文劍萍 向晶晶

835700新疆伊犁尼勒克縣疾病預(yù)防控制中心

活動性肺結(jié)核痰檢結(jié)果200例分析

文劍萍 向晶晶

835700新疆伊犁尼勒克縣疾病預(yù)防控制中心

目的：探討痰涂片抗酸染色檢查對活動性肺結(jié)核的診斷價值。方法：收治活動性肺結(jié)核患者200例，均行痰涂片檢查，分析檢查結(jié)果。結(jié)果：200例患者中，找到抗酸桿菌126例，抗酸桿菌陽性檢出率63%。結(jié)論：痰涂片抗酸染色檢查在活動性肺結(jié)核的診斷中價值顯著。

活動性肺結(jié)核；痰涂片；抗酸染色

結(jié)核病是由于感染結(jié)核桿菌而導(dǎo)致的一種慢性傳染病，可侵及許多臟器，以肺部結(jié)核感染最為常見[1]。目前，結(jié)核病仍是威脅人類健康的大敵，特別是近年來，其發(fā)病率呈上升趨勢[2]。本文收集我院2015年11月-2016年11月痰涂片檢查的200例活動性肺結(jié)核患者資料進(jìn)行匯總和分析，現(xiàn)報告如下。

資料與方法

2015年11月-2016年11月收治痰涂片檢查的活動性肺結(jié)核患者200例，男142例，女58例，年齡15～79歲，平均(54.6±7.3)歲。

標(biāo)本采集：采集患者晨痰，讓患者早晨漱口后，咳出肺部深部的痰液3～5 mL，以干酪痰、血痰或黏液痰為合格標(biāo)本，用螺旋蓋痰瓶內(nèi)送檢。

染色方法：①抗酸染色的染液配制[3]：a.石炭酸復(fù)紅：5%石炭酸90 mL，堿性復(fù)紅酒精飽和溶液10 mL；b.3%鹽酸酒精：濃鹽酸3 mL、95%酒精97 mL；c.呂氏美藍(lán)液：氫氧化鉀(1：10 000)100 mL，美藍(lán)酒精飽和液30 mL。②痰涂片的制作：取合格痰標(biāo)本約0.1 mL于載玻片正面右側(cè)，涂抹成面積為10 mm×20 mm的卵圓形痰膜，自然干后進(jìn)行抗酸染色。③染色步驟[4]：a.初染：用玻片夾夾持涂片標(biāo)本，滴加石炭酸復(fù)紅2～3滴，在火焰高處徐徐加熱，切勿沸騰，出現(xiàn)蒸汽即暫時離開，若染液蒸發(fā)減少，應(yīng)再加染液，以免干涸，加熱3～5 min，待標(biāo)本冷卻后用水沖洗。b.脫：3%鹽酸酒精脫色30 s～1 min，用水沖洗。c.復(fù)染：用堿性美藍(lán)溶液復(fù)染1 min，水洗，用吸水紙吸干后用油鏡觀察。

結(jié)果判定[5]：①結(jié)核菌陰性(-)：連續(xù)觀察300個不同視野未找到結(jié)核菌；②結(jié)核菌陽性：1～8條/300視野；③結(jié)核菌陽性(+)：3～9條/100視野連續(xù)觀察300個視野；④結(jié)核菌陽性(++)：1～9條/10視野連續(xù)觀察100個視野；⑤結(jié)核菌陽性(+++)：1～9條/每個視野；⑥結(jié)核菌陽性(++++)：＞10條/每個視野。

結(jié) 果

結(jié)核分枝桿菌的顯微鏡下形態(tài)：結(jié)核分枝桿菌為細(xì)長略彎曲的桿菌，但是由于藥物的治療作用，會導(dǎo)致細(xì)菌形態(tài)的變化，如有的結(jié)核桿菌呈細(xì)長形、球狀、串珠狀或者絲狀，略帶彎曲，兩端呈圓形，有單個排列，也有成簇排列，有的有分枝。但均有抗酸性，即經(jīng)過抗酸染色后呈紅色，在藍(lán)色背景下十分易于觀察，如圖1。

圖1 抗酸桿菌(++++)

