尓麗綿,吳明利,李 勇,譚碧波,高 揚,王順平,丁 妍,楊會釵
低增殖活性胃腸神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤組織中IMP3的表達及意義
尓麗綿1,吳明利1,李 勇2,譚碧波2,高 揚1,王順平1,丁 妍3,楊會釵3
目的 探討胰島素樣生長因子Ⅱ mRNA結(jié)合蛋白3(insulin-like growth factor ⅡmRNA binding protein 3, IMP3)在低增殖活性胃腸神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤(gastrointestinal neuroendocrine tumor, GI-NET)組織中的表達及意義。方法 采用免疫組化法檢測IMP3在GI-NET中的表達,并復(fù)習(xí)相關(guān)文獻。結(jié)果 IMP3在GI-NET細胞質(zhì)中的表達,陽性率為67.5%(81/120),增殖分級G1及G2中陽性率分別為61.9%、80.5%,兩組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.046);IMP3過表達與腫瘤大小及微創(chuàng)治療預(yù)后相關(guān)(P<0.05),腫瘤浸潤至黏膜下層以下組中IMP3表達亦高于局限于黏膜層組,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論 IMP3可能在GI-NET的增殖生長中起重要作用。IMP3蛋白可能成為GI-NET的內(nèi)鏡診療效果及預(yù)后評價的指標(biāo)。
胃腫瘤;胃腸神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤;IMP3;內(nèi)鏡
胰島素樣生長因子Ⅱ mRNA結(jié)合蛋白3(insulin-like growth factor Ⅱ mRNA binding protein 3, IMP3)是一種具有高度保守性的mRNA結(jié)合蛋白,在正常成人體內(nèi)通常檢測不到,但在胚胎期水平較高,對胚胎的發(fā)育有一定的促進作用。病理狀態(tài)下,IMP3表達與多種惡性腫瘤相關(guān)[1],其與胃腸神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤(gastrointestinal neuroendocrine tumor, GI-NET)的關(guān)系尚未見報道。為探討IMP3在分化良好的低增殖活性GI-NET中的表達,本實驗采用免疫組化法檢測經(jīng)內(nèi)鏡切除或活檢GI-NET組織中IMP3的表達,并進一步結(jié)合內(nèi)鏡下形態(tài)及術(shù)后病理分析在預(yù)后良好的GI-NET中IMP3的預(yù)警作用,進一步分析IMP3與GI-NET生物學(xué)特性的相關(guān)性。
1.1 材料 收集2006年1月~2014年12月河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院收治的資料完整、診斷明確的GI-NET患者120例,男性59例,女性61例,年齡19~79歲,平均(52±12.5)歲,108例接受內(nèi)鏡微創(chuàng)切除術(shù),9例手術(shù),3例姑息治療。納入及排除標(biāo)準(zhǔn):所選病例均為病理免疫組化證實為GI-NET,且依據(jù)WHO胃腸胰神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤的診斷及分級標(biāo)準(zhǔn)[3]符合病理增殖分級G1、G2。排除并發(fā)其他腫瘤及接受過放、化療的患者。排除內(nèi)鏡切除切緣陽性患者。記錄所有患者的年齡、性別、腫瘤的功能狀態(tài)、發(fā)生部位、分級(G1、G2級)、轉(zhuǎn)移情況及治療方法等。本實驗通過醫(yī)院倫理委員會審核,所有入選患者及健康體檢者均簽署知情同意書。
