何春歡 李 紅 李 嘉* 張 穎 陳 鋒 姜平川

1.廣西壯族自治區(qū)中醫(yī)藥研究院，廣西 南寧 530022；2. 廣西中藥質(zhì)量標準研究重點實驗室，廣西 南寧 530022

壯藥異葉爬山虎質(zhì)量標準研究

何春歡1,2李 紅1,2李 嘉1,2*張 穎1,2陳 鋒1,2姜平川1,2

1.廣西壯族自治區(qū)中醫(yī)藥研究院，廣西 南寧 530022；2. 廣西中藥質(zhì)量標準研究重點實驗室，廣西 南寧 530022

目的：建立廣西壯藥異葉爬山虎質(zhì)量標準。方法：采用顯微鑒別、薄層色譜鑒別、水分、總灰分、浸出物等項目系統(tǒng)研究。結(jié)果：異葉爬山虎的薄層色譜鑒別特征明顯，制定了顯微鑒別、水分、總灰分和浸出物的控制指標。結(jié)論：異葉爬山虎建立顯微鑒別與薄層色譜鑒別項，水分不得過15.0%，總灰分不得過12.5%，浸出物不得少于4.0%。

異葉爬山虎；質(zhì)量標準；顯微鑒別；薄層鑒別

異葉爬山虎又名異葉地錦，為葡萄科植物異葉地錦ParthenocissusdalzieliiGagnep.的根、莖，分布于廣西、浙江、安徽、廣東等地。具有祛風(fēng)除濕、通龍路、通火路、止血、解毒等功效，臨床用于風(fēng)濕痹痛、偏頭痛、風(fēng)濕瘡毒、骨折等病癥[1]。研究表明異葉爬山虎含多糖及紅色素[2-3]。項目組前期研究發(fā)現(xiàn)，異葉爬山虎乙酸乙酯部位有較好的自由基清除能力，并分離得到了6個化合物：豆甾-4-烯-3-酮、胡蘿卜苷、芹菜素、木犀草素、槲皮素、槲皮素3-O-β-D-葡萄糖苷，且建立了 HPLC測定異葉爬山虎中槲皮素3-O-β-D-葡萄糖苷含量的方法[4-5]。筆者主要對異葉爬山虎顯微鑒別、薄層鑒別、水分、灰分、浸出物等進行研究，為系統(tǒng)評價廣西異葉爬山虎質(zhì)量提供科學(xué)依據(jù)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 XS-205分析天平(梅特勒托利多儀器有限公司)；LY-HPCCD 萬能視頻成像裝置(成都勵揚精密機電有限公司)；SX2-2.5-10馬弗爐(沈陽市節(jié)能電爐廠)；DFY-500高速萬能粉碎機(溫嶺市林大機械有限公司)。

1.2 試藥 異葉爬山虎采自廣西南寧、貴港等地(見表1)，經(jīng)本院黃云峰副研究員鑒定為葡萄科植物異葉地錦ParthenocissusdalzieliiGagnep.的根、莖。對照藥材(自制，編號YYPSH-1，經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)韋松基教授和廣西中醫(yī)藥研究院賴茂祥研究員鑒定為葡萄科植物異葉地錦ParthenocissusdalzieliiGagnep.)。實驗所用試劑均為分析純。

表1 異葉爬山虎樣品信息

2 方法與結(jié)果

2.1 鑒別

2.1.1 顯微鑒別 取部分藥材的莖葉按石蠟切片法制作橫切面片，取適量藥材粉碎過五號篩后按粉末制片法制作粉末片。組織結(jié)構(gòu)和粉末圖在顯微鏡下經(jīng)LY-HPCCD萬能視頻成像裝置拍攝成像。經(jīng)比對，8個批次的異葉爬山虎藥材顯微鑒別均符合特征規(guī)定。2.1.1.1 莖橫切面 木栓層細胞6～12列，扁方形或方圓形，淡黃色。皮層細胞數(shù)列，圓形或橢圓形，棕黃色，細胞之間有裂隙，有的薄壁細胞內(nèi)含有草酸鈣針晶或簇晶，簇晶直徑10～21μm。韌皮部細胞類圓形，韌皮纖維數(shù)個成團層狀排列，纖維細胞壁薄，纖維周圍的薄壁細胞中有的含有草酸鈣方晶，方晶直徑12～31μm。木質(zhì)部導(dǎo)管散在分布，直徑25～106μm；木射線細胞3～8列，含棕黃色分泌物質(zhì)或草酸鈣方晶，方晶直徑9～26μm。髓部約占莖的1/3，多萎縮而中空。見圖1。

