馬 靜，余 州，李明陽，李培峰，李 俠，王 哲，范林妮

轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌中RSK4、CD44及MMP-9的表達(dá)及意義

馬 靜1,2，余 州1,2，李明陽1,2，李培峰1,2，李 俠1,2，王 哲1,2，范林妮1,2

目的 檢測(cè)核糖體S6蛋白激酶4(ribosomal S6 protein kinase 4, RSK4)、CD44和MMP-9在原發(fā)性腎細(xì)胞癌(primary renal cell carcinoma, pRCC)及轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌(metastatic renal cell carcinoma, mRCC)中的表達(dá)，探討三者表達(dá)水平及與臨床病理特征的相關(guān)性。方法 采用免疫組化EnVision法檢測(cè)52例pRCC及48例mRCC中RSK4、MMP-9和CD44蛋白的表達(dá)，并分析三者表達(dá)的相關(guān)性及與臨床病理特征的關(guān)系。結(jié)果 48例mRCC中RSK4、CD44及MMP-9的陽性率分別為75%(36/48)、68.75%(33/48)及91.7%(44/48)，而三者在52例pRCC中的陽性率分別為44.2%(23/52)、34.6%(18/52)及69.2%(36/52)。RSK4、CD44及MMP-9在mRCC中的表達(dá)高于pRCC(PRSK4=0.002；PMMP-9=0.002；PCD44=0.001)；RSK4、CD44及MMP-9表達(dá)與mRCC患者年齡、性別和腫瘤Fuhrman分級(jí)、轉(zhuǎn)移部位之間未見明確相關(guān)性(P>0.05)。在mRCC中，三者之間的表達(dá)呈正相關(guān)(P=0.008)；兩兩相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)RSK4與CD44(P=0.019)、MMP-9與CD44(P=0.05)的表達(dá)之間存在正相關(guān)，而RSK4與MMP-9(P=1.00)未見明確相關(guān)性。結(jié)論 RSK4、CD44及MMP-9在mRCC中的表達(dá)高于pRCC，提示三者可能介導(dǎo)腎細(xì)胞癌(renal cell carcinoma, RCC)的轉(zhuǎn)移，而其具體作用機(jī)制尚有待進(jìn)一步研究。

腎腫瘤；轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌；侵襲轉(zhuǎn)移；RSK4；MMP-9；CD44

腎細(xì)胞癌(renal cell carcinoma, RCC)是泌尿系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤之一，早期RCC起病無明顯癥狀，且缺乏特異性的診斷指標(biāo)，導(dǎo)致20%～30%的患者在初次就診時(shí)已出現(xiàn)不同程度的擴(kuò)散或者轉(zhuǎn)移，20%～40%患者術(shù)后仍會(huì)復(fù)發(fā)，且復(fù)發(fā)者預(yù)后較差。因此，探索新的腎癌惡性進(jìn)展相關(guān)分子及新的治療靶點(diǎn)顯得尤為重要。RSK4是核糖體S6蛋白激酶(ribosomal s6 kinase, RSK)家族成員之一[1]，與細(xì)胞的增殖活化及部分腫瘤的轉(zhuǎn)移進(jìn)展有關(guān)。本研究小組前期實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)RSK4在RCC的表達(dá)高于正常腎組織，并且在細(xì)胞研究中發(fā)現(xiàn)，過表達(dá)RSK4的腎癌細(xì)胞侵襲遷移能力增強(qiáng)，同時(shí)，轉(zhuǎn)移相關(guān)分子CD44及MMP-9的表達(dá)也升高[2-3]。但三者在RCC中是否確實(shí)存在相關(guān)性，且其具體作用機(jī)制如何尚不清楚。本實(shí)驗(yàn)采用免疫組化EnVision法同時(shí)分析三種分子在轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌(metastatic renal cell carcinoma, mRCC)和原發(fā)性腎細(xì)胞癌(primary renal cell carcinoma, pRCC)中的表達(dá)及三者之間的相關(guān)性，并分析其與臨床病理特征的關(guān)系，旨在探討三者是否具有促RCC轉(zhuǎn)移的作用，進(jìn)而為RCC的治療及預(yù)后評(píng)估提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 組織標(biāo)本 收集2007～2016年第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院病理科存檔的100例RCC標(biāo)本，其中48例為mRCC(其中3例有原發(fā)灶)，52例為pRCC，患者均查閱臨床資料并進(jìn)行隨訪，均無腎臟及腎外的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移灶。pRCC組平均年齡為54.2歲(19～80歲)，其中男性45例，女性7例，男女比為6.4 ∶1，根據(jù)Fuhrman核分級(jí)進(jìn)行分級(jí)：41例(78.8%)為低分級(jí)(1～2級(jí))，11例(21.2%)為高分級(jí)(3～4級(jí))。根據(jù)AJCC TNM進(jìn)行分期統(tǒng)計(jì)的48例中有47例(97.9%)為低pT分期(pT1及pT2)，1例(2.1%)為高pT分期(pT4)。mRCC組的平均年齡為58.4歲(28～80歲)，其中男性41例，女性7例，男女比為5.9 ∶1。22例為Fuhrman 2級(jí)，10例為Fuhrman 3級(jí)。轉(zhuǎn)移部位包括骨(23例)、軟組織(如大腿、坐骨直腸窩等10例)、肺(6例)、腦(5例)、腎上腺(1例)及膽囊(1例)。同時(shí)對(duì)48例mRCC患者進(jìn)行了隨訪，共獲得29例患者的生存期資料，統(tǒng)計(jì)患者從出現(xiàn)轉(zhuǎn)移至隨訪截止日期的生存時(shí)間，其平均時(shí)間為36個(gè)月(6～99個(gè)月)，隨訪截止日期為2016年10月31日。

