張琦

摘 要：本實(shí)驗(yàn)研究阿莫西林分散片的制備方法并建立反相高效液相色譜法測定阿莫西林分散片中對(duì)阿莫西林的含量。方法：采用安捷倫十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱（218mm×4.6mm，5μm），0.05mol/L磷酸二氫鉀-0.1moL/L三乙胺-乙腈（800：120：7，磷酸調(diào)至pH2.5），檢測波長為220nm，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃。對(duì)阿莫西林在20～120μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系（r=0.99996）。結(jié)論：本制劑穩(wěn)定、可靠，測定方法簡便、準(zhǔn)確。

關(guān)鍵詞：分散片；制備；測定

阿莫西林化學(xué)名為（2S，5R，6R）-3，3-二甲基-6-[（R）-（-）-2-氨基-2-（4-羥基苯基）乙酰氨基]-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜雙環(huán)[3.2.0]庚烷-2-甲酸三水合物。阿莫西林是一種最常用的半合成青霉素類廣譜β-內(nèi)酰胺類抗生素，是目前應(yīng)用較為廣泛的口服半合成青霉素之一。阿莫西林殺菌作用強(qiáng)，穿透細(xì)胞膜的能力也強(qiáng)。本實(shí)驗(yàn)研究阿莫西林分散片的制備方法并建立反相高效液相色譜法測定阿莫西林分散片中對(duì)阿莫西林的含量。

1 儀器與試藥

1.1 儀器：HLSH2-6型濕法混合制粒機(jī)（北京航空制造工程研究所）；GFG80 120高效沸騰干燥機(jī)（廣州興榮機(jī)械有限公司）；旋轉(zhuǎn)式壓片機(jī)（上海天祺制藥機(jī)械有限公司）；UV-260型紫外分光光度計(jì)（13本島津）；KQ-250DB型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；百靈LA114型電子天平（常熟市百靈天平儀器有限公司）；78X-Z型片劑四用測定儀（上海黃海藥檢儀器廠）；US6180DH數(shù)顯型超聲波清洗器（北京優(yōu)晟聯(lián)合科技有限公司）；SAGA-D超純水器（南京易普易達(dá)科技發(fā)展有限公司）；CW180A高效粉碎機(jī)（北京航空制造工程研究所）；LC-5520高效液相色譜儀（北京東西分析儀器有限公司）。

1.2 色譜柱：安捷倫十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱（218mm×4.6mm，5μm）。

