沈利娟 王學(xué)紅 馬臻奇 馬雪芹

(青海大學(xué)附屬醫(yī)院消化科，青海 西寧 810001)

·腫瘤·

胃腺癌組織趨化因子受體7和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-D的表達(dá)及臨床意義

沈利娟 王學(xué)紅 馬臻奇 馬雪芹

(青海大學(xué)附屬醫(yī)院消化科，青海 西寧 810001)

目的檢測(cè)胃腺癌術(shù)后組織中趨化因子受體(CCR)7和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)-D的表達(dá)，分析二者的臨床意義及相關(guān)性。方法確診為胃腺癌患者53例為觀察組，距腫瘤邊緣>5 cm的非腫瘤性胃黏膜組織29例為對(duì)照組，均留取術(shù)后蠟塊組織，應(yīng)用免疫組化SP法檢測(cè)兩組CCR7和VEGF-D表達(dá)。結(jié)果觀察組CCR7和VEGF-D表達(dá)陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組，觀察組中CCR7和VEGF-D表達(dá)陽(yáng)性率均與腫瘤脈管累犯和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。觀察組CCR7表達(dá)與腫瘤增殖指數(shù)密切相關(guān)。相關(guān)分析顯示觀察組CCR7和VEGF-D呈正相關(guān)。結(jié)論CCR7和VEGF-D高表達(dá)對(duì)胃腺癌形成和進(jìn)展有一定促進(jìn)作用，CCR7對(duì)腫瘤的作用可能與VEGF-D介導(dǎo)的淋巴管生長(zhǎng)因子生成有一定關(guān)聯(lián)。

胃腺癌；趨化因子受體7；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-D；免疫組化

胃腺癌臨床進(jìn)展過(guò)程較快，其與淋巴道播散密切相關(guān)〔1〕，目前認(rèn)為血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)-D是淋巴管生成的促進(jìn)因子，可以通過(guò)與受體VEGFR3相結(jié)合，促進(jìn)腫瘤間質(zhì)中D2-40陽(yáng)性的淋巴管新生〔2，3〕。趨化因子受體(CCR)7是表達(dá)于免疫細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞膜上的蛋白，其配體分布于外周免疫器官或組織，目前認(rèn)為CCR7高表達(dá)與腫瘤進(jìn)展有關(guān)，尤其是對(duì)轉(zhuǎn)移的促進(jìn)作用明顯〔4〕，研究認(rèn)為CCR7可能對(duì)脈管生成有一定作用〔5〕。本研究關(guān)注胃腺癌術(shù)后組織中CCR7和VEGF-D的表達(dá)，分析二者表達(dá)特征、臨床病理意義及相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1臨床資料 2013年1月至2015年12月青海大學(xué)附屬醫(yī)院確診為胃腺癌的患者53例為觀察組，留取術(shù)后石蠟包埋的組織，其中男29例，女24例，年齡42～83(平均60.2)歲。納入均符合世界衛(wèi)生組織(WHO)中的診斷標(biāo)準(zhǔn)及分型(病理醫(yī)師閱片復(fù)診)。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移19例，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移34例。上述患者距腫瘤邊緣>5 cm的非腫瘤性胃黏膜組織29例為對(duì)照組，其中男15例，女14例，年齡45～78(平均58.7)歲。兩組一般臨床資料無(wú)明顯差異，具有可比性。

1.2CCR7和VEGF-D蛋白的檢測(cè)方法 術(shù)后留取的組織均應(yīng)用40%的甲醛溶液固定24 h以上，由病理醫(yī)師常規(guī)取材，脫水后進(jìn)行石蠟包埋，切片。應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)CCR7和VEGF-D的表達(dá)，嚴(yán)格按實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行操作，采用二胺基聯(lián)苯胺(DAB)顯色，做好質(zhì)量控制工作，減少人為誤差。

1.3CCR7和VEGF-D表達(dá)的判讀 CCR7和VEGF-D陽(yáng)性表達(dá)的部位均是細(xì)胞質(zhì)和(或)細(xì)胞膜，以呈現(xiàn)淡黃到棕黃色顆粒為陽(yáng)性。觀察組選擇腫瘤細(xì)胞的分布密集區(qū)，對(duì)照組選擇黏膜上皮的分布區(qū)進(jìn)行觀察，先在低倍鏡下選擇染色明顯且典型的區(qū)域，然后在400倍下選擇3個(gè)視野，計(jì)算陽(yáng)性率，取平均值，以陽(yáng)性率<10%定為陰性，≥10%定為陽(yáng)性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)和線(xiàn)性相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1兩組CCR7和VEGF-D陽(yáng)性率比較 觀察組CCR7和VEGF-D陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于對(duì)照組(P<0.001)。見(jiàn)表1。

