趙鵬鵬，韓學(xué)利，沈潔娜，張丹輝，潘廣林，張 強(qiáng)，侯 佳，馬清義，高更更，張國(guó)士

(1.陜西省珍稀野生動(dòng)物搶救飼養(yǎng)研究中心，陜西周至 710402；2.西北農(nóng)林科技大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，陜西楊凌 712100)

專(zhuān)論與講座

大熊貓犬瘟熱的診治及預(yù)防對(duì)策

趙鵬鵬1，韓學(xué)利1，沈潔娜1，張丹輝1，潘廣林1，張 強(qiáng)1，侯 佳1，馬清義1，高更更1，張國(guó)士2*

(1.陜西省珍稀野生動(dòng)物搶救飼養(yǎng)研究中心，陜西周至 710402；2.西北農(nóng)林科技大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，陜西楊凌 712100)

犬瘟熱是由犬瘟熱病毒引起的犬等肉食動(dòng)物、鼬科、大熊貓科等多種動(dòng)物急性接觸性傳染病，在世界范圍內(nèi)廣泛發(fā)生。2014年—2015年陜西圈養(yǎng)大熊貓突發(fā)犬瘟熱，按照犬瘟熱病毒(CDV)檢測(cè)陰性個(gè)體、陽(yáng)性個(gè)體和臨床發(fā)病個(gè)體對(duì)大熊貓進(jìn)行分組并采取治療和隔離預(yù)防措施。其中所有CDV陰性個(gè)體疏散轉(zhuǎn)移后，經(jīng)嚴(yán)格防疫并接種疫苗，得到預(yù)期防疫效果；1只CDV抗體陽(yáng)性的個(gè)體經(jīng)沖擊治療轉(zhuǎn)為陰性;5只臨床發(fā)病個(gè)體未取得預(yù)期療效，全部死亡。綜合有記載的大熊貓感染犬瘟熱病例說(shuō)明，對(duì)于大熊貓犬瘟熱發(fā)病個(gè)體的搶救，治愈率幾乎為零。研發(fā)安全有效的犬瘟熱疫苗進(jìn)行免疫接種是目前保護(hù)圈養(yǎng)大熊貓免受犬瘟熱病毒感染的唯一方法。

大熊貓;犬瘟熱;診斷;預(yù)防

犬瘟熱(Canine distemper，CD)病原為隸屬于副黏病毒科麻疹病毒屬的犬瘟熱病毒(Canine distemper virus，CDV)，屬于單鏈RNA病毒。在室溫下該病毒相對(duì)不穩(wěn)定，尤其是對(duì)紫外線(xiàn)、干燥及50℃～60℃以上高溫敏感。在冷凍條件下，該病毒可存活數(shù)周。多數(shù)常規(guī)消毒均可將其殺滅[1]。犬瘟熱以復(fù)相熱、急性鼻卡他以及隨后的支氣管炎、卡他性肺炎、嚴(yán)重的胃腸炎和神經(jīng)癥狀為特征。本病一年四季都有發(fā)生，自然發(fā)病雪貂病死率達(dá)100%[2]。CDV的自然宿主從最初的犬科動(dòng)物不斷擴(kuò)大至貓科、鬣狗科、鼬科、浣熊科、熊科、靈貓科、熊貓科和臭鼬科動(dòng)物[3-4]。野生動(dòng)物老虎、獅子、豹和海豹等，甚至一些珍稀物種如大熊貓、小熊貓等都暴發(fā)過(guò)犬瘟熱。1983年張振興等[5]報(bào)道犬瘟熱病毒感染導(dǎo)致2只大熊貓死亡。1997年王艾平等[6]報(bào)道重慶動(dòng)物園3只大熊貓發(fā)生犬瘟熱, 造成2只死亡。CDV自然感染非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物獼猴和食蟹猴也有報(bào)道[7-8]。人變形性骨炎患者體內(nèi)檢測(cè)到CDV的核酸[9]，提示犬瘟熱有可能成為人獸共患傳染病，該病引起了國(guó)內(nèi)外學(xué)者的高度關(guān)注。

本病主要通過(guò)飛沫傳播，發(fā)病動(dòng)物的眼、鼻漿性分泌物中含有大量病毒，與病畜同舍的易感動(dòng)物無(wú)法免受傳染?；疾?dòng)物糞便中含有病毒，可通過(guò)污染工具、場(chǎng)所傳播本病。圈舍、運(yùn)動(dòng)場(chǎng)、管理房等患病動(dòng)物直接或間接污染的場(chǎng)所均有病毒存留[10]。

