李佐祥，李玲，顧桉菁，張莎，宋聚友，張春濤

1.貴州省第三人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，貴州貴陽 550081；2.貴州黔東南職業(yè)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)，貴州貴陽 550081

CL-2000i全自動免疫發(fā)光分析FT3、FT4、TSH參考區(qū)間驗(yàn)證

李佐祥1，李玲1，顧桉菁1，張莎1，宋聚友1，張春濤2

1.貴州省第三人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，貴州貴陽 550081；2.貴州黔東南職業(yè)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)，貴州貴陽 550081

目的驗(yàn)證廠家提供的FT3、FT4、TSH參考區(qū)間是否適用于該地區(qū)，建立該地區(qū)的甲狀腺功能三項(xiàng)指標(biāo)的生物學(xué)參考區(qū)間，為該地區(qū)篩查及診斷甲狀腺疾病提供依據(jù)。方法參照美國臨檢實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員（NccLs）C28-A2文件中涉及到的有關(guān)參考定義，調(diào)查，驗(yàn)證的描述，采用邁瑞全自動化學(xué)發(fā)光儀及其配套試劑、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品，對3 172名健康人群的甲狀腺功能三項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果按性別差異進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析處理。所得結(jié)果與試劑說明書提供參考區(qū)間，《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第4版提供的FT3、FT4、TSH參考區(qū)間比較。結(jié)果該次驗(yàn)證不包括50歲以上人群，留取男性 2273 例進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，得出男性 TSH：0.64～5.56 μIU/mL，16～30 歲，F(xiàn)T3：3.53～5.65 pmol/L、FT4：7.06～15.38 pmol/L， 31～50 歲，F(xiàn)T3：3.58～5.78 pmol/L、FT4：6.69～14.81 pmol/L，女性 899 名得出：TSH：0.9～6.74 μIU/mL，16～30 歲，F(xiàn)T3：3.14～5.43 pmol/L、FT4：5.72～14.22 pmol/L，31～50 歲，F(xiàn)T3：3.03～5.23 pmol/L、FT4：5.51～13.93 pmol/L，研究結(jié)果分別與試劑說明書和《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第4版提供的FT3、FT4、TSH參考區(qū)間進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，為差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論試劑說明書和《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第4版提供的FT3、FT4、TSH參考區(qū)間均不適用于該地區(qū)該實(shí)驗(yàn)室，建議使用該研究結(jié)果作為該地區(qū)實(shí)驗(yàn)室參考區(qū)間。