陽性檢出率：200例患者中找到抗酸桿菌126例，抗酸桿菌陽性檢出率63%。

討 論

分枝桿菌的細(xì)胞壁內(nèi)含有大量的脂質(zhì)，包圍在肽聚糖的外面，所以分枝桿菌一般不易著色，要經(jīng)過加熱和延長染色時間來促使其著色。但分枝桿菌中的分枝菌酸與染料結(jié)合后，就很難被酸性脫色劑脫色，故名抗酸染色。齊-尼氏抗酸染色法是在加熱條件下使分枝菌酸與石炭酸復(fù)紅牢固結(jié)合成復(fù)合物，用鹽酸酒精處理也不脫色。當(dāng)再加堿性美藍(lán)復(fù)染后，分枝桿菌仍然為紅色，而其他細(xì)菌及背景中的物質(zhì)為藍(lán)色[6]。

結(jié)核分枝桿菌為細(xì)長略彎曲的桿菌[7]，但是由于藥物的治療作用，會導(dǎo)致細(xì)菌形態(tài)的變化，如有的結(jié)核桿菌呈細(xì)長形、球狀、串珠狀或者絲狀，略帶彎曲，兩端呈圓形，有單個排列，也有成簇排列，有的有分枝。但均有抗酸性，即經(jīng)過抗酸染色后呈紅色，在藍(lán)色背景下十分易于觀察。

本組研究結(jié)果顯示，痰涂片抗酸染色檢查具有操作簡便、無需特殊設(shè)備和特殊技術(shù)，而且陽性診斷率高，值得臨床推廣。

[1]孫海柏,張立,劉佳慶,等.結(jié)核分枝桿菌T細(xì)胞斑點實驗在肺結(jié)核診斷中的應(yīng)用[J].山東醫(yī)藥,2013,53(43)：75-77.

[2]鄭強,李朝金,茍莉,等.多種肺結(jié)核臨床實驗室診斷方法的比較分析[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2014,7(21)：2941-2942.

[3]李丹,杜德兵,陳玉龍,等.T細(xì)胞斑點試驗、結(jié)核蛋白芯片、抗酸染色涂片和結(jié)核菌素試驗對肺結(jié)核病診斷價值的比較[J].中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志,2015,6(11)：38-41.

[4]Protopopova M,Hanrahan C,Nikonenko B,et al.Identifi cation of anew antitubercular drug candidate,SQ109,from a combinatorial library of1,2-ethylendiamines[J].J Antimicrob Chemother,2015,56：968-974.

[5]胡杰英,陳冬花,劉書磊.紅細(xì)胞沉降率,抗結(jié)核抗體及結(jié)核菌素試驗在肺結(jié)核診斷中的價值[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生,2012,4(8)：1144-1146.

[6]Paramsivan CN,Sulochana S,Kubendiran G,et al.Bactericidal action ofgatifloxacin,rifampin,and isoniazid on logarithmic and stationary phase cultures ofMycobacterium tuberculosis[J].Antimicrob Agents Chemother,2005,49：627-631.

[7]Arbues A,Aguilo JI,Gonzalo-Asensio J,et al.Construction,characterization and preclinical evaluation of MTBVAC,the first live-attenuated M.tuberculosis-based vaccine to enter clinical trials[J].Vaccine,2013,31(42)：4867-4873.

Analysis of sputum examination results of 200 cases of active pulmonary tuberculosis

Wen Jianping,Xiang Jingjing
Center for Disease Control and Prevention of Nileke County,Yili,Xinjiang 835700

Objective：To investigate the diagnostic value of acid fast staining of sputum smear in patients with active pulmonary tuberculosis.Methods：200 patients with active pulmonary tuberculosis were selected.They were given sputum smears.We analyzed the results of the examination.Results：In the 200 cases,126 cases of acid fast bacilli were found,and the positive rate of acid fast bacilli was 63%.Conclusion：The diagnostic value of acid fast staining of sputum smear in patients with active pulmonary tuberculosis was significant.

Active pulmonary tuberculosis;Sputum smear;Acid fast stain

10.3969/j.issn.1007-614x.2017.22.70