時(shí)秋娜劉占芳田菲菲

（1 河南警察學(xué)院刑事科學(xué)技術(shù)系 河南 鄭州 450026；2 公安部物證鑒定中心 北京 100038；3 島津企業(yè)管理（中國(guó)）有限公司北京分析中心 北京 100020）

不同動(dòng)物油中脂肪酸成分的全二維氣相色譜-質(zhì)譜法檢驗(yàn)

時(shí)秋娜1劉占芳2田菲菲3

（1 河南警察學(xué)院刑事科學(xué)技術(shù)系 河南 鄭州 450026；2 公安部物證鑒定中心 北京 100038；3 島津企業(yè)管理（中國(guó)）有限公司北京分析中心 北京 100020）

通過(guò)脂肪酸成分的差異區(qū)分不同種類的動(dòng)物油，以四甲基氫氧化銨（TMAH）的甲醇液（體積比1∶50）對(duì)動(dòng)物油樣品進(jìn)行甲酯化衍生，利用全二維氣相色譜-質(zhì)譜法檢驗(yàn)不同地區(qū)不同種類動(dòng)物油的脂肪酸成分。結(jié)果表明，不同地區(qū)同一種類動(dòng)物油的脂肪酸成分基本一致，不同種類動(dòng)物油的脂肪酸成分差異明顯，從而可對(duì)不同動(dòng)物油進(jìn)行區(qū)分。

全二維氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法 脂肪酸檢驗(yàn) 動(dòng)物油區(qū)分

1 引言

全二維氣相色譜（GC×GC）是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一種分析復(fù)雜混合物的多維色譜技術(shù)，其能夠使待測(cè)樣品實(shí)現(xiàn)真正的正交分離，具有峰容量大、分辨率高、定性分析更準(zhǔn)確、能夠?qū)崿F(xiàn)族分離等特點(diǎn)[1]，與飛行質(zhì)譜聯(lián)用，已被廣泛應(yīng)用于汽煤柴等礦物油成分的檢驗(yàn)中[2-3]，而其對(duì)動(dòng)物油中脂肪酸成分的檢驗(yàn)卻鮮見(jiàn)報(bào)道。

豬油、牛油、羊油等動(dòng)物油是人們?nèi)粘Ｉ钪谐Ｒ?jiàn)的食材，也是兇殺、縱火等刑事案件中常見(jiàn)的物證種類，對(duì)其進(jìn)行檢驗(yàn)，可推斷遺留者的職業(yè)、民族、飲食習(xí)慣等人身特點(diǎn)，進(jìn)而幫助偵查人員判斷案件性質(zhì)、明確偵查方向、縮小偵查范圍，具有十分重要的現(xiàn)實(shí)意義。

動(dòng)物油的主要成分為各種高級(jí)脂肪酸甘油酯（甘油三酯），常溫下多呈固態(tài)，不溶于水，易溶于乙醚、氯仿等有機(jī)溶劑。動(dòng)物油中的脂肪酸組成與油脂種類緊密相關(guān)，根據(jù)脂肪酸組成可鑒別不同種類的動(dòng)物油。目前，有關(guān)動(dòng)物油的檢驗(yàn)報(bào)道，常見(jiàn)的有氣相色譜-質(zhì)譜法[4]、拉曼光譜法[5]、紅外光譜法[6]等，但這些方法多用來(lái)檢測(cè)動(dòng)物油中常見(jiàn)的高含量脂肪酸，且拉曼光譜對(duì)動(dòng)植物油進(jìn)行檢驗(yàn)時(shí)易出現(xiàn)熒光干擾，影響檢測(cè)結(jié)果，不利于動(dòng)物油的進(jìn)一步鑒別和區(qū)分。本實(shí)驗(yàn)利用全二維氣相色譜-質(zhì)譜法檢驗(yàn)了動(dòng)物油中的脂肪酸成分，分別比較了不同地區(qū)同種動(dòng)物油的脂肪酸組成，提取了其特征組分，并進(jìn)一步比較了不同動(dòng)物油的脂肪酸組成，根據(jù)脂肪酸成分的不同而實(shí)現(xiàn)了動(dòng)物油的初步分類。

