李芳兵 張丹丹 高琴 白帆

·論著·

葉酸吸收代謝途徑基因多態(tài)性與新生兒出生缺陷的相關(guān)性分析

李芳兵 張丹丹 高琴 白帆

目的觀察分析葉酸吸收代謝途徑基因多態(tài)性與新生兒出生缺陷的相關(guān)性，為減低新生兒出生缺陷的發(fā)生率提供參考。方法系統(tǒng)性回顧分析2014年1月至2015年11月婦產(chǎn)科收治110例的孕產(chǎn)婦，根據(jù)其妊娠初期增補(bǔ)葉酸的情況分為服用葉酸組(70例)和未服用葉酸組(40例)；分析2組孕婦分娩的新生兒的缺陷類型，比較2組孕婦的妊娠結(jié)局；2組新生兒的缺陷情況；不同孕期2組產(chǎn)婦的新生兒一般情況的比較，服用葉酸組產(chǎn)婦血漿、紅細(xì)胞葉酸水平與新生兒體重、身長(zhǎng)、頭圍的關(guān)系。結(jié)果服用葉酸組與未服用葉酸組的活產(chǎn)兒率均為100%(P>0.05)；2組在分娩方式、妊娠高血壓和妊娠糖尿病發(fā)生情況之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。服用葉酸組的總畸形率明顯低于未服用葉酸組(P<0.05)。孕晚期未服用葉酸組的患者分娩的嬰兒出生體重和身長(zhǎng)均有明顯減低，與服用葉酸組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；孕早期、孕中期未服用葉酸組的孕產(chǎn)婦的嬰兒的體重、身長(zhǎng)和頭圍較服用葉酸組稍有偏低，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。紅細(xì)胞葉酸的變化與出生體質(zhì)量、出生身長(zhǎng)存在相關(guān)性(P<0.05)。結(jié)論葉酸缺乏會(huì)增加新生兒出生缺陷的概率，主要的缺陷類型為先天性心臟病、唇腭裂、指/趾畸形、脊柱裂及外耳畸形；葉酸缺乏的孕婦分娩的新生兒的體重和身長(zhǎng)較正常增補(bǔ)葉酸的孕婦分娩的新生兒低，這與紅細(xì)胞中葉酸水平密切相關(guān)。因此，孕婦在孕前及孕期補(bǔ)充適量的葉酸是減低新生兒出生缺陷率的關(guān)鍵措施。

葉酸；代謝途徑；新生兒缺陷

新生兒出生缺陷(birth befects)是指嬰兒出生前發(fā)生的身體結(jié)構(gòu)、代謝或功能的異常。隨著近年來，我國(guó)醫(yī)療水平和醫(yī)療環(huán)境的提高，醫(yī)保制度的完善，新生兒的死亡率得到極大地降低[1]。但環(huán)境污染的加劇、居民生活壓力的增大、生活?yuàn)蕵贩绞降亩鄻有约八幬锏牟灰?guī)則售賣等問題的影響，新生兒的出生缺陷比率逐年增加。這也是近來醫(yī)學(xué)關(guān)注的焦點(diǎn)。葉酸在DNA合成、甲基化、基因表達(dá)及生長(zhǎng)發(fā)育等方面有著重要的作用。參與葉酸代謝的酶有MTHFR、MTR、、FOLH1、PCFT、葉酸受體等，在葉酸代謝途徑中，某些酶的基因位點(diǎn)的變異可能影響葉酸水平[2]。通過以往的研究發(fā)現(xiàn)，葉酸代謝吸收多基因途徑的變異，是導(dǎo)致新生兒出生缺陷的關(guān)鍵原因，可能導(dǎo)致唇裂、腭裂、先天性心臟病、唐氏綜合征等多種先天性疾病[3]。本研究旨在分析葉酸吸收代謝途徑基因多態(tài)性與新生兒出生缺陷的相關(guān)性，為減低新生兒出生缺陷的發(fā)生率提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 系統(tǒng)性回顧分析我院2014年1月至2015年11月婦產(chǎn)科收治110例的孕產(chǎn)婦患者，根據(jù)其妊娠初期增補(bǔ)葉酸的情況分為服用葉酸組(70例)和未服用葉酸組(40例)。2組患者年齡、居住地、孕周、妊娠次數(shù)等一般資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。見表1。

表1 患者一般資料 例(%)