1 發(fā)病情況

2014年12月—2015年3月，陜西圈養(yǎng)大熊貓有6只感染犬瘟熱病毒，造成5只死亡,詳細(xì)情況見(jiàn)表1。結(jié)合文獻(xiàn)統(tǒng)計(jì)，大熊貓感染犬瘟熱年齡段為6歲～29歲之間(重慶有29歲個(gè)體發(fā)病)，發(fā)病年齡在2歲～29歲之間(424號(hào)大熊貓2歲發(fā)病)。雌、雄動(dòng)物均可感染(陜西發(fā)病個(gè)體以雌性居多，可能與雌性大熊貓集中在一個(gè)區(qū)域飼養(yǎng)有關(guān))。感染發(fā)病與年齡和性別無(wú)關(guān)。發(fā)病時(shí)間以12月份至次年6月份為多，疫病發(fā)生不受氣溫高低影響。病程3 d～35 d。發(fā)病急，病程相對(duì)較短,病程時(shí)間的延續(xù)與對(duì)癥治療的效果有關(guān)。發(fā)病間隔時(shí)間為4 d～42 d。5號(hào)個(gè)體于2014年12月24日檢出CDV抗原陽(yáng)性并進(jìn)行治療，2015年1月5日～2月17日檢測(cè)一直為CDV陰性，是否說(shuō)明犬瘟熱發(fā)病潛伏期更長(zhǎng)，值得進(jìn)一步探討。

2 診斷

2.1 臨床癥狀

表1 感染犬瘟熱大熊貓個(gè)體信息表

注：+陽(yáng)性；-陰性。

Note： +Positive;-Negative.

發(fā)病個(gè)體臨床初期癥狀主要表現(xiàn)為突然倒地并劇烈抽搐，口吐白沫，呈癲癇樣癥狀[11]。神經(jīng)癥狀稍有緩解后側(cè)臥或蹲坐時(shí)點(diǎn)頭姿勢(shì)，牙齒打顫，牽唇似笑，呼吸急促并出現(xiàn)腹式呼吸。抽搐間歇后有輕微飲水、采食飼料行為和交流意識(shí)，前掌握食物困難，不能隨意送食物入口。隨病程發(fā)展，抽搐間隔時(shí)間由約每4 h發(fā)作一次逐漸頻繁至10 min一次，牙關(guān)緊閉，食欲廢絕。至發(fā)病次日躺臥不起，意識(shí)消失。眼結(jié)膜潮紅、流淚并在眼角形成漿液性分泌物。鼻鏡、足墊逐漸出現(xiàn)干裂并加重。發(fā)病后期鼻鏡、足墊干裂潰爛?？谇弧⒈乔缓脱劢Y(jié)膜發(fā)炎，眼瞼水腫[12]。糞便呈醬油色糊狀稀便、惡臭，不能自主排便。尿液黏稠呈暗褐色，有腥味。發(fā)病初期體溫在37.5℃～40.5℃之間 ,中期維持在38℃～39℃左右, 后期體溫出現(xiàn)低溫37.5℃和高熱40℃的不穩(wěn)定熱相。

2.2 病理剖檢

心包積液、心肌肥大、冠狀溝及心內(nèi)膜點(diǎn)狀出血。肝腫大,出現(xiàn)大小不一土黃色壞死灶，質(zhì)脆，邊緣鈍圓。膽囊萎縮，膽汁黏稠，呈煤焦油色。脾臟腫大，切口外翻。肺臟色澤暗淡不一，肺切面有大量呈暗褐色血液流出，切面灰白。胃腸道黏膜嚴(yán)重脫落、出血,內(nèi)容物呈絮狀褐色。腸系膜淋巴結(jié)水腫。腦血管和腦硬膜充血水腫, 腦膜有出血點(diǎn)、出血斑，腦組織有水腫現(xiàn)象，腦室輕度積液。

病程較長(zhǎng)的個(gè)體皮膚出現(xiàn)水皰樣或膿皰性皮炎，掌墊表面角質(zhì)層增生，掌墊增厚并有潰爛及膿汁滲出。

2.3 實(shí)驗(yàn)室檢查

2.3.1 快速檢測(cè) 采用韓國(guó)產(chǎn)瑞必診犬瘟熱病毒抗原快速診斷檢測(cè)試紙，用棉拭子采集待檢大熊貓鼻腔或口腔黏液按照說(shuō)明進(jìn)行檢測(cè)[13]。