表1 兩組CCR7和VEGF-D表達(dá)陽(yáng)性率比較〔n(%)〕

2.2CCR7和VEGF-D在觀察組不同臨床病理特征中的表達(dá)差異 觀察組CCR7和VEGF-D表達(dá)陽(yáng)性率與腫瘤脈管累犯、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)；CCR7陽(yáng)性表達(dá)與腫瘤增殖指數(shù)密切相關(guān)(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 CCR7和VEGF-D在觀察組不同臨床病理特征中的陽(yáng)性表達(dá)比較〔n(%)〕

2.3觀察組CCR7和VEGF-D相關(guān)性 CCR7和VEGF-D呈正相關(guān)(r=0.42，P=0.042 5)。

3 討 論

胃腺癌常見(jiàn)于中老年人，極少在30歲以下發(fā)病，但30歲以后呈迅速增長(zhǎng)的趨勢(shì)。胃腺癌形成時(shí)細(xì)胞的分化程度低，細(xì)胞異型大，轉(zhuǎn)移率高〔6，7〕。研究顯示胃腺癌間質(zhì)可見(jiàn)明顯的小淋巴管新生，這對(duì)腫瘤淋巴道播散提供了一個(gè)直接途徑〔8〕。VEGF-D已經(jīng)確定為VEGFs家族中的淋巴內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)因子之一，與VEGF-C的結(jié)構(gòu)非常相似，其位于染色體XP22.31，全長(zhǎng)50 kD，由7個(gè)外顯子和6個(gè)內(nèi)含子組成。VEGF-D對(duì)腫瘤間質(zhì)中D2-40、淋巴管內(nèi)皮透明質(zhì)酸受體(LYVE)-1陽(yáng)性的淋巴管生成有一定促進(jìn)作用〔9，10〕。CCR7含有氨基酸378個(gè)，其基因定位于17q12-q21.2，研究顯示CCR7可以有效促進(jìn)上皮細(xì)胞遷移，同時(shí)能有效促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞及平滑肌細(xì)胞遷移、增殖，提高管腔形成能力〔11，12〕。梁小芹等〔13〕發(fā)現(xiàn)CCR7和VEGF-D在乳腺癌中表達(dá)升高，且二者具有正相關(guān)性，認(rèn)為CCR7和VEGF-D的表達(dá)水平在一定程度上提示了乳腺導(dǎo)管非典型增生向乳腺癌的轉(zhuǎn)化潛能，其表達(dá)水平可以作為判斷乳腺癌惡性生物學(xué)行為的重要指標(biāo)。

本研究結(jié)果提示CCR7和VEGF-D高表達(dá)是促進(jìn)腫瘤形成的重要因素〔14，15〕，即二者具有癌基因樣的作用。本文提示二者高表達(dá)具有明顯的促進(jìn)腫瘤進(jìn)展的作用。CCR7可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖過(guò)程，這是CCR7與VEGF-D在胃腺癌中作用不一樣的特征。CCR7的此種作用可能與其配體CCL19和CCL21的結(jié)合有關(guān)。胃癌是高增殖性腫瘤，因此CCR7能對(duì)腫瘤細(xì)胞繁殖有一定影響，這使腫瘤細(xì)胞增殖活躍，細(xì)胞數(shù)量增大，腫瘤體積明顯增大，腫瘤生長(zhǎng)加速，腫瘤呈進(jìn)展?fàn)顟B(tài)。本文提示CCR7和VEGF-D具有明顯的正向協(xié)同作用。CCR7對(duì)脈管的作用表現(xiàn)為對(duì)VEGF-D的調(diào)節(jié)上，此時(shí)淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞增殖，細(xì)胞繁殖，呈實(shí)性和出芽狀增生，管腔形成明顯，腫瘤細(xì)胞易于侵襲到脈管中，能形成脈管內(nèi)癌栓和淋巴轉(zhuǎn)移癌〔16，17〕。但是此種作用并不是單一作用形成的，與其受體VEGFR-3的協(xié)同作用有關(guān)，且這種作用也與VEGF-C的作用有關(guān)〔18〕。

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〔2016-07-13修回〕

(編輯 苑云杰)

沈利娟(1980-)，女，主治醫(yī)師，主要從事消化系統(tǒng)疾病研究。

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A

1005-9202(2017)16-3996-02；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2017.16.040