1.2 免疫組化及結(jié)果判定 采用免疫組化EnVision法分別檢測(cè)RSK4、MMP-9及CD44在RCC組織中的表達(dá)，染色方法參考文獻(xiàn)[3]：石蠟組織塊4 μm厚連續(xù)切片，常規(guī)脫蠟至水，PBS沖洗3次，RSK4應(yīng)用堿修復(fù)的方法(pH 9.0，Tris-EDTA)進(jìn)行抗原修復(fù)，CD44、MMP-9應(yīng)用酸修復(fù)法(pH 6.0，檸檬酸-檸檬酸鈉溶液)修復(fù)，后用1%H2O2-甲醇作用20 min以消除內(nèi)源性過氧化物酶；5%(m/V)BSA孵育20 min以封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn)，分別加入1 ∶50稀釋的RSK4、1 ∶300稀釋的MMP-9、1 ∶150稀釋的CD44一抗，均為兔抗人單克隆抗體(Sigma公司，美國)，4 ℃孵育過夜；次日37 ℃復(fù)溫1 h，PBS漂洗3次，加入EnVision(Dako公司，丹麥)二抗室溫孵育40 min，PBS清洗3次后DAB顯色，蘇木精復(fù)染，脫水封固。同時(shí)用同種非免疫動(dòng)物血清及PBS代替一抗分別作陰性對(duì)照及空白對(duì)照。陽性結(jié)果為棕黃色顆粒，RSK4陽性定位于胞質(zhì)，MMP-9陽性為彌漫表達(dá)于細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞間隙中的棕黃色顆粒，CD44陽性定位于細(xì)胞膜。根據(jù)文獻(xiàn)[4]對(duì)染色結(jié)果進(jìn)行半定量分析：每張切片從陽性細(xì)胞比例及細(xì)胞著色強(qiáng)度計(jì)分，其中陽性細(xì)胞比例統(tǒng)計(jì)范圍(A)為0～100%；著色強(qiáng)度計(jì)分(B)：無陽性著色為0分，弱著色(呈淡棕黃色)為1分，較強(qiáng)著色(呈棕黃色)為2分，強(qiáng)著色(呈明顯的棕黃色)為3分。然后將兩者相乘，3個(gè)視野求和，即H score=1×a1+2×a2+3×a3，0≤H≤300，經(jīng)統(tǒng)計(jì)，H中位數(shù)為110，故<100為陰性，≥100為陽性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采取R×C列表χ2檢驗(yàn)分析3種抗體在mRCC及pRCC之間的表達(dá)差異性及相關(guān)性，采取χ2檢驗(yàn)3種抗體表達(dá)水平與mRCC臨床病理特征的關(guān)系。采用Kaplan-Meier單因素生存分析檢驗(yàn)RSK4、CD44、MMP-9表達(dá)與mRCC轉(zhuǎn)移后生存期的關(guān)系。所有數(shù)據(jù)均應(yīng)用SPSS 13.0軟件獨(dú)立分析2遍。