1.3 對(duì)照品：對(duì)阿莫西林 購自中國藥品生物制品檢定所。

1.4 試劑：磷酸二氫鉀（上海展云化工有限公司）、三乙胺（上海展云化工有限公司）、乙腈（上海展云化工有限公司）、磷酸（上海展云化工有限公司）。

2 制備方法

2.1 處方

微粉硅膠、硬脂酸鎂、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基淀粉鈉、微晶纖維素等。

2.2 制備

將原輔料研細(xì)，分別過80目篩備用。使用10%聚乙烯吡咯烷酮水溶液制軟材，過40目篩制濕粒，50-60℃干燥，整粒，加入硬脂酸鎂、微粉硅膠壓片。

3 質(zhì)量控制

3.1 片劑通則

重量差異、崩解時(shí)限、微生物限度等均符合中國藥典2015版有關(guān)規(guī)定[1]。

3.2 含量測定

3.2.1 色譜條件。分別考察0.05mol/L磷酸二氫鉀一0.1moL/L三乙胺一乙腈（800：120：7，磷酸調(diào)至pH2.5），0.05mol/L磷酸二氫鉀一0.1moL/L三乙胺一乙腈（800：120：7），乙睛-水-三乙胺（52：100：0.1）（磷酸調(diào)至pH為2.9）不同比例的流動(dòng)相，結(jié)果以0.05mol/L磷酸二氫鉀-0.1moL/L三乙胺-乙腈（800：120：7，磷酸調(diào)至pH2.5）為流動(dòng)相為流動(dòng)相，供試品各峰分離效果最好，故選用0.05mol/L磷酸二氫鉀-0.1moL/L三乙胺-乙腈（800：120：7，磷酸調(diào)至pH2.5）為流動(dòng)相為流動(dòng)相。依據(jù)查閱文獻(xiàn)及考查的結(jié)果，確定色譜條件如下[1-5]。流動(dòng)相：0.05mol/L磷酸二氫鉀-0.1moL/L三乙胺-乙腈（800：120：7，磷酸調(diào)至pH2.5），檢測波長：220nm，流速：1.0m·min-1。柱溫：30℃。理論板數(shù)按對(duì)阿莫西林峰計(jì)算應(yīng)不得低于2000。

3.2.2 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取對(duì)阿莫西林對(duì)照品適量，置容量瓶中，加磷酸鹽緩沖液（pH5.0）制成每1mL含40ug的溶液，即得。

3.2.3 供試品溶液的制備

取供試品，研細(xì)，精密稱取，置具塞錐形瓶中，精密加入磷酸鹽緩沖液（pH5.0）100mL，密塞，精密稱定重量，超聲處理5分鐘，放冷，精密稱定，用磷酸鹽緩沖液（pH5.0）補(bǔ)足重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液2ml，即得。

3.2.4 專屬性試驗(yàn)

依照處方取除對(duì)阿莫西林，按樣品制備工藝制成陰性對(duì)照樣品，照3.2.3項(xiàng)下供試品溶液的制備方法制成陰性液，依上述方法測定，結(jié)果在對(duì)阿莫西林出峰處陰性液無色譜峰，結(jié)果陰性試驗(yàn)沒有干擾，表明本方法專屬性良好。

3.2.5 精密度試驗(yàn)

精密稱取對(duì)阿莫西林對(duì)照品適量，加磷酸鹽緩沖液（pH5.0）使溶解，制成濃度為40μg·mL-1的供試品溶液。照上述色譜條件，精密吸取10μl，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄峰面積。結(jié)果，RSD=0.83%，表明本方法精密度良好。

3.2.6 對(duì)照品的線性考察

精密稱取對(duì)阿莫西林對(duì)照品5mg，置25ml容量瓶中，加入磷酸鹽緩沖液（pH5.0）使溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別精密吸取1、2、3、4、5、6mL，置于10mL量瓶中，加磷酸鹽緩沖液（pH5.0）稀釋至刻度，搖勻。分別精密上述溶液吸取10μL，注人液相色譜儀，依照3.2.1項(xiàng)下的色譜條件測定，記錄色譜峰。以峰面積（Y）為縱坐標(biāo)，對(duì)照品進(jìn)樣量（X）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算回歸方程。結(jié)果表明，對(duì)阿莫西林在20～120μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

3.2.7 重現(xiàn)性試驗(yàn)

稱取同一批的阿莫西林分散片樣品6份，按測定方法項(xiàng)下的方法制備供試品溶液，測定含量，并計(jì)算樣品的RSD值，結(jié)果RSD為0.76%，結(jié)果表明此方法的重現(xiàn)性良好。

3.2.8 準(zhǔn)確度試驗(yàn)

精密稱取已知含量的樣品6份，分別加入一定量的對(duì)阿莫西林對(duì)照品，上述方法進(jìn)行測定，計(jì)算回收率，平均回收率為99.3%，RSD=0.83%，結(jié)果表明樣品加樣回收率良好。

4 討論

本制劑穩(wěn)定、可靠，符合中國藥典相關(guān)規(guī)定。此測定方法可用于阿莫西林分散片中對(duì)阿莫西林的含量測定。依照上述含量測定方法，測定阿莫西林分散片三批樣品中對(duì)阿莫西林的含量，結(jié)果三批樣品的含量分別為標(biāo)示量的99.1%、98.6%、99.3%。阿莫西林分散片中對(duì)阿莫西林的含量為標(biāo)示量的95%-105%。

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