí)時(shí)處理糞尿及其他污物。

表1 飼喂方案

1.3 試驗(yàn)日糧 基礎(chǔ)日糧參考谷子林 （1998）推薦的我國獺兔飼料營養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行配制，其組成及營養(yǎng)成分如表2。

表2 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平

1.4 試驗(yàn)樣品的采集 試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天進(jìn)行樣品采集，以重復(fù)為單位，隨機(jī)各取1只空腹稱重，然后真空心臟采血，每只獺兔采血10 mL，其中5 mL用于全血測定，另外5 mL離心制備血清樣品，用于血清抗體含量以及相關(guān)抗氧化指標(biāo)的測定。

1.5 測定指標(biāo)與方法

1.5.1 免疫器官指數(shù) 試驗(yàn)獺兔采血后，頸椎錯(cuò)位法屠宰，分別摘取脾、胸腺等免疫器官，稱重并記錄數(shù)據(jù)，以備免疫器官指數(shù)的計(jì)算。

免疫器官指數(shù)/（g/kg）=免疫器官重量/活體重量。

1.5.2 血液指標(biāo) 全血中白細(xì)胞（WBC）、紅細(xì)胞（RBC）、淋巴細(xì)胞（Lym）以及血紅蛋白（HGB）的含量均使用邁瑞的BC-5000 vet血液分析儀進(jìn)行測定。

1.5.3 血清抗體指標(biāo) 血清中免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）以及免疫球蛋白A（I-gA）的含量測定均采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）試劑盒法。所采用的試劑盒購自北京華悅昌生物科技有限公司。

1.5.4 抗氧化指標(biāo) 血清中丙二醛（MDA）含量、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）和超氧化物歧化酶（SOD）的活性以及總抗氧化能力（TAOC）測定，均采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）試劑盒法。所采用的試劑盒購自北京華悅昌生物科技有限公司。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)使用SPSS18.0軟件統(tǒng)計(jì)程序進(jìn)行分析處理，并用Duncan’s多重比較和LSD比較進(jìn)行顯著性分析，試驗(yàn)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 啤酒酵母對生長獺兔免疫器官的影響 由表3可知，日糧中添加啤酒酵母對獺兔的脾發(fā)育指數(shù)沒有顯著影響（P＞0.05）。與對照組相比，試驗(yàn)1、3組胸腺免疫指數(shù)分別提高了 23.63%、30.22%，差異極顯著（P ＜ 0.01）。

表3 啤酒酵母對生長獺兔免疫器官的影響g/kg

2.2 啤酒酵母對生長獺兔血液相關(guān)指標(biāo)的影響由表4可知，日糧中添加啤酒酵母對獺兔血液中淋巴細(xì)胞沒有顯著影響 （P＞0.05）。與對照組相比較，試驗(yàn)3組白細(xì)胞數(shù)增加49.70%（P＜0.05），紅細(xì)胞數(shù)增加10.81%（P＞0.05），淋巴細(xì)胞數(shù)增加40.83%（P＞0.05）；試驗(yàn)1、3組血紅蛋白含量分別較對照組提高了1.12%、12.35%，但差異不顯著（P ＞ 0.05）。

表4 啤酒酵母對生長獺兔血液相關(guān)指標(biāo)的影響

2.3 啤酒酵母對生長獺兔血清抗體水平的影響由表5可知，日糧中添加啤酒酵母可以提高獺兔血清抗體的含量，與對照組相比較，試驗(yàn)1、2、3組IgG分別提高了 16.56%、26.69%、29.75%（P＞0.05）；試驗(yàn) 1、2組 IgM分別提高了 13.28%、2.86%（P＞0.05）；試驗(yàn) 2、3組 IgA分別提高了3.01%（P ＞ 0.05）、15.57%（P ＜ 0.05）。

表5 啤酒酵母對生長獺兔血清抗體水平的影響ng/mL

2.4 啤酒酵母對生長獺兔抗氧化能力的影響由表6可知，日糧中添加啤酒酵母可以提高生長獺兔的抗氧化能力。與對照組相比較，試驗(yàn)1、2、3組的GSH-PX活性均提高了0.83%（P＜0.01）；試驗(yàn)1、2組MDA的含量分別降低1.93%、2.41%（P＞0.05）；試驗(yàn)1、2、3組的SOD活性分別提高7.14%（P ＜ 0.05）、14.29% （P ＜ 0.05）、21.43% （P ＜0.01）；試驗(yàn) 1、2、3 組的 TAOC 分別提高 89.23%、84.62%、147.69%（P ＜ 0.01）。

3 討論

啤酒酵母具有一定的免疫特性，與其細(xì)胞壁的構(gòu)成有著密不可分的關(guān)聯(lián)。啤酒酵母的酵母細(xì)胞壁主要是由三部分構(gòu)成，由內(nèi)到外逐次為葡聚糖、蛋白質(zhì)以及甘露聚糖，其中葡聚糖的含量占細(xì)胞壁干重的30% ～60%（Manners等，1973），而甘露聚糖的含量則占細(xì)胞干重的40%～45%（Duffus等，1982），葡聚糖和甘露聚糖都具有一定的免疫功能，可以幫助細(xì)胞防御外界傷害，從而起到護(hù)衛(wèi)的作用（朱春森和徐春厚，2007）。