2 結(jié)果

2.1 RSK4、CD44、MMP-9蛋白在pRCC及mRCC中的表達(dá) 52例pRCC中，RSK4陽性率為44.2%(圖1A)，F(xiàn)uhrman分級(jí)分別為1級(jí)1例，2級(jí)16例，3級(jí)5例，4級(jí)1例；TNM分期分別為pT1期19例，pT2期2例。CD44陽性率為34.6%(圖1B)，F(xiàn)uhrman分級(jí)分別為2級(jí)14例，3級(jí)3例，4級(jí)1例；TNM分期為pT1期17例。MMP-9陽性率為69.2%(圖1C)，F(xiàn)uhrman分級(jí)分別為1級(jí)1例，2級(jí)24例，3級(jí)9例，4級(jí)2例；TNM分期分別為pT1期27例，pT2期4例，pT4期1例。

48例mRCC中，RSK4陽性率為75%(圖1D)，F(xiàn)uhrman分級(jí)分別為2級(jí)16例，3級(jí)6例；TNM分期分別為pT1期2例，pT2期1例。CD44陽性率為68.75%(圖1E)，F(xiàn)uhrman分級(jí)分別為2級(jí)12例，3級(jí)7例；TNM分期分別為pT1期1例，pT2期1例。MMP-9陽性率為91.7%(圖1F)，F(xiàn)uhrman分級(jí)分別為2級(jí)20例，3級(jí)9例；TNM分期分別為pT1期3例，pT2期1例。

綜上所述，RSK4在mRCC中的陽性率為75%，在pRCC中陽性率為44.2%，兩者相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.002)；CD44在mRCC中的陽性率為68.75%，在pRCC中的陽性率為34.6%，兩組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001)；MMP-9在mRCC中的陽性率為91.7%，在pRCC中陽性率為69.2%，兩組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.002)。RSK4(P=0.002)、CD44(P=0.001)、MMP-9(P=0.002)蛋白在mRCC中的表達(dá)均高于pRCC(表1)。

表1 RSK4、CD44及MMP-9在原發(fā)性腎細(xì)胞癌及 轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌中的表達(dá)

2.2 RSK4、CD44、MMP-9蛋白表達(dá)與mRCC臨床病理特征的關(guān)系 本實(shí)驗(yàn)以58.4歲為平均年齡劃分患者，兩組患者RSK4、CD44和MMP-9陽性率相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(PRSK4=0.094，PCD44=0.482，PMMP-9=0.382，表2)；41例男性患者與7例女性患者中，不同抗體在不同性別之間的表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(PRSK4=0.098，PCD44=0.295，PMMP-9=0.388)；22例Fuhrman 1～2級(jí)mRCC患者與10例Fuhrman 3～4級(jí)患者中，不同抗體在不同F(xiàn)uhrman分級(jí)之間的表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(PRSK4=0.472，PCD44=0.409，PMMP-9=0.935)；不同抗體在不同轉(zhuǎn)移部位之間的表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(PRSK4=0.216，PCD44=0.458，PMMP-9=0.658)，但是可以看出RCC最常見的轉(zhuǎn)移部位為骨組織，其次為軟組織。采用χ2檢驗(yàn)分別分析3種抗體的表達(dá)與患者各臨床病理特征的關(guān)系發(fā)現(xiàn)：RSK4、CD44、MMP-9表達(dá)與患者年齡、性別、腫瘤Fuhrman分級(jí)和轉(zhuǎn)移部位之間未發(fā)現(xiàn)明確相關(guān)性(P>0.05，表2)。

2.3 mRCC中RSK4、CD44及MMP-9蛋白表達(dá)的相關(guān)性分析 在mRCC中，RSK4、CD44及MMP-9的陽性率分別為75%、68.75%及91.7%，統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)三者之間的表達(dá)呈正相關(guān)(P=0.008，圖2)。