1.2 免疫組化 標(biāo)本均經(jīng)10%中性福爾馬林固定,常規(guī)石蠟包埋,4 μm厚切片,HE染色,光鏡觀察,免疫組化采用SP兩步法。石蠟標(biāo)本常規(guī)切片,脫蠟至水后,于抗體修復(fù)液中微波修復(fù),詳細步驟按試劑說明書進行。染色設(shè)已知陽性對照,陰性對照用PBS替代,DAB顯色,蘇木精對比染色。免疫組化抗體IMP3稀釋比為1 ∶100,購自美國Immuway公司,IMP3陽性為細胞質(zhì)呈棕黃色。將陽性染色細胞數(shù)>30%記為陽性。
2.1 臨床及內(nèi)鏡下病理特征 120例GI-NET中男性59例,女性61例,年齡19~79歲,平均年齡(52±12.5)歲,增殖分級G1期84例,G2期36例。GI-NET多位于胃及直腸(113/120),腫瘤直徑多<2 cm(111/120),內(nèi)鏡下形態(tài)多表現(xiàn)為黏膜下腫物(89/120),其次為息肉型及平坦充血型。120例均有完整隨訪資料,隨訪時間截至2015年6月,中位隨訪時間40個月(7~99個月)。
2.2 IMP3在GI-NET中的表達 IMP3主要表達于細胞質(zhì),在部分細胞胞核中也有表達(圖1)。GI-NET中IMP3的陽性率為67.5%%(81/120),其中G1期為61.9%,G2期為80.5%,兩組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.046)。
圖1 GI-NET中IMP3呈胞質(zhì)彌漫強陽性,SP兩步法
2.3 IMP3表達與GI-NET臨床及內(nèi)鏡下病理特征之間的關(guān)系 IMP3表達與患者性別、年齡及浸潤深度無明顯相關(guān)(P=0.647、0.237、0.064),而與腫瘤的增殖分級、腫瘤大小及內(nèi)鏡微創(chuàng)治療預(yù)后存在相關(guān)關(guān)系:即IMP3陽性率隨腫瘤分級的增高而增高(P=0.046)。瘤體直徑>2 cm的IMP3表達高于瘤體直徑≤2 cm組,內(nèi)鏡微創(chuàng)治療復(fù)發(fā)組中IMP3表達明顯增高(表1)。
神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤(neuroendocrine neoplasm, NEN)是一組來源神經(jīng)內(nèi)分泌細胞的少見腫瘤,這些腫瘤在神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)志物的表達和生長形式上有一些共同特點,他們可以分泌多肽從而引起激素分泌綜合征[2-3]??砂l(fā)生于全身許多器官和組織,其中以胃腸胰NEN最為常見。在WHO(2010)分類[4]中NEN根據(jù)組織學(xué)和增殖活性分為神經(jīng)內(nèi)分泌瘤(neuroendocrine tumors, NET)、神經(jīng)內(nèi)分泌癌(neuroendocrine carcinoma, NEC)和混合型神經(jīng)內(nèi)分泌腺癌。G1級和G2級歸為NET范疇。GI-NET即上述分級中的NET G1及G2,是一類發(fā)生于胃腸道、Ki-67增殖活性較低(<20%)的NEN。多為無功能性,呈惰性生長。GI-NET起源于胃腸黏膜Lieberkuhn隱窩深部腸嗜鉻樣細胞(Kulchitsky),該細胞來源于胚胎神經(jīng)嵴,是胃腸道中分布最廣、數(shù)量最多的神經(jīng)內(nèi)分泌細胞,可以分泌5-羥色胺、組胺、緩激肽、激肽釋放酶和前列腺素等20余種物質(zhì),引起皮膚潮紅、腹瀉、腹痛、呼吸困難、心血管異常等臨床綜合征,即類癌綜合征。文獻報道[5]GI-NET類癌綜合征發(fā)生率不足10%。本組120例患者均未出現(xiàn)類癌綜合征癥狀;GI-NET生長緩慢,臨床上主要表現(xiàn)為非特異的消化系統(tǒng)癥狀,早期不易發(fā)現(xiàn)并診斷。
表1 IMP3表達與胃腸神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤臨床病理特征的關(guān)系
*Fisher檢驗