2 實(shí)驗(yàn)部分

2.1 儀器與試劑

QP2010 Ultra GC×GC-MS（日本島津公司），冷噴調(diào)制器ZX1（美國(guó)Zoex公司），GC Image2.4數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。

四甲基氫氧化銨（TMAH）；甲醇、乙醚均為分析純。

2.2 實(shí)驗(yàn)樣品

山東、江蘇、黑龍江、湖北、河南、北京等不同地區(qū)的豬油、牛油、羊油、雞油樣品，共18份。

2.3 實(shí)驗(yàn)方法

2.3.1 GC×GC-MS條件

一維色譜柱：DB-5MS（30m×0.25mm ×0.25μm）（Agilent，美國(guó)）；二維色譜柱：BP20（2.5m×0.1mm×0.1μm）（SGE，美國(guó)）。進(jìn)樣口溫度280℃；進(jìn)樣量為1μL，分流比30:1，程序升溫：40℃保持2min，以30℃/min升溫至190℃后，再以2℃/min升溫至280℃并保持15min；離子源溫度：200℃；電離能量：70eV；檢測(cè)器電壓：1.1kV；接口溫度：280℃；質(zhì)量掃描范圍：m/z71~385；冷氣流量3L/min，熱氣溫度370℃；調(diào)制周期5s；熱噴時(shí)間350ms。

2.3.2 油脂樣品的甲酯化

先將25%的四甲基氫氧化銨（TMAH）溶液和無(wú)水甲醇按照1:50（v/v）配成甲酯化試劑，然后準(zhǔn)確量取20μL油脂樣品溶于2mL乙醚溶液，搖勻，最后分別量取制好的油脂樣品乙醚液和甲酯化試劑各400μL于樣品瓶中，振搖，形成銨鹽后進(jìn)樣分析。

3 結(jié)果與討論

3.1 不同地區(qū)同種動(dòng)物油的檢驗(yàn)

3.1.1 豬油的檢驗(yàn)

根據(jù)2.3的實(shí)驗(yàn)方法，對(duì)北京、河南開(kāi)封、黑龍江賓西、山東濟(jì)南、江蘇徐州等地的豬油進(jìn)行檢驗(yàn)，其二維色譜圖如圖1所示。

圖1 不同地區(qū)豬油的二維色譜圖

由圖1可知，不同地區(qū)的豬油樣品中均檢出了月桂酸（C12:0），肉豆蔻酸（C14:0），棕櫚油酸（C16:1），棕櫚酸（C16:0），十七烯酸（C17:1），十七烷酸（C17:0），一維保留時(shí)間分別為33.75min、35.67min、36.00min、36.58min、37.25min的十八碳二烯酸（C18:2）的5種結(jié)構(gòu)異構(gòu)體，油酸（C18:1），硬脂酸（C18:0），花生烯酸（C20:1），花生酸（C20:0），一維保留時(shí)間分別為41.42min、43.33min、43.67min的二十碳二烯酸的3種結(jié)構(gòu)異構(gòu)體等脂肪酸成分，且各脂肪酸甲酯的斑點(diǎn)位置穩(wěn)定，含量接近，可作為豬油的特征脂肪酸。

3.1.2 牛油的檢驗(yàn)

根據(jù)2.3的實(shí)驗(yàn)方法，對(duì)不同地區(qū)的牛油進(jìn)行檢驗(yàn)，并比較了檢出的脂肪酸成分，在不同地區(qū)的牛油樣品中共檢出25種脂肪酸，其中，十二烷酸、12甲基十三烷酸只在部分牛油樣品中檢出，而其余23種脂肪酸在所有樣品中均被檢出。因此，確定牛油共有23種脂肪酸可以作為其特征脂肪酸，如下表所示。

表 牛油的特征脂肪酸

3.1.3 羊油的檢驗(yàn)