FT3；FT4；TSH；健康；生物參考區(qū)間

生物參考區(qū)間是檢驗(yàn)結(jié)果常用的一項(xiàng)評價指標(biāo)，為患者疾病的診斷、治療、預(yù)后和篩查提供信息。游離三碘甲狀腺原氨酸（FT3）、游離甲狀腺激素（FT4）、促甲狀腺激素（TSH）是反映甲狀腺功能最常用的檢測指標(biāo)，常稱為“甲狀腺功能三項(xiàng)”。FT3、FT4、TSH以往主要采用放射免疫法和酶聯(lián)免疫法測定技術(shù)。目前實(shí)驗(yàn)室大多采用免疫標(biāo)記的方法直接測定血清中的激素濃度。隨著免疫測定技術(shù)的發(fā)展，競爭性熒光免疫分析法、化學(xué)發(fā)光免疫法和電化學(xué)發(fā)光免疫法已能靈敏、特異、快速和準(zhǔn)確地用于臨床血清激素的測定。許多實(shí)驗(yàn)室一般參照試劑說明書或者全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程設(shè)定參考區(qū)間，在實(shí)際工作中，發(fā)現(xiàn)這些參考區(qū)間并不適合臨床應(yīng)用，其生物參考區(qū)間是解釋檢驗(yàn)結(jié)果分析檢驗(yàn)信息是一個基本尺度和依據(jù)，實(shí)驗(yàn)室只有給臨床檢驗(yàn)項(xiàng)目提供可靠的生物參考區(qū)間，才能使臨床醫(yī)生對患者或健康體檢者的診斷治療有明確的指引[2]。雖然不同廠家的檢測系統(tǒng)提供了各自參考區(qū)間，但由于地域、人群等因素的差異，為了更好地服務(wù)于臨床，提高這些指標(biāo)對甲狀腺疾病符合率，有必要對廠家提供的生物參考區(qū)間進(jìn)行驗(yàn)證或進(jìn)一步重新設(shè)定，這也ISO015189《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可提準(zhǔn)則》及醫(yī)院等級評審中所要求的內(nèi)容之一。按照CLSI文件C28-P3《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室參考區(qū)間的定義、建立和確認(rèn)》中的推薦方法，參考IS015189：2003（E）《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室一質(zhì)量和能力的專用要求》條款要求，根據(jù)參考區(qū)間正確、科學(xué)的確定方法，按照建立參考區(qū)間的具體操作程序，保證參考區(qū)間的可靠、適用。該研究通過2015—2016年調(diào)查該地區(qū)3 172名體檢者，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取到該院健康體檢者3 172名，年齡16～78歲，年齡：（32.02±8.99）歲；其中：男性 2 273名，年齡：（32.65±8.98）歲；女性 899 名，年齡：（30.42±8.47）歲。 按年齡分為 3組：①Ⅰ組：16～30 歲；②Ⅱ組 31～50歲；③Ⅲ組：51～78歲。入選標(biāo)準(zhǔn)：①沒有任何影響檢測結(jié)果的生理特征；②未服用任何藥物并空腹；發(fā)育精神正常，無心血管、肺、腎等器質(zhì)性疾患；③3個月內(nèi)無輸血史和手術(shù)史；④婦女不在月經(jīng)期、妊娠期、哺乳期；無酗酒史，并按不同年齡段及性別比例；⑤排除高血壓、肝病、胃病、腎病、糖尿病等影響血清FT3、FT4、TSH濃度的疾病，人群職業(yè)分布包括學(xué)生、公務(wù)員、工人、服務(wù)人員、高退休人員等合格標(biāo)本。入選者均填寫“知情同意書”和“健康參考個體資料調(diào)查表”。最終3127名納入標(biāo)準(zhǔn)。晨起空抽腹抽取靜脈血3 mL，3 500 r/min離心分離血清，排除溶血、脂血標(biāo)本。采用邁瑞（化學(xué)發(fā)光免疫分析法）試劑（FT3、FT4、TSH），按照說明書設(shè)置參數(shù)在邁瑞CL-2000i全自動化學(xué)發(fā)光儀2 h內(nèi)完成測定，每日開機(jī)后先使用配套質(zhì)控物進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控，室內(nèi)質(zhì)控在控后，選擇參考個體，建立參考區(qū)間計劃進(jìn)行參數(shù)數(shù)據(jù)分析。

表2 參考范圍的建立

1.2 儀器與試劑

邁瑞CL-2000i全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀；邁瑞原裝FT3、FT4、TSH配套試劑。邁瑞免疫定值質(zhì)空控品（水平 1 批品：IA2638，水平 2 批號：IA2639）。

1.3 方法

2 h內(nèi)離心標(biāo)本取血清上機(jī)檢測，采用邁瑞（化學(xué)發(fā)光免疫分析法）試劑，按照說明書設(shè)置參數(shù)在邁瑞CL-2000i全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀上2 h內(nèi)完成測定，選擇參考個體，建立參考區(qū)間計劃，進(jìn)行參考數(shù)據(jù)分析，確定參考數(shù)據(jù)是否需要繼續(xù)分組參照NCCLS C28-A2文件。

1.4 統(tǒng)計方法

應(yīng)用 SPSS 17.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料以率或構(gòu)成比表示，采用 χ2檢驗(yàn)；計量資料以（±s）表示，采用t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

該研究通過統(tǒng)計調(diào)查建立該地區(qū)化學(xué)發(fā)光免疫法測定FT3、FT4、TSH參考區(qū)間，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

2.1 不同性別間的比較

FT3（poml/L）:男性（4.82±0.59）、女性（4.23±0.58）（t=25.14，P=0.000）；FT4（poml/L）：男性（10.99±2.13）、女性（9.88±2.19）（t=13.05，P=0.000）；TSH(μIU/mL):男性（2.46±1.58）、女性（2.92±1.95）（t=-6.93，P=0.000）。

2.2 不同年齡組的比較

FT3（poml/L）:I組（4.74±0.36）、Ⅱ組（4.54±0.64）、Ⅲ組（4.34±0.96）（P=0.000）；FT4（poml/L）:I組（10.83±2.21）、Ⅱ組（10.49±2.14）、Ⅲ組 10.23±2.64（P=0.000）；TSH(μIU/mL)：I 組（2.16±1.64）、Ⅱ組（2.56±1.79）、Ⅲ組（2.75±1.77）（P=0.000）由此可以得出：男女之間 FT3、FT4、TSH 結(jié)果差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），不同年齡分組組間結(jié)果差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），進(jìn)一步做不同性別年齡結(jié)果分析如下。

表1 不同性別與年齡組比較

由表1可以得出：不同性別不同年齡組間兩兩比較結(jié)果差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），從而按照不同性別、不同年齡段分別建立參考區(qū)間如下。