GI-NET術(shù)前超聲內(nèi)鏡檢查可以確定腫瘤大小、浸潤深度、周圍鄰近臟器有無侵犯以及周圍有無腫大的淋巴結(jié),對于腫瘤術(shù)前分期、臨床選擇治療方式可以提供很好的指導(dǎo)作用[6-7],可明確病變浸潤層次更為安全有效的指導(dǎo)內(nèi)鏡下切除,如黏膜下層完整,病灶直徑均<2 cm,可采用EMR術(shù),省時且減少并發(fā)癥,如黏膜下層受侵者則采取ESD術(shù),以確保病變被完整切除。本組120例患者均經(jīng)超聲內(nèi)鏡檢查明確病變深度,其中108例接受鏡下切除治療,近年來通過Ki-67陽性指數(shù)及核分裂象數(shù)進行對腫瘤增殖活性的評估。國外學(xué)者對NET的生物學(xué)行為研究發(fā)現(xiàn)腫瘤直徑<1 cm且分化良好者轉(zhuǎn)移率為2%,>1 cm者轉(zhuǎn)移率達3%~8%[8]。既往研究大多提示直徑<2 cm且未見淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的GI-NET胃鏡治療安全有效[9],這與我們的研究結(jié)果一致,本組中3例轉(zhuǎn)移患者腫瘤直徑均>2 cm。108例接受內(nèi)鏡下切除術(shù)患者隨訪7~99個月,23例患者再次追加鏡下治療。
IMP3是一種癌胚蛋白,可表達于人類多種腫瘤的細胞質(zhì),而在癌旁正常組織中幾乎不表達,是腫瘤細胞增殖以及轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵因素之一[10-11]。IMP3可間接調(diào)控IGF-Ⅱ基因表達,而IGF-Ⅱ通過激活和結(jié)合IGFI受體使酪氨酸激酶氧化磷酸化,氧化磷酸化的IGFI受體再將促有絲分裂的信號傳到細胞內(nèi),促進腫瘤細胞有絲分裂、抑制凋亡[12]。近年來文獻報道[13-14]顯示,IMP3表達與原發(fā)性消化道腫瘤、肺癌、腎癌、惡性間皮瘤等相關(guān),并且提示遠處癌轉(zhuǎn)移的可能性和不良的預(yù)后。Del Gobbo等[15]對76例肺NEN進行觀察,發(fā)現(xiàn)IMP3與肺NEN預(yù)后相關(guān),并與Ki-67增殖指數(shù)分級相關(guān),>4%的非典型NEN復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移率較高。
綜上表明,IMP3可能在腫瘤浸潤和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用。對本組內(nèi)鏡切除或活檢的NET組織,通過免疫組化檢測腫瘤組織中IMP3表達,發(fā)現(xiàn)IMP3在G2期GI-NET中IMP3陽性率高于G1期GI-NET,進一步結(jié)合內(nèi)鏡下形態(tài)及術(shù)后病理分析發(fā)現(xiàn)GI-NET組織內(nèi)IMP3的表達與腫瘤大小相關(guān),腫瘤浸潤至黏膜下層組中IMP3表達也呈升高趨勢,由此推測IMP3蛋白可能在NET的增殖及侵襲中起著某種至關(guān)重要的作用。且在內(nèi)鏡微創(chuàng)隨訪中發(fā)現(xiàn)微創(chuàng)治療復(fù)發(fā)再次治療組中IMP3陽性率高于隨訪無明顯變化組。由此推測IMP3或許可能成為GI-NET的內(nèi)鏡診療效果及預(yù)后評價的指標(biāo),這有待于大樣本臨床內(nèi)鏡治療病例的積累及長期的臨床觀察。
[1] Okada K, Fujiwara Y, Nakamura Y,etal. Oncofetal protein, IMP-3, a potential marker for prediction of postoperative peritoneal dissemination in gastric adenocarcinoma[J]. J Surg Oncol, 2012,105(8):780-785.
[2] Modlin I M, Shapiro M D, Kidd M. Siegfried oberndorfer: origins and perspectives of carcinoid tumors[J]. Hum Pathol, 2014,35(12):1440-1451.
[3] Obeg K E. Gastrintestinal neuroendocrine tumors[J]. Ann Oncol, 2010,21 Suppl 7:Vii72-80.
[4] Bosman F T, Carneiro F, Hruban R H,etal. WHO classification of tumours of the digestive system[M]. 4th ed. Lyon: IARC Press, 2010:1-314.