2.3.2 犬瘟熱病毒RT-PCR檢測(cè) 采集大熊貓口鼻棉拭子、血液樣品進(jìn)行處理提取RNA。通過(guò)反轉(zhuǎn)錄獲得cDNA。以提取的基因組為模版，采用鑒定引物進(jìn)行聚合酶鏈反應(yīng)，同時(shí)采用標(biāo)準(zhǔn)毒株作為陽(yáng)性對(duì)照，設(shè)置陰性對(duì)照以檢測(cè)試劑是否可用。對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳并進(jìn)行結(jié)果判定[14]。

2.3.3 CT、MRI檢查 對(duì)1例發(fā)病初期大熊貓進(jìn)行CT、MRI腦部及全身軀干掃描，腦部未發(fā)現(xiàn)實(shí)質(zhì)性病變，肺部有明顯病變。排除癲癇，考慮傳染性疫病。

大熊貓犬瘟熱臨床初期與常規(guī)癲癇癥、狂犬病、犬細(xì)小病毒感染等疾病臨床癥狀極為相似，單獨(dú)依靠臨床表現(xiàn)很難確診。發(fā)病大熊貓中，除極個(gè)別有前期食欲減退等異常表現(xiàn)外，絕大多數(shù)個(gè)體一開(kāi)始都表現(xiàn)典型的神經(jīng)癥狀即癲癇樣癥狀。眼角分泌物增多和典型的掌墊龜裂潰爛，也是大熊貓犬瘟熱的典型示病癥狀。各種品牌的CDV快速檢測(cè)試紙僅可作為平時(shí)預(yù)防性檢測(cè)的一種方法，在發(fā)病前1 d～2 d內(nèi)可檢測(cè)出CDV抗原陽(yáng)性，是一種相對(duì)簡(jiǎn)便的診斷手段，但有其局限性。采用臨床癥狀結(jié)合犬瘟熱病毒RT-PCR不難確診。

3 治療

3.1 特異性治療

首先用高免血清，輔助犬瘟熱免疫球蛋白，大劑量多點(diǎn)注射；口服轉(zhuǎn)移因子，增強(qiáng)個(gè)體免疫力。用高免血清以起到快速抑制病毒作用，配合使用犬瘟熱免疫球蛋白等沖擊治療對(duì)于提高機(jī)體保護(hù)力具有十分重要的意義。對(duì)臨床發(fā)病個(gè)體只能起到延緩病癥發(fā)生的作用，為臨床治療能爭(zhēng)取一定時(shí)機(jī)。5號(hào)個(gè)體首次檢測(cè)CDV陽(yáng)性后經(jīng)沖擊治療后檢測(cè)呈CDV陰性，然而又突發(fā)病癥并死亡，是陽(yáng)性個(gè)體轉(zhuǎn)陰后一個(gè)病例，可能與機(jī)體抵抗力下降導(dǎo)致病毒反撲有關(guān)。3號(hào)個(gè)體與2號(hào)個(gè)體同圈舍飼養(yǎng)，當(dāng)2號(hào)個(gè)體檢出CDV抗原陽(yáng)性10 d后,3號(hào)個(gè)體才檢出CDV抗原陽(yáng)性并及時(shí)轉(zhuǎn)移，由于懷疑3號(hào)個(gè)體可能感染CDV,及時(shí)采取了沖擊療法，3號(hào)個(gè)體發(fā)病出現(xiàn)的神經(jīng)癥狀強(qiáng)度較其他發(fā)病個(gè)體明顯較輕，出現(xiàn)癥狀后3 d內(nèi)還可自主采食竹子等飼料，表明沖擊療法具有一定效果。

3.2 對(duì)癥治療

解除抽搐，使用苯妥英鈉注射液、安宮牛黃丸；消炎止痢，注射頭孢曲松鈉注射液、阿米卡星注射液、阿昔洛韋注射液等；降溫退燒，使用安痛定注射液、柴胡注射液，靜脈注射清開(kāi)靈或雙黃連注射液[15]；止血，維生素K注射液、白眉蛇毒凝血酶注射液肌肉注射。

苯妥英鈉等抗癲癇藥物的使用對(duì)于減緩神經(jīng)癥狀的作用不太明顯。發(fā)病前使用安宮牛黃丸結(jié)合大劑量免疫球蛋白使用對(duì)于延緩神經(jīng)癥狀的出現(xiàn)和強(qiáng)度具有一定的作用。