表6 啤酒酵母對生長獺兔抗氧化能力的影響

葡聚糖是以葡萄糖為單糖組成的同型多糖，其葡萄糖單元之間則以糖苷鍵彼此相連。根據(jù)糖苷鍵的類型可將其分為α-葡聚糖和β-葡聚糖兩種類型，其中β-葡聚糖的免疫作用較為明顯。β-葡聚糖的活性部位基本上是通過β-1，3糖苷鍵聯(lián)合而成，其可以活化巨噬細(xì)胞、嗜中性白血球等，進(jìn)而增加細(xì)胞分裂素、白細(xì)胞素和特殊抗體的含量，全面提高機(jī)體的免疫能力，刺激機(jī)體的免疫系統(tǒng)。此外，β-葡聚糖還可使受傷的機(jī)體淋巴細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞因子（IL-1）的能力快速恢復(fù)正常的狀況，從而高效的改善機(jī)體免疫性能。試驗(yàn)表明，β-葡聚糖可以促進(jìn)機(jī)體內(nèi)的IgM抗體生成，進(jìn)而增強(qiáng)體液的免疫功能。Hofer等（1997）對免疫功能的機(jī)理進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，葡聚糖可以和體內(nèi)的免疫細(xì)胞發(fā)生特異性的結(jié)合，刺激免疫細(xì)胞增殖，從而達(dá)到增強(qiáng)免疫的作用。李志明等（2004）試驗(yàn)表明，β-葡聚糖可以加強(qiáng)肉仔雞非特異性免疫能力；關(guān)于葡聚糖在豬（王忠等，2006）、小鼠（汪巖，2012）等的免疫試驗(yàn)也得到類似結(jié)果。

甘露聚糖主鏈由α-1，6糖苷鍵聯(lián)合而成，而其支鏈則由α-1，2或α-1，3糖苷鍵相互連接而成，生理功能主要表現(xiàn)在可干擾腸道內(nèi)病原菌的定殖，改善腸道環(huán)境等；此外，其還具有抗原作用，可以引起直接的抗體應(yīng)答，充當(dāng)免疫刺激因子，從而提高動物機(jī)體的體液免疫和細(xì)胞免疫的能力。Pavliak等（1990）研究表明，酵母細(xì)胞壁中所含的酵母多糖——甘露聚糖，可以極大地改善動物的免疫功能。Shashidhara等（2003）研究表明，飼料中添加甘露聚糖可以有效增加無菌仔豬血清中I-gA、IgG以及IgM的含量。

啤酒酵母作為一種功能性飼料添加劑，研究較多。吳耀忠等（2008）試驗(yàn)表明，日糧中添加2%～4%啤酒酵母，肉雞對新城疫免疫應(yīng)答有加強(qiáng)的效果；閆桂玲（2007）的試驗(yàn)表明，啤酒酵母甘露聚糖可以有效抑制腸道中一些有害菌的定殖，促進(jìn)有益菌的增殖，從而改善肉雞的特異性以及非特異性免疫功能；李紹玨等（2008）用酵母細(xì)胞壁代替生長豬日糧中的抗生素，可以使豬血清中球/白比值增加，BSA免疫集團(tuán)抗體的OD值提高；劉棟輝等（2002）對斑節(jié)對蝦的試驗(yàn)表明，飼料中加入啤酒酵母β-葡聚糖后斑節(jié)對蝦抗病力明顯增強(qiáng)，甚至起到了維生素C無法達(dá)到的作用。本試驗(yàn)結(jié)果表明，獺兔飼料中添加啤酒酵母后，其胸腺的免疫指數(shù)有提高的趨勢；血液中白細(xì)胞的數(shù)量、紅細(xì)胞的數(shù)量、血紅蛋白的含量以及淋巴細(xì)胞的數(shù)量均有增加的趨勢；血清中IgA、IgG及IgM的含量均有上升的趨勢，與上述研究結(jié)果一致。此外，本試驗(yàn)研究還表明，日糧中添加啤酒酵母會使血清中MDA的含量降低，GSH-PX的活性顯著提高，SOD的活性以及TAOC具有提高的趨勢。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，啤酒酵母可促進(jìn)獺兔免疫器官的發(fā)育，有效提高生長獺兔的免疫力和抗氧化能力。在本試驗(yàn)條件下，啤酒酵母在生長獺兔飼料中適宜的添加量為10 kg/t。

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The test aimed to study the effect of beer yeast on immunity and antioxidant capacity of Rex rabbits.A total of 80 60-day old growing Rex rabbits were randomly divided into 4 groups，5 repeats per group，4 rabbits per repeat.The control group was fed basal diet，while the test 1，2，3 groups were fed the test diet added 5，10，15 kg/t beer yeast respectively.The trial lasted for 28 days.The results showed that beer yeast could promote the immune organ development and improve the immunity and antioxidant capacity of Rex rabbit.Compared with the control group，the activity of superoxide dismutase （SOD）of the test groups were increased by 7.14% ～ 21.43%（P ＜ 0.01），and the total antioxidant capacity were increased by 84.62% ～147.69%（P＜0.01).In conclusion，the appropriate adding dose of beer yeast in Rex rabbit diet was 10 kg/t.

growing Rex rabbits；beer yeast；immunity；antioxidant capacity

S816.7

A

1004-3314（2017）19-0017-04

10.15906/j.cnki.cn11-2975/s.20171904

國家兔產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系（CARS-44-B-3）

*通訊作者