[5] Gustafsson B I, Kidd M, Modlin I M. Neuroendocrine tumors of the diffuse neuroendocrine system[J]. Curr Opin Oncol, 2008,20(1):1-12.
[6] De Angelis C, Manfrè S F, Bruno M,etal. Hegemony and cost-effectiveness of endoscopic ultrasound (EUS) in the field of gastroenteropancreatic-neuroendocrine tumors (GEP-NETs)[J]. Minerva Med, 2014,105(5):363-370.
[7] Zhong D D, Wang C H, Xu J H,etal. Endoscopic ultrasound features of gastric schwannomas with radiological correlation: a case series report[J]. World J Gastroenterol, 2012,18(48):7397-7401.
[8] Spampatti M P, Massironi S, Rossi R E,etal. Unusually aggressive type 1 gastric carcinoid: a case report with a review of the literature[J]. Eur J Gastroenterol Hepatol, 2012,24(5):589-593.
[9] Kwon Y H, Jeon S W, Kim G H,etal. Long-term follow up of endoscopic resection for type 3 gastric NET[J]. World J Gastroenterol, 2013,19(46):8703-8708.
[10] 張亞欣, 蔣 欣, 江 月, 等. 子宮頸鱗狀細胞癌中IMP3表達與MVD的相關(guān)性分析[J]. 臨床與實驗病理學(xué)雜志, 2014,30(9):996-999.
[11] 林黎娟, 蔡英蘭, 金 政, 等. 胰島素生長因子II mRNA結(jié)合蛋白3在胃癌組織中的表達及其意義[J]. 中華普通外科雜志, 2013,28(6):473-474.
[12] Williams C, Hoppe H J, Rezgui D,etal.An exon splice enhancer primes IGF2: IGF2R binding site structure and function evolution[J]. Science, 2012,338(6111):1209-1213.
[13] Lee D J, Xylinas E, Rieken M,etal. Insulin-like growth factor messenger RNA-binding protein 3 expression helps prognostication in patients with upper tract urothelial carcinoma[J]. Eur Urol, 2014,66(2):379-385.
[14] Mhawech-Fauceglia P, Yan L, Liu S, Pejovi T. ER+/PR+/TFF3+/IMP3- immuno-profile distinguishes endometrioid from serous and clear cell carcinomas of the endometrium: a study of 401 cases[J]. Histopathology, 2013,62(7):976-985.
[15] Del Gobbo A, Vaira V, Guerini Rocco E,etal. the oncofetal protein IMP3: a useful marker to predict poor clinical outcome in neuroendocrine tumors of the lung[J]. J Thorac Oncol, 2014,9(11):1656-1661.
·簡 訊·
敬告作者
本刊編輯部收到作者的投稿后,經(jīng)初審符合本刊征稿內(nèi)容者編輯部將及時回復(fù)作者稿件編號;對通過專家審核的稿件,在進行文字和撰寫規(guī)范編輯加工后,發(fā)送“退修意見單”給第一作者;如作者的修回稿符合退修要求,則進入待用狀態(tài)。編輯部將根據(jù)各期中心內(nèi)容遴選稿件,并在排版后用E-mail發(fā)送校對樣稿和繳納版面費通知。編輯部咨詢電話:0551-65161102,投稿郵箱:lcsybl@163.com。
河北省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究重點課題(20160620、ZL2014 0022)
河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院1內(nèi)鏡科、2外三科、3病理科,石家莊 050010
爾麗綿,女,博士,副主任醫(yī)師。E-mail: hbsyelm@163.com 李 勇,男,博士,主任醫(yī)師,通訊作者。E-mail: li_yong_hbth@126.com
時間:2017-8-20 15:27 網(wǎng)絡(luò)出版地址:http://kns.cnki.net/kcms/detail/34.1073.R.20170820.1527.018.html
R 735.2
A
1001-7399(2017)08-0910-03
10.13315/j.cnki.cjcep.2017.08.018
接受日期:2017-03-28