①A①B①C①D①E①F②A②B②C

圖1 RSK4、CD44、MMP-9在同一病例的原發(fā)性腎細(xì)胞癌及轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌中的表達(dá)：A.RSK4在原發(fā)性腎細(xì)胞癌中呈胞質(zhì)弱陽性；B.CD44在原發(fā)性腎細(xì)胞癌中呈胞膜弱至中等強(qiáng)度陽性；C.MMP-9在原發(fā)性腎細(xì)胞癌中呈胞質(zhì)弱至中等強(qiáng)度陽性；D.RSK4在轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌中呈胞質(zhì)強(qiáng)陽性；E.CD44在轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌中呈胞膜及胞質(zhì)強(qiáng)陽性；F.MMP-9在轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌中呈胞質(zhì)強(qiáng)陽性，EnVision法 圖2 RSK4、CD44、MMP-9在不同病例轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌中的表達(dá)：A.RSK4呈胞質(zhì)強(qiáng)陽性；B.CD44呈胞膜及胞質(zhì)強(qiáng)陽性；C.MMP-9呈胞質(zhì)強(qiáng)陽性，EnVision法進(jìn)一步兩兩相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，RSK4和CD44(r=0.337，P=0.019)、CD44和MMP-9(r=0.285，P=0.05)之間呈正相關(guān)；而RSK4和MMP-9(r=0.000，P=1.00)無顯著相關(guān)性(表3)。

表2 RSK4、CD44及MMP-9表達(dá)與轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌臨床病理特征的相關(guān)性

表3 RSK4、CD44及MMP-9在轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌中表達(dá)的相關(guān)性

CD44vsRSK4，r=0.337，CD44vsRSK4，P<0.05；MMP-9vsCD44，r=0.285，MMP-9vsCD44，P<0.05；RSK4vsMMP-9，r=0.000，RSK4vsMMP-9，P>0.05

2.4 預(yù)后分析 本組對(duì)獲得隨訪資料的29例mRCC進(jìn)行單因素及多因素生存分析，統(tǒng)計(jì)了自出現(xiàn)轉(zhuǎn)移到隨訪截止日期患者的生存狀況。結(jié)果顯示，29例mRCC的中位時(shí)間為36個(gè)月(6～99個(gè)月)。單因素生存分析發(fā)現(xiàn)，MMP-9的表達(dá)與mRCC患者的轉(zhuǎn)移后生存期相關(guān)(P=0.038)，RSK4和CD44蛋白的表達(dá)以及患者的年齡、性別、Fuhrman分級(jí)和轉(zhuǎn)移部位均尚不能預(yù)測(cè)患者RCC轉(zhuǎn)移后的生存期(P>0.05，表4)。

3 討論

RCC是泌尿系統(tǒng)十分常見的惡性腫瘤之一，其早期診斷比較困難，因此對(duì)發(fā)病及轉(zhuǎn)移機(jī)制進(jìn)行深入研究，探索早期診斷、治療、轉(zhuǎn)移相關(guān)分子以及預(yù)后評(píng)估方法非常必要。首先在病例選取方面，48例mRCC中僅3例與原發(fā)病例一一對(duì)應(yīng)，而其余病例可能由于患者初次未在我院就診等客觀原因未能對(duì)應(yīng)原發(fā)病例，為保證原發(fā)對(duì)照組的客觀性和可對(duì)照性，作者通過隨訪，挑選手術(shù)日期相近、分級(jí)分期相似的病例并且隨訪排除了后續(xù)出現(xiàn)轉(zhuǎn)移的病例作為原發(fā)對(duì)照組。本組通過分析對(duì)比RSK4、CD44和MMP-9在mRCC中的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)mRCC中RSK4、CD44和MMP-9的表達(dá)顯著增強(qiáng)(PRSK4=0.002，PCD44=0.001，PMMP-9=0.002)，進(jìn)一步統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)三者表達(dá)之間呈正相關(guān)(P=0.008)，提示三者在RCC的侵襲轉(zhuǎn)移中可能發(fā)揮作用，在隨后進(jìn)行兩兩比較，發(fā)現(xiàn)CD44與RSK4(P=0.019)、CD44與MMP-9(P=0.05)表達(dá)之間存在正相關(guān)，而MMP-9和RSK4(P=1.00)表達(dá)之間未發(fā)現(xiàn)明顯相關(guān)性。

表4 29例轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌患者復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移單因素生存分析