3.3 支持療法

補(bǔ)充體液營(yíng)養(yǎng)：靜脈注射葡萄糖注射液、氨基酸注射液、脂肪乳注射液、9 g/L氯化鈉注射液；補(bǔ)充維生素C、復(fù)合維生素B；調(diào)節(jié)機(jī)體離子平衡，主要是K和Ca離子，防止神經(jīng)紊亂；保肝護(hù)肝，注射肝復(fù)欣注射液；糾正酸堿平衡：注射碳酸氫鈉注射液；對(duì)于發(fā)病動(dòng)物的支持療法要注意心肺肝腎功能的保護(hù)，大劑量輸液易造成心肺肝腎功能衰竭。采用灌腸或胃管灌服與靜脈給藥交替使用能較好的減輕由于用藥造成的各種器官損傷。

發(fā)病大熊貓治療沒(méi)有特效的治療方法。做好未發(fā)病個(gè)體的隔離防疫是控制疫病發(fā)生的關(guān)鍵。

4 預(yù)防對(duì)策

4.1 緊急消毒, 嚴(yán)格封鎖

疫病發(fā)生后，對(duì)患病動(dòng)物圈舍、污染物及園區(qū)用30 g/L氫氧化鈉溶液消毒和火焰消毒；園區(qū)封閉，禁止人員出入；與發(fā)病動(dòng)物接觸的獸醫(yī)、飼養(yǎng)人員緊急隔離[16]；安排專(zhuān)職人員負(fù)責(zé)后勤保障。

4.2 分類(lèi)劃區(qū)，緊急疏散，加強(qiáng)飼養(yǎng)

根據(jù)與患病個(gè)體地理位置遠(yuǎn)近，按照患病個(gè)體、可疑個(gè)體、健康個(gè)體分類(lèi)劃區(qū)管理；同時(shí)劃定后勤保障人員及機(jī)動(dòng)車(chē)輛類(lèi)別，避免交叉污染；實(shí)行“一貓一舍一人”飼養(yǎng)管理，管理人員實(shí)行包片負(fù)責(zé)防疫消毒、巡查監(jiān)督等工作；設(shè)置各區(qū)域卡口，強(qiáng)制消毒；建立人員消毒程序，進(jìn)崗消毒洗澡更衣；著防護(hù)服喂養(yǎng)和接觸大熊貓；加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，降低應(yīng)激反應(yīng)，做好冬季保暖、夏季防暑、驅(qū)蚊滅蠅滅鼠，供應(yīng)優(yōu)質(zhì)飼料，增強(qiáng)動(dòng)物體質(zhì)[17]。嚴(yán)格控制流浪貓犬等進(jìn)入飼養(yǎng)區(qū)域。

4.3 疫情監(jiān)測(cè)

每日對(duì)所有個(gè)體進(jìn)行CDV快速檢測(cè)，對(duì)照觀(guān)察特征行為如掌墊、眼角分泌物、抽搐等掌握動(dòng)物動(dòng)態(tài)。每10 d對(duì)所有個(gè)體進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室CDV檢測(cè)；通過(guò)每只個(gè)體每日糞便量變化趨勢(shì)反映健康狀況，對(duì)因運(yùn)輸?shù)葞?lái)的應(yīng)激反應(yīng)和體況下降，及時(shí)糾正管理方式；對(duì)飼養(yǎng)區(qū)域、辦公區(qū)域、各消毒點(diǎn)采樣檢測(cè)環(huán)境中CDV及細(xì)菌含量。通過(guò)檢測(cè)結(jié)果反映消毒防疫的有限性，指導(dǎo)消毒方式和消毒藥品的選擇，制定有效的消毒程序；對(duì)周邊犬只進(jìn)行采樣檢測(cè)，排查周?chē)鶦DV疫病傳播的可能。

4.4 易感動(dòng)物疫苗接種

待CDV檢測(cè)陽(yáng)性個(gè)體轉(zhuǎn)陰，1～2個(gè)潛伏期后實(shí)施疫苗注射，選用美國(guó)Recombitek品牌犬源性犬瘟熱基因重組疫苗對(duì)CDV陰性大熊貓個(gè)體及區(qū)域內(nèi)易感動(dòng)物進(jìn)行緊急接種[18-21]。6號(hào)個(gè)體雖然表現(xiàn)為CDV抗原陽(yáng)性，但由于曾在2013年注射過(guò)美國(guó)雪貂源性犬瘟熱基因重組苗，實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)抗體水平達(dá)28，對(duì)機(jī)體保護(hù)力較好，未發(fā)生臨床表現(xiàn)，沖擊治療后CDV抗原檢測(cè)陰性。其他CDV陰性個(gè)體選用該疫苗注射后，未見(jiàn)不良反應(yīng)，安全性較高，并逐步產(chǎn)生抗體。

