王玉超,李保全* ,胡東方,古金元,陳同煜,彭 濤,王文武,馬梓承,孟凡亮,劉照虎,劉思當,肖一紅
(山東農(nóng)業(yè)大學(xué),山東省動物生物工程與疾病防治重點實驗室,山東 泰安 271000)
某規(guī)?;i場三種重大疫病血清抗體檢測結(jié)果分析
王玉超,李保全* ,胡東方,古金元,陳同煜,彭 濤,王文武,馬梓承,孟凡亮,劉照虎,劉思當,肖一紅
(山東農(nóng)業(yè)大學(xué),山東省動物生物工程與疾病防治重點實驗室,山東 泰安 271000)
河北省某規(guī)?;i場為了解豬重大疫病疫苗免疫效果,實時監(jiān)測其群體免疫狀況,優(yōu)化疫苗免疫程序,及時發(fā)現(xiàn)存在問題及潛在風險,應(yīng)用韓國金諾(MEDIAN)公司豬瘟、豬藍耳病、豬偽狂犬病gE抗體檢測試劑盒,對該豬場送檢的71份血清進行抗體檢測。結(jié)果顯示,豬瘟、豬藍耳病、豬偽狂犬病gE抗體總體陽性率分別為49.30%、52.11%和4.22%?;跈z測結(jié)果,對該豬場免疫狀況進行了分析,并提出來免疫整改建議,為該場的豬病免疫程序制定提供了科學(xué)指導(dǎo)。
豬重大疫?。豢贵w檢測;免疫程序;豬病防控
養(yǎng)豬生產(chǎn)中,豬瘟、豬藍耳病、豬偽狂犬病等是當前危害養(yǎng)豬業(yè)的重要疾病。就目前我國的實際情況,免疫仍是豬場疫病防控的主要手段,而免疫效果存在眾多影響因素,因此抗體的檢測顯得尤為重要。適時進行抗體檢測,可以評估豬群的免疫狀態(tài)與疫苗免疫效果,為疫苗的選擇、免疫程序的制定提供科學(xué)依據(jù),從而更好地指導(dǎo)豬病防控的臨床實踐工作。
1.1.1 樣品采集與處理 2017年2月中旬,于河北地區(qū)某存欄生產(chǎn)母豬約800頭規(guī)模豬場通過前腔靜脈采集血樣71份,凝血處理,分離血清后置于-20 ℃冰箱凍存待檢,采樣情況見表1。
表1 采樣信息
1.1.2 主要試劑及儀器
MEDIAN公司豬瘟病毒(CSFV)抗體檢測試劑盒、豬藍耳病病毒(PRRSV)抗體檢測試劑盒、豬偽狂犬病病毒gE(PRVgE)抗體檢測試劑盒,Eppendorf移液器,酶標儀。
1.2.1 檢測方法 嚴格按照試劑盒說明書操作。
1.2.2 結(jié)果判定 CSFV:阻斷率≥40.0%為陽性,阻斷率<40.0%為陰性;PRRSV:S/P 值≥0.4為陽性,S/P值<0.4為陰性;PRVgE:S/N>0.6為陰性,S/N≤0.6為陽性。若豬場使用偽狂犬病基因缺失疫苗,一旦檢出偽狂犬病 gE 陽性則說明有偽狂犬病野毒感染。
經(jīng)檢測,豬瘟、豬藍耳病和豬偽狂犬病gE抗體整體陽性率分別為49.30%、52.11%和4.22%,豬偽狂犬病gE抗體檢測存在3份陽性血清,匯總結(jié)果見表 2。
表2 檢測結(jié)果
農(nóng)業(yè)部印發(fā)的《2013 年國家動物疫病強制免疫計劃》指示,存欄豬的豬瘟抗體陽性率大于 70%為免疫合格。母豬作為豬場的核心生產(chǎn)豬群,理論上其豬瘟抗體陽性率應(yīng)為100%,但出乎意料的是在本次檢測中,母豬豬瘟抗體陽性率僅有50%,有一半的母豬(14頭)抗體不合格,懷疑存在免疫操作或者疫苗稀釋保存問題,也可能豬群帶毒率較高,存在免疫耐受。產(chǎn)房仔豬抗體平均值25.64%,離散度91.72%,陽性率23.08%,更是遠遠低于豬瘟抗體合格的標準。因為該場母豬豬瘟抗體陽性率只有50%,產(chǎn)房仔豬從母體獲得的豬瘟母源抗體水平自然不會很高,仔豬得不到母源抗體的有效保護。保育豬的豬瘟抗體平均值、離散度和陽性率分別為35.56%、66.36%和41.67%,說明一免之后保育豬的豬瘟抗體水平有了一定程度的提升,但該水平的豬瘟抗體仍不足以讓保育豬獲得有效保護。育肥豬的豬瘟抗體平均值、離散度和陽性率分別為59.26%、44.94%和72.22%,其豬瘟抗體水平基本上符合強制免疫規(guī)定的合格率,說明二免后的豬瘟抗體達到了抵抗野毒感染的水平??偟膩碚f,該場豬瘟抗體整體陽性率僅有49.30%,遠低于強制免疫規(guī)定的合格率,僅有育肥豬的豬瘟抗體陽性率達到70%以上,其他豬群均為易感豬群,存在極大的豬瘟感染風險。豬瘟抗體檢測結(jié)果見表3。