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn)：①我院收治的確診為孕產(chǎn)婦的患者；②患者在孕前無心臟病、唇裂、腭裂、脊柱裂、外耳急性、抑郁癥、血液系統(tǒng)疾病(髓系白血病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等)等相關(guān)病史[4]；③患者或患者家屬已經(jīng)簽署知情書并自愿參加本項(xiàng)研究者。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn)：①近親結(jié)婚、有家族遺傳病史、妊娠期間接觸過有毒物質(zhì)、放射線等的患者；②合并多種免疫系統(tǒng)疾病或急慢性疾病的患者。

1.3 方法 服用葉酸組有70例患者，未服用葉酸組有40例患者。服用葉酸組即孕前1個(gè)月至孕后3個(gè)月內(nèi)每天服用葉酸0.4 mg；未服用葉酸組即孕前1個(gè)月至孕后3個(gè)月未增補(bǔ)葉酸或增補(bǔ)天數(shù)不超過40 d[5]。2組患者孕前及孕期每月定期行常規(guī)產(chǎn)檢，孕期中如有任何異常出血、陰道流血或患者自身情況，立即來院就診；并詳細(xì)將產(chǎn)檢結(jié)果、妊娠方式、妊娠結(jié)果等記錄在產(chǎn)檢本上。孕后3個(gè)月由經(jīng)過專業(yè)培訓(xùn)的調(diào)查員對(duì)患者進(jìn)行1對(duì)1電話隨訪；并督促其將新生兒送至醫(yī)院進(jìn)行常規(guī)檢查。

1.4 觀察指標(biāo)

1.4.1 2組患者妊娠結(jié)局的比較:比較2組患者的新生兒出生情況(胎兒宮內(nèi)死亡數(shù)、分娩過程死亡數(shù)、活產(chǎn)兒)、分娩方式(自熱分娩、器械助產(chǎn)分娩、剖宮產(chǎn))、以及妊娠高血壓、糖尿病的發(fā)生情況。

1.4.2 2組新生兒缺陷的類型及2組患者中各種缺陷的情況:根據(jù)調(diào)查員的電話隨訪，統(tǒng)計(jì)入選本研究的患者的新生兒缺陷的類型；以及2組患者新生兒中各種缺陷的比例。

1.4.3 不同孕期兩組產(chǎn)婦的新生兒一般情況比較:比較在孕早期、孕中期、孕晚期，1組中嬰兒的體重(g)、身長(zhǎng)(cm)、頭周(cm)。孕早期即妊娠1～3個(gè)月；孕中期即妊娠4～6個(gè)月；孕晚期即妊娠7～9個(gè)月。本研究中，孕早期、中期、晚期2組產(chǎn)婦的嬰兒一般情況比較分別取妊娠2、5、8個(gè)月時(shí)的產(chǎn)檢數(shù)據(jù)。體重的測(cè)量：體重(g)=900×BPD(cm)-5 200，其中BPD是指胎兒的雙頂徑，即頭部左右兩側(cè)之間的最長(zhǎng)部位的長(zhǎng)度，可由B超測(cè)得。身長(zhǎng)的測(cè)量：孕早期通過在B超下測(cè)量胎兒頭部至臀部的距離來表示；孕中期及晚期通過測(cè)量胎兒頭部至下肢之間的距離來表示。頭圍測(cè)量：雙頂徑，由B超測(cè)得[6]。

1.4.4 服用葉酸組孕婦的血漿、紅細(xì)胞葉酸水平與新生兒體質(zhì)量、身長(zhǎng)、頭圍的關(guān)系 抽取服用葉酸組患者產(chǎn)前空腹靜脈血及產(chǎn)后嬰兒臍帶血，及時(shí)分離血清并置于-20℃的冰箱中短期保存，用以檢測(cè)患者血漿及紅細(xì)胞葉酸水平。同時(shí)測(cè)量新生兒體重(精確到0.1 g)、新生兒身長(zhǎng)和頭圍(精確到0.1 cm)[7]。血漿葉酸的檢測(cè)：采用30 min內(nèi)3 000 r/min(離心半徑為25.4 cm)離心10 min，取1 ml上清液上機(jī)測(cè)定。紅細(xì)胞葉酸的檢測(cè)：檢測(cè)受檢血樣的紅細(xì)胞壓積(儀器：邁瑞B(yǎng)C300全自動(dòng)血常規(guī)分析儀，有深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司提供)，取50 μl全血樣本并加入1 ml 溶血?jiǎng)?批號(hào)：M003370)，混勻，90 min后上機(jī)測(cè)定。葉酸檢測(cè)儀為全自動(dòng)微粒子化學(xué)發(fā)光免疫分析儀，儀器與試劑盒均由天津康匯洪美科技有限公司提供[8]。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件,計(jì)量數(shù)資料比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2組患者妊娠結(jié)局比較 服用葉酸組與未服用葉酸組的活產(chǎn)兒率均為100%，(P>0.05)；服用葉酸組與未服用葉酸組在分娩方式以及妊娠期高血壓、糖尿病發(fā)生情況之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 2組患者妊娠結(jié)局比較 例(%)

