何紅春+李紅梅

摘 要：目的：建立一種高效液相色譜-示差折光測定口香糖中山梨糖醇和麥芽糖醇含量的實(shí)驗(yàn)方法。方法：色譜柱采用Waters NH2柱（250mm×4.6mm，5μm），以乙腈∶水=70∶30為流動(dòng)相，采用示差折光檢測器測定口香糖中山梨糖醇和麥芽糖醇的含量。結(jié)果：采用本實(shí)驗(yàn)檢測方法，山梨糖醇和麥芽糖醇的線性范圍為1.6～6.4mg/mL，該方法的最小檢出限0.1mg/mL，加標(biāo)回收率為92.46%～101.08%，方法的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差0.88%～1.96%。結(jié)論：該方法精密度好、回收率和準(zhǔn)確度高，適用于口香糖中山梨糖醇和木糖醇的定量分析。

關(guān)鍵詞：口香糖；山梨糖醇；麥芽糖醇；高效液相色譜；示差折光檢測

中圖分類號 TS247 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A 文章編號 1007-7731（2017）17-0127-03

Abstract：[Objective]A high performance liquid chromatography method for separation and determination of sorbitol and maltitol in chewing gum with sticky rice was established. [Method] The analytical column was Waters NH2 （ 250mm×4.6mm，5μm），the mobile phase was acentonitrile-water （70∶30，V/V），the samples were determined by an refractive index detector detector. [Result]The calibration curves had good linearity in the range of 1.6～6.4mg/mL for sorbitol and maltitol，the detection limit for sorbitol and maltitol was 0.1mg/mL，the average recoveries of sorbitol and maltitol were 92.46%～101.08% ，RSD = 0.88%～1.96%.[Conclusion] The method was a convenient，rapid and effective method for qualitatively analysis of sorbitol and maltitol in chewing gum.

Key words：Chewing gum；Sorbitol；Maltitol；HPLC；Refractive index detector

糖醇[1-11]是一種多元醇，含有2個(gè)以上的羥基，糖醇雖然不是糖但具有某些糖的屬性。木糖醇與蔗糖的甜度相當(dāng)，麥芽糖醇與蔗糖的甜度接近，這2種糖醇是蔗糖最好的替代品，可以簡單的替代蔗糖。木糖醇的生產(chǎn)原料是富含半纖維素的農(nóng)林廢棄物玉米芯等，資源較為豐富，且不會(huì)造成與食糧爭原料的現(xiàn)象，發(fā)展?jié)摿^大。所以糖醇一直是各個(gè)國家研究的對象，是國際食品和衛(wèi)生組織批準(zhǔn)的安全性食品之一。在我國GB2760-2014《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》中規(guī)定食品中糖醇類是按生產(chǎn)需要適量使用[12]。由于糖醇不含醛基，沒有還原性，所以不能采用滴定法測定；在紫外區(qū)域也沒有吸收峰，所以也不能用紫外測定其含量。為此，本實(shí)驗(yàn)利用高效液相色譜-示差折光方法對口香糖中山梨糖醇和麥芽糖醇含量的測定進(jìn)行了研究。

1 材料與方法

1.1 材料和儀器 口香糖樣品（超市購買）、山梨糖醇對照品（德國Dr.Ehrenstorfer）、麥芽糖醇對照品（德國Dr.Ehrenstorfer）；乙腈，默克化工技術(shù)（上海）有限公司。 E2695高效液相色譜儀，Waters公司；2414示差折光檢測器，Waters公司；Synergy超純水機(jī)，美國密理（MILLIPORE）公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 色譜條件選擇 色譜柱：Waters NH2柱（250mm×4.6mm，5μm），流動(dòng)相：乙腈∶水=70∶30；檢測池溫度：35℃；柱溫：35℃；進(jìn)樣量10μL；流速1.0mL/min。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制 準(zhǔn)確稱取山梨糖醇和麥芽糖醇對照品，用流動(dòng)相溶解配制成1.6，2.4，3.2，4.8，6.4mg/mL的混標(biāo)溶液，搖勻，經(jīng)0.45μm濾膜過濾，取濾液備用，作為對照品溶液。

1.2.3 樣品溶液配制 準(zhǔn)確稱取2g左右切碎的樣品，置于50mL離心管中，加入40mL水，漩渦混勻5min，置于80℃水浴鍋中加熱20min，取出后9000r/min離心10min，取上清液過0.22μm濾膜，上機(jī)測試。

2 結(jié)果與分析

2.1 線性關(guān)系的考察 精密吸取2種糖醇混合對照品溶液10μL，注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖。以對照品峰面積為縱坐標(biāo)，以對照品溶液濃度（mg/mL）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程跟相關(guān)系數(shù)見圖1。由圖1可知，2種糖醇在1.6～6.4mg/mL線性關(guān)系良好，并以信噪比等于3為標(biāo)準(zhǔn)，測得2種糖醇的檢出限為0.1mg/mL。

2.2 精密度試驗(yàn) 精密吸取混合對照品溶液10μL重復(fù)進(jìn)樣6次，記錄色譜圖峰面積，并測定峰面積的平均值和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差，測定結(jié)果見表1。連續(xù)6次實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，山梨糖醇和麥芽糖醇精密度實(shí)驗(yàn)相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.26%、1.45%，本實(shí)驗(yàn)測定山梨糖醇和麥芽糖醇精密度良好，具有良好的準(zhǔn)確度。

2.3 重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 由表2可知，取同一樣品，按照供試樣品溶液制備方法重復(fù)測定6次，記錄色譜圖，測定結(jié)果見表2。重復(fù)性實(shí)驗(yàn)山梨糖醇相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.20%，麥芽糖醇相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.73%。用本方法測山梨糖醇和麥芽糖醇含量重復(fù)性良好。endprint

2.4 回收率實(shí)驗(yàn) 在上述優(yōu)化好的條件下，分別在口香糖樣品中添加標(biāo)樣，進(jìn)行添加回收率和精密度實(shí)驗(yàn)。測定結(jié)果見表3，回收率在92.46%～101.08%，重復(fù)測定7次，計(jì)算各組分的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在0.88%～1.96%。表明高效液相色譜-示差折光法能夠滿足實(shí)際樣品的測定需求。

2.5 樣品測定 取6批口香糖按1.3.3方法制備樣品溶液，精密吸取樣品供試液10μL，對照品混合溶液10μL，分別注入高效液相色譜儀，以外標(biāo)法計(jì)算含量，見表4，樣品中山梨糖醇跟麥芽糖醇含量見表4。山梨糖醇和麥芽糖醇對照品及樣品的HPLC色譜圖見圖2、圖3，從圖2和圖3可知，通過上述條件對照品和樣品都能夠達(dá)到很好的基線分離，山梨糖醇和麥芽糖醇出峰時(shí)間分別在7.7min和10.8min，結(jié)果令人滿意。

3 討論

糖醇類易溶于水，所以前處理可以才用水提取的方法，但是復(fù)雜食品中糖醇類的測定前處理要去除蛋白質(zhì)、脂肪等凈化后才能上儀器測定，另外對照品的糖醇類吸濕性較高，所以在稱量對照品時(shí)候需要注意快速準(zhǔn)確，盡量減小誤差。本實(shí)驗(yàn)針對口香糖中山梨糖醇和麥芽糖醇含量的測定具有良好的準(zhǔn)確度、精密度和回收率，適用于口香糖中山梨糖醇和麥芽糖醇含量的測定。

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[12]GB 2760-2014食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)[S].

（責(zé)編：張宏民）endprint