RSK是一種蛋白激酶，存在于細(xì)胞質(zhì)中直到促有絲分裂的作用使其移位至核中促進(jìn)某些mRNA的翻譯，廣泛參與細(xì)胞的生長和增殖，文獻(xiàn)中曾報(bào)道RSK4在子宮內(nèi)膜癌[5]、卵巢癌[6]及乳腺癌[7]中異常表達(dá)，說明在腫瘤發(fā)生發(fā)展、侵襲轉(zhuǎn)移中存在一定的作用。有文獻(xiàn)報(bào)道RSK通過磷酸化其下游的位點(diǎn)EphA2與肺癌、黑色素膠質(zhì)母細(xì)胞瘤和三陰型乳腺癌等惡性腫瘤的細(xì)胞運(yùn)動(dòng)和促進(jìn)腫瘤惡性進(jìn)展密切相關(guān)[8]。RSK家族的各個(gè)成員在不同組織中擁有不同的表達(dá)水平，說明它們各自不同的功能，而成員之間功能的共性仍然有待研究。RSK4作為RSK家族的新興成員，目前的報(bào)道十分有限，所以具體功能尚不完全明確。本組前期關(guān)于RSK4與RCC的研究中發(fā)現(xiàn)，RSK4可能為RCC潛在的獨(dú)立預(yù)后因子之一，其陽性表達(dá)往往提示RCC患者預(yù)后不良，這些結(jié)果表明RSK4可能是重要的腫瘤促進(jìn)基因，在RCC的發(fā)生和演進(jìn)中起重要作用[2-3]。本組前期實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，RSK4在RCC中的表達(dá)高于正常腎臟，細(xì)胞學(xué)試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)高表達(dá)RSK4的細(xì)胞系其侵襲遷移能力增強(qiáng)，提示其可能促進(jìn)了RCC的轉(zhuǎn)移[2]。本組結(jié)果表明RSK4在mRCC中的表達(dá)高于pRCC，與本組前期的猜想一致，但RSK4的這種促轉(zhuǎn)移的具體機(jī)制尚不清楚。

金屬基質(zhì)酶家族(MMPs)和細(xì)胞表面黏附家族分子家族在腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移中起重要作用。MMP-9是MMPs家族中被最廣泛研究的成員之一，當(dāng)原癌基因(Ras)活化后，會(huì)引起MMP-9轉(zhuǎn)錄子的聚集及后續(xù)MMP-9蛋白的生成，成熟活化的MMP-9可以降解細(xì)胞外基質(zhì)中的明膠，促進(jìn)腫瘤的侵襲遷移。而CD44與其配體的相互作用可以促進(jìn)細(xì)胞對(duì)透明質(zhì)酸的攝取及降解，增加細(xì)胞的遷移能力[9]。在腎癌中，過表達(dá)MMP-9及CD44與患者的不良預(yù)后相關(guān)[10]。另有研究發(fā)現(xiàn)CD44與局限性腎透明細(xì)胞癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)及不良預(yù)后相關(guān)，但具體機(jī)制尚不明確。在本組中mRCC的MMP-9及CD44表達(dá)均高于pRCC，進(jìn)一步提示兩者與RCC的轉(zhuǎn)移可能相關(guān)。但MMP-9陽性的mRCC患者，其轉(zhuǎn)移后的生存期長于MMP-9陰性患者，提示在相同手術(shù)時(shí)間后，MMP-9陽性患者可能更早出現(xiàn)了轉(zhuǎn)移，但該猜想仍需大量的樣本資料進(jìn)一步證明。

mRCC中RSK4、CD44及MMP-9三者的表達(dá)呈正相關(guān)，其中兩兩相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，RSK4與CD44及CD44與MMP-9之間呈正相關(guān)。查閱文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，MMP-9基因的轉(zhuǎn)錄活性及蛋白表達(dá)依賴原癌基因活化的RAS-MEK-ERK信號(hào)通路[11]，而RSK又是ERK下游表達(dá)的激酶，所以猜想RSK通過MER-ERK信號(hào)通路調(diào)節(jié)MMP-9的轉(zhuǎn)錄及表達(dá)。但本組組織學(xué)中未發(fā)現(xiàn)RSK4與MMP-9之間存在明確的相關(guān)性，而與CD44的表達(dá)呈正相關(guān)，因此需要進(jìn)一步進(jìn)行細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)來揭示其關(guān)系。MMP-9可與CD44的胞外結(jié)構(gòu)域結(jié)合，并調(diào)節(jié)CD44自身基因的轉(zhuǎn)錄[12]，Orgaz等[13]報(bào)道MMP-9可以通過CD44增加肌動(dòng)蛋白的收縮力和p-MLC2的水平，從而增加磷酸化STAT3的水平，使MMP-9更高的表達(dá)和分泌，形成一個(gè)正反饋循環(huán)來維持腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移，與本組結(jié)果一致，即MMP-9與CD44之間的表達(dá)存在正相關(guān)性。