2.2 2組新生兒缺陷的類型及2組患者中各種缺陷的情況 2組患者妊娠的新生兒的缺陷類型主要為先天性心臟病、唇腭裂、指/趾畸形、脊柱裂、外耳畸形。服用葉酸組的總畸形率為1.43%，未服用葉酸組的總畸形率為17.5%(P<0.05)。見表3、4。

表3 新生兒缺陷的類型

2.3 不同孕期2組新生兒一般情況比較 孕晚期未服用葉酸組的患者分娩的嬰兒出生體質(zhì)量和身長(zhǎng)均有明顯減低，與服用葉酸組比較的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；孕早期、孕中期未服用葉酸組的孕產(chǎn)婦的嬰兒的體重、身長(zhǎng)和頭圍較服用葉酸組稍有偏低，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，未服用葉酸組的孕產(chǎn)婦較服用葉酸組的孕產(chǎn)婦的分娩的嬰兒的出生體重顯著性減低(P<0.05)。見表5。

表4 2組患者中各種缺陷的情況 例(%)

表5 不同孕期2組新生兒一般情況比較

注：與未服用葉酸組比較,*P<0.05

2.4 服用葉酸組產(chǎn)婦與血漿、紅細(xì)胞葉酸水平與新生兒體質(zhì)量、身長(zhǎng)、頭圍的關(guān)系 紅細(xì)胞葉酸的變化與紅細(xì)胞的出生體質(zhì)量、出生身長(zhǎng)存在相關(guān)性(P<0.05)。見表6。

表6 服用葉酸組產(chǎn)婦與血清、臍血葉酸水平與新生兒體重、身長(zhǎng)、頭圍的關(guān)系

3 討論

葉酸是人體中必不可少的物質(zhì)，需經(jīng)葉酸活化酶還原產(chǎn)生四氫葉酸才可以被人體利用，進(jìn)而發(fā)揮生理功能。而合成脫氧核糖核酸和參與甲基化反應(yīng)是其最重要的生物學(xué)功能。葉酸的代謝過程主要分為兩支：甲基化反應(yīng)和核苷酸生物合成，其代謝障礙常可導(dǎo)致DNA甲基化和DNA合成的異常[9]。葉酸的缺乏是導(dǎo)致胚胎發(fā)育異常的重要因素之一。近年來，葉酸的合成代謝與不良妊娠、新生兒缺陷之間的關(guān)系成為醫(yī)學(xué)和患者關(guān)注的焦點(diǎn)。本研究，通過對(duì)葉酸吸收代謝途徑基因多態(tài)性與新生兒出生缺陷的相關(guān)性的研究，得出以下結(jié)果及結(jié)論：

在本研究中，服用葉酸組與未服用葉酸組的活產(chǎn)兒率均為100%(P>0.05)，同時(shí)2組在分娩方式以及妊娠期特異性疾病發(fā)生情況之間的差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。這可能與日益提高的醫(yī)學(xué)設(shè)備、孕婦的定期產(chǎn)檢、醫(yī)生診治水平的提高、患者的醫(yī)學(xué)意識(shí)的加強(qiáng)有關(guān)。2組孕婦分娩的新生兒的缺陷類型主要為先天性心臟病、唇腭裂、脊柱裂以及外耳急性，服用葉酸組的總畸形率更低。這與上文提及的葉酸參與DNA甲基化和DNA合成，葉酸、VitB2、VitB6和蛋氨酸等是葉酸代謝過程中的重要物質(zhì)，葉酸的不足或者缺乏以及這些物質(zhì)的活性發(fā)生變化，都可能影響葉酸的代謝過程，造成甲基化和核苷酸合成之間的不平衡，最終會(huì)對(duì)基因組的穩(wěn)定性、癌基因和腫瘤基金的表達(dá)[10]。進(jìn)而導(dǎo)致新生兒出生時(shí)缺陷率提高。孕晚期未服用葉酸組的患者分娩的嬰兒出生體質(zhì)量和身長(zhǎng)均有明顯減低，與服用葉酸組比較的差異顯著；進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，未服用葉酸組的孕產(chǎn)婦較服用葉酸組的孕產(chǎn)婦的分娩的嬰兒的出生體質(zhì)量顯著性減低(P<0.05)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，紅細(xì)胞葉酸的變化與紅細(xì)胞的出生體質(zhì)量、出生身長(zhǎng)存在相關(guān)性(P<0.05)；可能與以下因素有關(guān)。葉酸還有一個(gè)重要的功能是參與紅細(xì)胞的成熟，葉酸的缺乏會(huì)增加孕婦貧血的機(jī)率。患者可出現(xiàn)衰弱[11]。蒼白、失眠、精神萎靡等癥狀；而胎兒的主要營(yíng)養(yǎng)來源是母體，當(dāng)孕婦因葉酸的缺乏而貧血時(shí)，自身的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)尚不能滿足身體的需求，胎兒從母體中得到的營(yíng)養(yǎng)更少，不能提供胎兒生長(zhǎng)發(fā)育所需的必需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及營(yíng)養(yǎng)量。新生兒的出生體質(zhì)量和身長(zhǎng)減低是胎兒期營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)缺乏的直接體現(xiàn)[10]。

