阮 智 方欽正 孫建華

(石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院骨科中心，新疆 石河子 832008)

干細(xì)胞移植對(duì)老年股骨頭壞死患者血清瘦素、骨橋蛋白及骨保護(hù)素水平的影響

阮 智 方欽正 孫建華

(石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院骨科中心，新疆 石河子 832008)

目的探討干細(xì)胞移植對(duì)老年股骨頭壞死(ONFH)患者血清瘦素、骨橋蛋白(OPN)及骨保護(hù)素(OPG)水平的影響。方法ONFH患者100例，根據(jù)治療方法不同分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組各50例，分別給予相應(yīng)的藥物治療，治療后對(duì)所有患者骨密度(BMD)、血清瘦素、OPG、OPN水平進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組治療后BMD、OPG水平顯著升高，瘦素、OPN水平顯著下降(均P<0.05)。結(jié)論干細(xì)胞移植能夠顯著降低老年ONFH患者血清瘦素，OPN水平，升高BMD及OPG水平。

干細(xì)胞移植；股骨頭壞死；瘦素；骨橋蛋白；骨保護(hù)素

股骨頭壞死(ONFH)多發(fā)于青壯年，晚期還會(huì)導(dǎo)致骨性關(guān)節(jié)炎〔1〕。該病的發(fā)病機(jī)制尚不明確，有研究表明，骨代謝的異常、股骨頭的缺血及活力成分的死亡都與ONFH的發(fā)病關(guān)系密切〔2〕。骨髓干細(xì)胞是一種來(lái)源于中胚層的間充質(zhì)細(xì)胞，因此具有多向分化的潛能。 研究發(fā)現(xiàn)，骨髓干細(xì)胞能夠分泌成骨活性因子〔3〕。相關(guān)實(shí)驗(yàn)已經(jīng)表明，其在組織損傷修復(fù)方面具有突出表現(xiàn)且較少發(fā)生排斥反應(yīng)〔4〕。骨髓干細(xì)胞移植技術(shù)在臨床的許多個(gè)領(lǐng)域均有廣泛的應(yīng)用，并證實(shí)骨髓干細(xì)胞在治療股骨頭壞死方面具有一定的作用〔5〕。本實(shí)驗(yàn)旨在探討干細(xì)胞移植對(duì)老年ONFH患者血清瘦素、骨橋蛋白(OPN)及骨保護(hù)素(OPG)水平的影響。

1 資料與方法

1.1臨床資料 選取2014年3月至2015年3月入住石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院符合國(guó)際目前通用的Montm診斷標(biāo)準(zhǔn)，并經(jīng)影像學(xué)檢查確診的ONFH患者100例。根據(jù)電腦自動(dòng)生成的隨機(jī)對(duì)照表分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，每組50例。對(duì)照組男28例，女22例，平均年齡(60.64±1.25)歲，治療組男26例，女24例，平均年齡(59.24±1.27)歲，兩組一般資料無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)?；颊咧橥狻１狙芯揩@得我市倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2納入及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)壞死國(guó)際骨循環(huán)學(xué)會(huì)(ARCO)分期為Ⅰ、Ⅱ期患者，年齡55～65歲，為輕、中強(qiáng)度體力勞動(dòng)者，患者無(wú)心、腦血管及肝、腎等重要臟器的重大疾病。排除標(biāo)準(zhǔn)：類風(fēng)濕等骨代謝疾病引起的ONFH；老年骨關(guān)節(jié)病；合并有重要臟器重大疾病者；患有高血壓、糖尿病等慢性疾病者；患有感染性疾病者；依從性差者；精神病以及不愿接受實(shí)驗(yàn)措施者。

1.3方法 對(duì)照組給予甲潑尼龍琥珀酸鈉40 mg，1次/d；實(shí)驗(yàn)組在對(duì)照組基礎(chǔ)上給予干細(xì)胞注射治療?；颊哌M(jìn)行術(shù)前檢查后，采取常規(guī)硬膜外麻醉，根據(jù)模擬穿刺時(shí)確定的位置經(jīng)皮鉆入斯氏針到壞死病灶的中心，在斯氏針引導(dǎo)下，在發(fā)生壞死的關(guān)節(jié)軟骨面下用凝膠海綿注射器，通過(guò)長(zhǎng)針頭注入2 ml的自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞懸液。加用骨蠟進(jìn)行封堵，避免干細(xì)胞液的外漏。治療期間注意監(jiān)測(cè)患者的各項(xiàng)生命體征，注意休息，加強(qiáng)營(yíng)養(yǎng)。

1.4骨密度(BMD)水平檢測(cè) 所有患者于治療前后采用跟骨超聲骨質(zhì)檢測(cè)儀進(jìn)行跟骨的BMD檢測(cè)。

1.5血清瘦素水平檢測(cè) 所有患者于治療前后清晨空腹抽取外周靜脈血4 ml，靜置，分離血清，在-80℃環(huán)境下保存待測(cè)，采用放射免疫法，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的步驟檢測(cè)血清瘦素水平。曲線范圍 0.4～33 μg/L。

1.6OPG水平檢測(cè) 所有患者于治療前后清晨空腹采集外周靜脈血，離心取上清，采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的步驟，檢測(cè)患者血清OPG水平。

1.7血清OPN水平檢測(cè) 采用ELISA嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的步驟，檢測(cè)患者血清OPN水平。

1.8統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)的組間比較進(jìn)行t及χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

治療前，兩組BMD水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.095)，治療后兩組均有所上升(P<0.05)，且實(shí)驗(yàn)組增幅較突出(P<0.05)。兩組治療后血清瘦素水平均有所下降(P<0.05)，且實(shí)驗(yàn)組降幅較突出(P<0.05)。隨著病情治療患者OPG水平下降(P<0.05)；且實(shí)驗(yàn)組低于對(duì)照組(P<0.05)。治療后，兩組血清OPN 水平顯著上升(P<0.05)；且實(shí)驗(yàn)組升高較為顯著(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 治療前后患者BMD水平比較