隨訪100例RCC患者，并通過免疫組化法對(duì)RCC組織中RSK4、CD44、MMP-9蛋白表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示在mRCC中3種蛋白的表達(dá)明顯增高，且在mRCC和pRCC中三者表達(dá)差異較大(PRSK4=0.002，PCD44=0.001，PMMP-9=0.002)。這些結(jié)果表明RSK4、MMP-9、CD44可能是腎癌轉(zhuǎn)移的促進(jìn)基因，在腫瘤的發(fā)展演進(jìn)中有著重要的作用，而三者組織學(xué)上表達(dá)具有相關(guān)性，其促轉(zhuǎn)移的具體機(jī)制尚需后續(xù)的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步補(bǔ)充，明確上述問題，將有助于為mRCC的診治提供更多的理論基礎(chǔ)。

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Expression of RSK4, CD44 and MMP-9 in metastatic renal cellcarcinoma and its correlation with clinicopathologic features

MA Jing1,2, YU Zhou1,2, LI Ming-yang1,2, LI Pei-feng1,2, LI Xia1,2, WANG Zhe1,2, FAN Lin-ni1,2

(1DepartmentofPathology,FourthMilitaryMedicalUniversity,Xi’an710032,China;2DepartmentofPathology,XijingHospital,FourthMilitaryMedicalUniversity,Xi’an710032,China)

Purpose To investigate the expression of RSK4 (ribosomal S6 protein kinase 4), CD44 and MMP-9 protein in primary renal cell carcinoma (pRCC) and metastatic renal cell carcinoma (mRCC), and to explore the level of expression as well as the association with clinicopathologic features and clinical outcome. Methods The expression of RSK4, CD44 and MMP-9 in 52 pRCC and 48 mRCC samples was detected by immunohistochemistry and its relationship with clinicopathologic features as well as prognosis was analyzed by statistical methods. Results In the 48 mRCC samples, there were 36 (75%, 36/48), 33 (68.75%, 33/48) and 44 (91.7%, 44/48) positive for RSK4, CD44 and MMP-9, respectively, while the positive rate in 52 pRCC samples were 23 (44.2%, 23/52), 18 (34.6%, 18/52) and 36 (69.2%, 36/52), respectively. Statistical analysis showed that the expression of RSK4, CD44 and MMP-9 in mRCC samples was higher than the pRCC samples (PRSK4=0.002,PMMP-9=0.002,PCD44=0.001). Furthermore, the expression of RSK4, CD44 and MMP-9 in mRCC samples was not correlated with ages, genders, Fuhrman grading and the metastatic sites (P>0.05). Further analysis showed that there was positive correlation among the three proteins (P=0.008)， particularly, the expression of RSK4 and CD44 (P=0.019), MMP-9 and CD44 (P=0.05) were positively correlated, while the expression of RSK4 and MMP-9 (P=1.00) had no significance of correlation. Conclusion The expression of RSK4, CD44 and MMP-9 in mRCC samples is significantly higher than pRCC samples, suggesting that the three may mediate the metastasis of renal cell carcinoma, and its specific mechanism of action remains to be further studied.

renal neoplasms; metastatic renal cell carcinoma; invasion and metastasis; RSK4; MMP-9; CD44

國家自然科學(xué)基金(81472402、81272651)

1第四軍醫(yī)大學(xué)病理學(xué)教研室，西安 7100322第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院病理科，西安 710032

馬 靜，女，碩士研究生。E-mail: 854700623@qq.com 范林妮，女，講師，通訊作者。E-mail: fanlinni@fmmu.edu.cn

時(shí)間：2017-8-20 15:27 網(wǎng)絡(luò)出版地址：http://kns.cnki.net/kcms/detail/34.1073.R.20170820.1527.006.html

R 737.11

A

1001-7399(2017)08-0852-06

10.13315/j.cnki.cjcep.2017.08.006

接受日期：2017-05-16