綜上所述，葉酸缺乏會(huì)增加新生兒出生缺陷的概率，主要的缺陷類型為先天性心臟病、唇腭裂、指/趾畸形、脊柱裂及外耳畸形；葉酸缺乏的孕婦分娩的新生兒的體質(zhì)量和身長(zhǎng)較正常增補(bǔ)葉酸的孕婦分娩的新生兒低，這與紅細(xì)胞中葉酸水平密切相關(guān)。因此，孕婦在孕

前及孕期補(bǔ)充適量的葉酸是減低新生兒出生缺陷率的關(guān)鍵措施。

1 劉菊芬,任愛國(guó).口服避孕藥添加葉酸:育齡婦女增補(bǔ)葉酸的新途徑.中國(guó)生育健康雜志,2015,15:181-183,187.

2 魏亮瑜,欒曉林,孫鵬程,等.新生兒出生缺陷類型醫(yī)療糾紛的探討.中華醫(yī)院管理雜志,2014,30:444-446.

3 徐葉清,翁婷婷,嚴(yán)雙琴,等.增補(bǔ)葉酸與孕期抑郁相關(guān)性的隊(duì)列研究.中華流行病學(xué)雜志,2014,23:641-645.

4 Kamran S,Asadi M,Absalan G,et al.Adsorption of folic acid,riboflavin,and ascorbic acid from aqueous samples by Fe3O4 magnetic nanoparticles using ionic liquid as modifier.Analytical methods,2014,6:798-806.

5 高晨菲,康慧杰,白麗霞,等.葉酸對(duì)脆性組氨酸三聯(lián)體基因表達(dá)的影響及對(duì)宮頸癌細(xì)胞增殖凋亡的作用.中華流行病學(xué)雜志,2014,21:569-572.

6 Martiniak Y,Heuer T,Hoffmann I,et al.Intake of dietary folate and folic acid in Germany based on different scenarios for food fortification with folic acid.European journal of nutrition,2015,54:1045-1054.

7 宋文芳,任燦晴,沈秋紅,等.育齡婦女葉酸代謝通路關(guān)鍵酶基因多態(tài)性對(duì)血漿同型半胱氨酸水平的影響.中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志,2014,48:900-903.

8 程利南.圍孕期增補(bǔ)葉酸預(yù)防出生缺陷的效果及安全性.中華全科醫(yī)師雜志,2015,14:735-736.

9 李方,林茜.增補(bǔ)葉酸預(yù)防神經(jīng)管缺陷:研究進(jìn)展與展望.中國(guó)兒童保健雜志,2015,23:1166-1168.

10 姜陵.葉酸對(duì)微營(yíng)養(yǎng)素缺乏產(chǎn)婦妊娠結(jié)局的影響.中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥,2016,43:277-278.

11 熊蕙.胎兒生長(zhǎng)受限與孕婦紅細(xì)胞葉酸缺乏的相關(guān)性分析.當(dāng)代醫(yī)學(xué),2015,26:86-87.

10.3969/j.issn.1002-7386.2017.18.011

430081 武漢市，武漢科技大學(xué)附屬醫(yī)院 武漢市普仁醫(yī)院婦產(chǎn)科

R 346.38

A

1002-7386(2017)18-2768-04

2017-04-21)