□ 付麗莎 大連市食品檢驗(yàn)所

水產(chǎn)制品中敵敵畏、敵百蟲超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法前處理過(guò)程的優(yōu)化

□ 付麗莎 大連市食品檢驗(yàn)所

優(yōu)化超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（UPLC-MS-MS）同時(shí)測(cè)定水產(chǎn)制品中敵敵畏和敵百蟲的測(cè)定方法，分別在提高工作效率、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)、減少試劑毒性等方面較標(biāo)準(zhǔn)方法都有很大程度的改善。

水產(chǎn)制品；敵敵畏；敵百蟲；超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜

敵敵畏為廣譜性殺蟲、殺螨劑，具有觸殺、胃毒和熏蒸作用。人誤服了會(huì)出現(xiàn)頭暈、頭痛、惡心嘔吐、肌肉跳動(dòng)[1-2]。敵百蟲具有胃毒作用，能抑制害蟲神經(jīng)系統(tǒng)中膽堿酯酶的活動(dòng)而致死[3]。有些市面上的小作坊用不明來(lái)歷的粗鹽制作魚干，曬魚干期間為了防止蒼蠅叮咬、滋生小蟲，還在魚干上噴灑敵敵畏、敵百蟲等農(nóng)藥，誤食魚干后會(huì)對(duì)人體造成一定的傷害。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 儀器與試劑

敵敵畏：購(gòu)自農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所；敵百蟲：購(gòu)自農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所。

高速冷凍離心機(jī)（HITACHI公司）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（RE52AA，上海亞榮生化儀器廠）；高效液相色譜-三重四級(jí)桿質(zhì)譜聯(lián)用儀（LC1290-6490，美國(guó)Agilent公司）。

1.2 色譜條件

色譜柱Agilent poroshell 120 EC-C18 2.7 μm，4.6 mm×50 mm；流動(dòng)相：A—0.1%（體積分?jǐn)?shù)）甲酸水溶液；B—0.1%（體積分?jǐn)?shù)）甲酸甲醇溶液；件—0～7 min，梯度；流速—0.3 mL/ min；B；柱溫—40 ℃。

1.3 質(zhì)譜條件

離子源采用電噴霧離子源（ESI+）；分析物在正離子掃描下以多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式（MRM）分析；質(zhì)譜參數(shù)為：輔助氣壓（N2）：14 L/min；霧化氣壓力：25 psi；氣化溫度：300 ℃；電噴霧電壓3 000 V（+/-）。

2 實(shí)驗(yàn)方法與步驟

準(zhǔn)確稱取試樣5 g于25 mL離心管中，加入5 g無(wú)水硫酸鈉混勻，再加入15 mL乙腈均質(zhì)2 min，然后離心2 500 r/min離心3 min，將離心后的上清液轉(zhuǎn)移至100 mL茄形蒸餾瓶中，再向離心管中加入15 mL乙腈重復(fù)均質(zhì)一次，離心合并上清液。于40 ℃旋轉(zhuǎn)蒸干，加1 mL乙腈溶解殘?jiān)?，過(guò)有機(jī)膜，上機(jī)。

3 結(jié)果與討論

3.1 方法優(yōu)化前后比較

提高工作效率。本方法與標(biāo)準(zhǔn)方法比較在工作效率提升等方面有所改進(jìn)。采用優(yōu)化后的前處理方法，加快實(shí)驗(yàn)進(jìn)度，大幅提高工作效率。

3.2 標(biāo)準(zhǔn)方法與改進(jìn)方法譜圖

分別添加敵百蟲、敵敵畏待測(cè)農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液到樣品里，標(biāo)準(zhǔn)方法采用二氯甲烷作為提取劑的前處理方法，上機(jī)溶液質(zhì)譜譜圖，在敵敵畏出峰之前有一個(gè)較大雜質(zhì)峰如圖1、圖2所示。

圖1 敵百蟲譜圖

圖2 敵敵畏譜圖

分別添加與標(biāo)準(zhǔn)方法相同濃度的敵百蟲、敵敵畏待測(cè)農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液，改進(jìn)的方法選用乙腈作為提取劑的前處理方法，上機(jī)溶液的質(zhì)譜譜圖，如圖3、圖4所示。

經(jīng)試驗(yàn)得乙腈和二氯甲烷提取效率較高，但二氯甲烷提取的共提物較多，雜質(zhì)干擾大，由圖2可以看出。因此，實(shí)驗(yàn)選擇乙腈作為提取溶劑。

圖3 敵百蟲譜圖

圖4 敵敵畏譜圖

4 結(jié)論

采用優(yōu)化的方法測(cè)定水產(chǎn)品中的敵敵畏、敵百蟲含量，降低了檢測(cè)成本、提高工作效率[4]。該方法的重現(xiàn)性和穩(wěn)定性好，與標(biāo)準(zhǔn)方法相比，測(cè)定結(jié)果無(wú)明顯差異，適合于水產(chǎn)品中的敵敵畏、敵百蟲含量的檢測(cè)，具有一定的應(yīng)用和推廣價(jià)值。

[1]王海燕，夏勇．超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜同時(shí)測(cè)定水中的敵敵畏和敵百蟲[J]．中國(guó)環(huán)境監(jiān)測(cè)，2014，30(6)：154-158．

[2]王 ，梁穎，沈燕，等．液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法監(jiān)測(cè)黃瓜中5種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留[J]．南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2012，35(1)：45-50．

[3]Arao T， Fuke C， Takaesu H， et al．A case of fatal trichlorfon and methidathion poisoning[J]．Legal Medicine，2002，4(3)：182-186．

[4]黃冬梅，蔡友瓊，于慧娟，等．液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定南美白對(duì)蝦中敵百蟲、敵敵畏殘留量[J]．中國(guó)漁業(yè)質(zhì)量與標(biāo)準(zhǔn)，2012，2(3)：51-54．