按照豬油中特征脂肪酸的確定方法，對(duì)不同地區(qū)羊油的二維色譜圖進(jìn)行比較，確定肉豆蔻酸（C14:0），13甲基十四烷酸，12甲基十四烷酸，十五烷酸，14甲基十五烷酸，棕櫚油酸（C16:1），棕櫚酸（C16:0），十七烯酸（C17:1），十七烷酸（C17:0），16甲基十七烷酸，一維保留時(shí)間分別為33.75min、35.67min、36.00min、36.58min、37.25min的十八碳二烯酸（C18:2）的5種結(jié)構(gòu)異構(gòu)體，油酸（C18:1），硬脂酸（C18:0），花生烯酸（C20:1），花生酸（C20:0）為羊油的特征脂肪酸。

3.1.4 雞油的檢驗(yàn)

按照豬油中特征脂肪酸的確定方法，比較不同地區(qū)雞油中檢出的19種脂肪酸成分，確定肉豆蔻酸（C14:0），棕櫚油酸（C16:1），棕櫚酸（C16:0），一維保留時(shí)間分別為33.75min、35.67min、36.00min、36.58min、37.25min的十八碳二烯酸（C18:2）的5種結(jié)構(gòu)異構(gòu)體，油酸（C18:1），硬脂酸（C18:0）及花生烯酸（C20:1）為雞油的特征脂肪酸。

3.2 不同動(dòng)物油中特征脂肪酸的比較

對(duì)3.1中確定的不同動(dòng)物油的特征脂肪酸進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)4種動(dòng)物油中雞油的脂肪酸相對(duì)簡(jiǎn)單，僅檢出11種成分，而牛油的脂肪酸種類最多，達(dá)23種。同時(shí)，雞油中檢出的肉豆蔻酸（C14:0），棕櫚油酸（C16:1），棕櫚酸（C16:0），一維保留時(shí)間分別為33.75min、35.67min、36.00min、37.25min的4種十八碳二烯酸（C18:2），油酸（C18:1），硬脂酸（C18:0）及花生烯酸（C20:1）等脂肪酸成分在其他3種動(dòng)物油中均被檢出，為4種動(dòng)物油的共有脂肪酸，不能作為區(qū)分不同動(dòng)物油的依據(jù)。但牛油、羊油中檢出的十五烷酸、棕櫚酸、十七烷酸、硬脂酸的甲基異構(gòu)體，在豬油、雞油中并未檢出，可作為區(qū)分牛油、羊油和豬油、雞油的依據(jù)。同時(shí)，豬油中檢出的二十碳二烯酸的3種結(jié)構(gòu)異構(gòu)體在其他3種動(dòng)物油中也并未檢出，由此又可將豬油加以區(qū)分，最后，牛、羊油中的特征脂肪酸成分種類雖然不同，但牛油中的C14:1、C19:1、C19:0含量較低，不足以將其作為兩者區(qū)分的依據(jù)。因此，牛油、羊油單純依靠檢出的脂肪酸成分無(wú)法將其有效區(qū)分。綜上，根據(jù)脂肪酸成分的不同，4種動(dòng)物油可被初步分為雞油、豬油和牛羊油3類。不同動(dòng)物油的二維色譜圖如圖2所示。

圖2 不同動(dòng)物油的二維色譜圖

4 結(jié)論

利用全二維氣相色譜-質(zhì)譜法檢驗(yàn)了不同地區(qū)不同種類動(dòng)物油的脂肪酸成分，分別比較了不同地區(qū)相同動(dòng)物油及不同動(dòng)物油的脂肪酸組成，通過(guò)分析，發(fā)現(xiàn)不同地區(qū)同一種類動(dòng)物油的脂肪酸成分基本一致，而不同種類動(dòng)物油的脂肪酸成分差異明顯，從而提供了區(qū)分豬油、牛羊油、雞油等不同種類動(dòng)物油的依據(jù)，可應(yīng)用于公安實(shí)踐中動(dòng)物油的檢驗(yàn)鑒定，為案件偵查提供幫助。

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（責(zé)任編輯：孟凡騫）

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2095-7939（2017）04-0084-04

10.14060/j.issn.2095-7939.2017.04.016

2016-12-19

時(shí)秋娜（1979-），女，河南開(kāi)封人，河南警察學(xué)院刑事科學(xué)技術(shù)系講師，主要從事微量物證與毒物毒品檢驗(yàn)研究。