3 討論

目前臨床上對甲亢或甲減患者仍采用經(jīng)驗(yàn)性治療的原則，對治療過程中用藥的劑量及周期沒有一個明確、統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)和界定，在加上個體差異的影響，稍有不慎及易將甲亢治療成甲減、甲減治療成甲亢，從而給患者帶來巨大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)和心理壓力，由于該疾病的發(fā)生沒有固定的年齡段，在診斷方面，除了一些有明顯體征的患者，甲狀腺功能檢測得結(jié)果是臨床診斷與鑒別診斷的重要依據(jù)，因此，設(shè)置準(zhǔn)確的生物參考區(qū)間是病情分級及制定治療計劃的前提。因此，我們認(rèn)為調(diào)查該地區(qū)甲狀腺功能三項(xiàng)指標(biāo)的正常的生物參考區(qū)間是十分重要和必要的。

FT4和FT3的臨床意義與TT4和TT3相同，但因不受血清TBG影響，而代表具有生物活性的甲狀腺激素的含量，因而具有更重要的臨床價值，甲狀腺功能亢進(jìn)對于診斷甲亢來說，F(xiàn)T4、FT3均較靈敏，甲亢時FT3、FT4升高但TSH減低，F(xiàn)T4 FT3的價值更大，甲狀腺功能減退大多數(shù)口服T4治療的患者，在服藥后1～6 h血中FT4濃度達(dá)到高峰，其升高程度與服藥劑量有關(guān)。FT4時甲狀腺素替代性治療時很好的檢測指標(biāo)。妊娠孕婦的血中TBG明顯增加，因此，F(xiàn)T4 FT3的檢測較TT4 TT3更為準(zhǔn)確[3]。

該研究所得男性 FT3:3.66～5.98 pmol/L、FT4：6.82～15.16 pmol/L、TSH：0.64～5.56 μIU/mL，女性：FT3:3.10～5.37 pmol/L、FT4：5.59～14.17 pmol/L、TSH：0.90～6.74 uIU/mL，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析男女間具有差異性，F(xiàn)T3、FT4男性明顯高于女性,TSH女性高于男性，該研究與四川地區(qū)部分健康人群血清甲狀腺激素參考區(qū)間的調(diào)查[4]FT3、FT4男性明顯高于女性,TSH女性高于男性，結(jié)果相一致。

結(jié)果與邁瑞廠家提供的說明書參考區(qū)間不一致，該研究用的試劑是廣東地區(qū)醫(yī)院350名健康人血清樣本檢測分析，統(tǒng)計得出男性與女性95%參考區(qū)間為FT3：2.3～4.0 pg/mL、FT4：0.6～1.2 ng/dL、TSH：0.5～7.3 μIU/mL，可能是地域與人群的不同，所致參考區(qū)間的差異性[5]。

該次研究結(jié)果與第4版《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》比較[6]，具有差異性，第4版《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》參考區(qū)間 FT3:1.71～3.70 ng/L、FT4：0.70～1.48 ng/L、TSH：0.2～7.0 μIU/mL，可能使用儀器與檢測方法學(xué)法的不一致所導(dǎo)致，該研究使用的深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司提供的試劑與第4版《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》用的方法都是化學(xué)發(fā)光法，但深圳邁瑞廠家用的是堿性磷酸酶來標(biāo)記T3、T4、TSH，《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第四版中用的則是吖叮脂標(biāo)記T3、T4、TSH，可能導(dǎo)致參考區(qū)間具有差異性。

綜上所述，生物參考區(qū)間是診斷疾病的參考依據(jù)準(zhǔn)確的參考區(qū)間是臨床診療的關(guān)鍵由于性別、年齡、環(huán)境、生活習(xí)慣、實(shí)驗(yàn)室檢測系統(tǒng)、方法學(xué)等方面的差異，各地區(qū)的生物參考區(qū)間會有所不同，因此建議該地區(qū)的各實(shí)驗(yàn)室有必要驗(yàn)證并建立自己的生物參考區(qū)間[7]，同時要加強(qiáng)與臨床溝通，做好定期比對審核及生物參考區(qū)間的驗(yàn)證，從而為甲狀腺功能相關(guān)疾病的準(zhǔn)確診斷和治療提供依據(jù)。

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A

1672-5654（2017）09（a）-0175-03

2017-06-09）

10.16659/j.cnki.1672-5654.2017.25.175

李佐祥（1981-），男，貴州余慶人，本科，主管檢驗(yàn)技師，主要從事臨床生化與免疫檢驗(yàn)研究工作。