另一未檢出CDV抗原、從未接種過(guò)疫苗的大熊貓個(gè)體抗體檢測(cè)水平達(dá)28。由免疫母犬出生的幼犬可從初乳獲得犬瘟熱病毒抗體被動(dòng)免疫，該個(gè)體有可能通過(guò)母源抗體被動(dòng)免疫。

開(kāi)展飼養(yǎng)區(qū)域內(nèi)及其周?chē)赘袆?dòng)物如小熊貓、黑熊、流浪貓犬免疫工作。

4.5 污物無(wú)害化處理

糞便、食物殘留包裝運(yùn)輸至指定地點(diǎn)焚燒生石灰覆蓋。圈舍地面消毒液浸泡后作用10 min清水沖洗晾干。死亡大熊貓尸體距離飼養(yǎng)區(qū)域3 km外焚燒后覆蓋生石灰深埋。

5 小結(jié)

大熊貓對(duì)犬瘟熱的高度易感性和發(fā)病急、病死率極高的發(fā)病特點(diǎn)，說(shuō)明犬瘟熱已經(jīng)成為威脅大熊貓種群安全的第一大烈性傳染病。到目前為止，對(duì)于該病尚無(wú)特異性的治療方法，早期有效預(yù)防尤為重要。

國(guó)內(nèi)外預(yù)防CDV等傳染病疫苗有很多，但無(wú)一種專(zhuān)門(mén)用于預(yù)防大熊貓傳染病的疫苗。各大熊貓繁育機(jī)構(gòu)受各種條件限制，致使疫苗品牌多樣，免疫標(biāo)準(zhǔn)不一。隨著我國(guó)大熊貓圈養(yǎng)種群逐年擴(kuò)大，傳染性疫病預(yù)防愈來(lái)愈成為決定圈養(yǎng)大熊貓種群安全的重要環(huán)節(jié)，問(wèn)題亟待解決。制定大熊貓疫病防控預(yù)警機(jī)制，完善傳染性疫病的監(jiān)測(cè)系統(tǒng)，加強(qiáng)大熊貓專(zhuān)用疫苗研發(fā)，預(yù)防傳染病對(duì)大熊貓的侵襲，具有非常重要的意義。

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Diagnosis,TreatmentandPreventionofCanineDistemperinGiantPandas

ZHAO Peng-peng1,HAN Xue-li1,SHEN Jie-na1,ZHANG Dan-hui1,PAN Guang-lin1,ZHANG Qiang1,HOU Jia1,MA Qing-yi1,GAO Geng-geng1,ZHANG Guo-shi2

(1.ShaanxiRareAnimalRescueandBreedingResearchCenter,Zhouzhi,Shaanxi,710402,China;2.CollegeofVeterinaryMedicine,NorthwestA&FUniversity,Yangling,Shaanxi,712100,China)

Canine distemper is an acute,highly contagious and septic infection caused by the canine distemper virus,which occurs widely in the world in dogs,carnivores,mustelidae and the giant panda family.During 2014 to 2015.There are several captive giant pandas in Shaanxi province infected with this virus.All the morbid and apparently healthy pandas were transfered and organized into negative,positive and onset groups,isolating and having different treatments.All the pandas in negative group were vaccinated and the expected results of epidemic prevention came true.One femal panda carried CDV antibodies was CDV-positive in virus test,Nevertheless,the CDV test converted into negative after impact therapy.It was failed to save five morbid pandas,they all died.Clinical curative rate of morbid pandas was almost zero.Therefore,seeking one safe and secure CDV vaccine until now is the only way to protect the captive pandas against canine distemper virus infection.

giant panda;Canine distemper;diagnosis;prevention

2016-09-20

趙鵬鵬(1979-)，男，寧夏隆德人，獸醫(yī)師，碩士，主要從事野生動(dòng)物飼養(yǎng)繁育和疾病防治工作。*

S852.659.6;S858.9

:A

:1007-5038(2017)09-0115-04