與治療前比較：1)P<0.05

3 討 論

老年ONFH是目前世界醫(yī)學(xué)界的疑難病癥之一，絕大多數(shù)的患者由于病情沒(méi)有得到及時(shí)控制，生活質(zhì)量嚴(yán)重下降，晚期病變累及雙側(cè)股骨頭，使患者致殘。古代醫(yī)家將ONFH是歸為“骨蝕”、“骨痹”、“骨萎”范疇。早在《素問(wèn)·痹論》〔6〕中就有：“痹在于骨則重。骨痹不已，復(fù)感于邪，內(nèi)舍于腎”。指出外邪的侵入，導(dǎo)致經(jīng)絡(luò)，氣血循行不暢為其發(fā)病的外因，且于腎的關(guān)系極為密切。后世醫(yī)家指出先前醫(yī)家所論“骨痹”、“骨蝕”等為ONFH是不同的階段，早期以氣血閉阻為主，晚期股骨頭形態(tài)改變是由于肝腎虛衰，加之外感邪毒導(dǎo)致骨骼失養(yǎng)，發(fā)為本病?，F(xiàn)代研究表明〔7〕，造成ONFH是的原因大致可歸結(jié)為創(chuàng)傷性及非創(chuàng)傷性因素，但最被認(rèn)可的是ONFH是的發(fā)生與骨代謝和脂肪代謝有著緊密的聯(lián)系。瘦素是存在于人體內(nèi)的一種分泌型蛋白質(zhì)，從以往的研究中可以看出，瘦素對(duì)骨代謝方面起到了重要的調(diào)節(jié)作用〔8〕。有研究表明〔9〕，瘦素對(duì)骨具有直接的刺激作用，在骨代謝的過(guò)程中起重要的橋梁作用。一方面，瘦素能夠通過(guò)下丘腦起到抑制骨形成，另一方面，瘦素還能上調(diào)OPG基因的表達(dá)，對(duì)破骨細(xì)胞的生成和分化產(chǎn)生抑制作用。因此，治療后瘦素水平的下降表明其對(duì)于骨生長(zhǎng)的抑制作用降低。相關(guān)研究已經(jīng)證實(shí)，瘦素在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中可以作為一種骨形成的抑制因子，通過(guò)減弱成骨細(xì)胞的功能發(fā)揮作用，這表明瘦素的作用機(jī)制是通過(guò)影響成骨細(xì)胞來(lái)實(shí)現(xiàn)其對(duì)骨生長(zhǎng)的抑制〔10〕。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)〔11〕，瘦素能激活中樞下丘腦神經(jīng)元，激活交感神經(jīng)系統(tǒng)及成骨細(xì)胞表面的腎上腺素能受體發(fā)揮作用，進(jìn)一步證實(shí)了瘦素與ONFH是的關(guān)聯(lián)作用，這與本實(shí)驗(yàn)的研究結(jié)果一致。OPG是一種無(wú)跨膜結(jié)構(gòu)的可溶性糖蛋白，在其被發(fā)現(xiàn)之初就被證實(shí)其能夠參與配體的結(jié)合來(lái)抑制破骨細(xì)胞的形成，存在于很多重要臟器中，尤其在骨和骨髓中的含量較高。并且有研究發(fā)現(xiàn)〔12〕，細(xì)胞的分化程度越高，其水平越高。OPN是一種分泌型的糖基化蛋白，可以介導(dǎo)骨細(xì)胞與骨基質(zhì)的連接，參與骨基質(zhì)的重吸收進(jìn)程，二者均為骨代謝相關(guān)蛋白，且與ONFH是的過(guò)程密切相關(guān)。OPN能夠參與生物學(xué)過(guò)程，包括細(xì)胞的趨化、黏附、免疫調(diào)節(jié)，骨的重吸收等。在骨關(guān)節(jié)炎患者的組織，如關(guān)節(jié)軟骨中，發(fā)現(xiàn)了OPN的高表達(dá)，OPN可以促進(jìn)滑膜增生，破壞軟骨，造成軟骨的退行性變，在骨病患者體內(nèi)，OPN基因多態(tài)性體現(xiàn)為正相關(guān)的關(guān)系。

ONFH發(fā)病過(guò)程與骨的形成和骨吸收的失衡密切相關(guān)，這種平衡對(duì)于維持骨骼的完整性以及骨骼的正常生理功能十分重要。OPG主要是由成骨細(xì)胞分泌，是己知的唯一1種能與成骨細(xì)胞膜上的核因子κB受體活化因子配體(RANKL)結(jié)合的受體，它能夠通過(guò)阻斷以RANK與NKL的結(jié)合，抑制成熟破骨細(xì)胞的活化來(lái)發(fā)揮作用，這也是目前許多藥物的作用靶點(diǎn)。本研究表明，干細(xì)胞注射能夠升高患者血清OPG水平，從而抑制破骨細(xì)胞的產(chǎn)生，達(dá)到治療的目的。

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〔2017-03-25修回〕

(編輯 袁左鳴/滕欣航)

2010年度兵團(tuán)重點(diǎn)科技攻關(guān)計(jì)劃(No.2010GG33)

史晨輝(1961-)，博士，教授，主要從事脊柱關(guān)節(jié)外科研究。

阮 智(1973-)，男，碩士，副主任醫(yī)師，主要從事脊柱關(guān)節(jié)外科研究。

R687.3

A

1005-9202(2017)17-4356-03；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2017.17.091