表3 豬瘟抗體檢測結(jié)果
豬藍耳病免疫良好的豬場,抗體陽性率在70%~80%,離散度在25%左右,S/P值在0.8~1.2之間,并且保證S/P值大于2.5的豬只占豬群5%以下。該場產(chǎn)房仔豬、保育豬、育肥豬和母豬的豬藍耳病抗體陽性率分別為7.69%、25.00%、94.44%和57.14%,豬場一直沒有免疫過豬藍耳病疫苗,但是抗體檢測陽性,說明已有部分豬只感染過豬藍耳病病毒。從產(chǎn)房仔豬到保育豬再到育肥豬,豬藍耳病抗體陽性率在明顯升高,且S/P值>2.5的比例從無到有,懷疑感染點應(yīng)該在保育豬時期,并之后在豬群中持續(xù)感染,并且保育豬和育肥豬豬藍耳病毒抗體S/P值>2.5比例均大于5%,需要密切關(guān)注豬群的狀態(tài),比如,保育豬有無發(fā)熱、喘、逐步消瘦的情況,特別是育肥豬有無突然死亡,部分死亡豬只耳、口鼻、尾巴發(fā)紫的現(xiàn)象,一旦發(fā)現(xiàn)要及時送診,以確定有無豬藍耳病發(fā)生。豬藍耳病病毒抗體檢測結(jié)果見表4。
表4 豬藍耳病病毒抗體檢測結(jié)果
豬偽狂犬gE抗體一旦檢測出陽性,就說明有野毒感染。從檢測結(jié)果中可以看出,產(chǎn)房仔豬、保育豬和育肥豬中各有一例豬偽狂犬gE抗體陽性,說明其感染了偽狂犬野毒。豬偽狂犬病毒gE抗體檢測結(jié)果見表5。
表5 豬偽狂犬病毒gE抗體檢測結(jié)果
通過檢測數(shù)據(jù)的分析發(fā)現(xiàn),該豬群重大疫病的免疫狀況不容樂觀,存在許多問題。第一,母豬群豬瘟病毒抗體水平遠低于國家強制免疫計劃的要求,存在較大的感染壓力,并且不能夠通過初乳給仔豬提供足夠的保護力,仔豬也存在較大的豬瘟感染風險;第二,豬群沒有免疫豬藍耳病毒疫苗,但豬場各豬群均為豬藍耳病抗體陽性,育肥豬豬藍耳病抗體陽性率高達94.44%,且保育和育肥豬群S/P異常值比例大,懷疑豬藍耳病毒已經(jīng)在豬群中開始蔓延;第三,該場所檢測的母豬的偽狂犬野毒抗體均為陰性,在目前偽狂犬野毒的普遍感染情況下,說明該豬場做過偽狂犬的凈化,并且母豬群仍保持陰性,但是保育豬和育肥豬群中各存在一例偽狂犬野毒抗體陽性,說明曾經(jīng)感染過偽狂犬野毒。
根據(jù)以上發(fā)現(xiàn)的問題,建議豬場采取以下措施:第一,由于母豬群豬瘟病毒抗體水平異常偏低,建議嚴格檢查疫苗保存、稀釋及免疫操作是否存在問題,然后全群母豬立即補免一次豬瘟疫苗,一個月之后重新做一次抗體檢測,注意觀察母豬抗體水平是否上升,抗體沒有上升的母豬應(yīng)懷疑是否存在免疫抑制,或存在免疫耐受;第二,豬群存在豬藍耳病病毒感染,并且異常S/P值較高,豬群可能存在低致病毒株感染,應(yīng)時刻注意豬群狀態(tài),可以嘗試豬群免疫經(jīng)典毒株豬藍耳病疫苗。第三,保育豬和育肥豬有個別偽狂犬野毒感染的情況,由于偽狂犬野毒抗體可以通過母豬初乳傳給哺乳仔豬,并能夠存在10~14周,建議豬場查找偽狂犬野毒抗體呈陽性仔豬的母豬,采該母豬血液進行偽狂犬野毒抗體檢測,如果陽性,建議淘汰,并加強生物安全措施,以防病毒在豬群中蔓延。
2017-05-21)
本研究由國家重點研發(fā)計劃項目“豬重要疫病免疫防控新技術(shù)研究”子課題“規(guī)?;i場科學(xué)合理的免疫程序的研究(2017YFD0500605)”支持;山東省“雙一流”獎補資助。
李保全