2.1.1.2 葉的橫切面 上、下表皮細胞各1列，上表皮細胞稍大， 長方形，下表皮細胞較小。柵欄組織一列，圓柱形，不通過中脈。海綿組織細胞類圓形，排列疏松。中脈較大，由6個維管束組成，外韌型，木質(zhì)部導(dǎo)管較大；韌皮部所占面積較少。維管束外有中柱鞘纖維斷續(xù)環(huán)繞，纖維周圍的薄壁細胞有的含有草酸鈣方晶，直徑6～15μm。有的細胞之間有裂隙。葉上下表皮主脈處突起。見圖2。

2.1.1.3 粉末 棕黃色。纖維淡黃色，成束或分離，先端漸尖或斜截，纖維壁較薄，微木化，胞腔較大，有人字或一字形紋孔，纖維直徑16～30μm。草酸鈣針晶束多見，散在或存在粘液細胞內(nèi)；草酸鈣方晶直徑5～33μm；草酸鈣簇晶較少，直徑21～42μm。導(dǎo)管淡黃色，螺紋或梯紋導(dǎo)管，直徑46～113μm。下表皮細胞多邊形，垂周壁微波狀彎曲，氣孔多為不定式；葉上表皮細胞不規(guī)則多邊形，垂周壁稍平直。見圖3。

2.1.2 薄層色譜鑒別 取本品粉末2g，加甲醇20mL，超聲提取30min，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇1mL使溶解，作為供試品溶液。另取異葉爬山虎對照藥材2g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2015年版四部通則0502)試驗，吸取上述2種溶液各5～10μL，分別點于同一硅膠G板上，以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(6∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(圖4)。

2.2 檢查

2.2.1 水分 照水分測定法(中國藥典2015年版四部通則0832第二法)測定。共考察測定了8批樣品的水分含量，測定兩次取平均值。8批異葉爬山虎藥材最高水分含量為14.3%，最低水分含量為12.0%，因此，水分含量擬定不超過15.0%。見表2。

表2 異葉爬山虎樣品水分含量測定結(jié)果

2.2.2 總灰分 照灰分測定法(中國藥典2015年版四部通則2302)測定，共考察測定了8批異葉爬山虎藥材樣品的總灰分含量。8批異葉爬山虎樣品總灰分含量試驗結(jié)果為：最高總灰分為11.2%，最低總灰分含量為7.5%，因此，將本品總灰分擬定為不得超過12.5%。見表3。

表3 異葉爬山虎樣品總灰分測定結(jié)果

2.2.3 浸出物 照醇溶性浸出物測定法(中國藥典2015年版四部通則2201)項下的熱浸法，以乙醇為溶劑，共測定了8批異葉爬山虎藥材樣品的浸出物含量。8批異葉爬山虎藥材醇溶性浸出物最高含量為10.4%，最低含量為4.6%，故制定異葉爬山虎藥材醇溶性浸出物含量時，照醇溶性浸出物測定法(中國藥典2015年版四部通則2201)項下的熱浸法，不得少于4.0%。見表4。

表4 異葉爬山虎樣品醇溶性浸出物測定結(jié)果

3 討論

異葉爬山虎最為顯著的性狀特征是：卷須頂端嫩時膨大呈圓珠形，老后卷須不伸長，葉明顯兩型，即長枝上為單葉，短枝上為3小葉，花序分枝明顯退化，著生在顯著縮短的短枝上，花萼邊緣全緣[6]。顯微鑒別要點有：莖橫切面皮層薄壁細胞內(nèi)含有草酸鈣針晶或簇晶，韌皮部韌皮纖維層狀排列，纖維周圍的薄壁細胞中含有草酸鈣方晶；葉橫切面中脈由6個維管束組成，維管束外有中柱鞘纖維斷續(xù)環(huán)繞，纖維周圍的薄壁細胞有的含有草酸鈣方晶；粉末中草酸鈣針晶束和草酸鈣方晶較多，草酸鈣簇晶較少，導(dǎo)管為螺紋或梯紋導(dǎo)管。

[1]梁啟成, 鐘鳴. 中國壯藥學(xué)[M]. 南寧: 廣西民族出版社, 2005: 78.

[2]董愛文, 趙虹橋, 施立毛. 爬山虎植物多糖含量的比較研究[J]. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā), 2005, 17(6): 746-749.

[3]卜曉英, 陳曉華, 麻明友. 野生異葉爬山虎果皮紅色素提取及穩(wěn)定性研究[J]. 食品科學(xué), 2010, 31(2): 17-21.

[4]李嘉, 張穎, 何春歡, 等. 中藥異葉爬山虎抗氧化活性部位化學(xué)成分研究[J]. 中南藥學(xué), 2015, 13(12): 1274-1276.

[5]張穎, 李嘉, 何春歡, 等 . 高效液相色譜法測定異葉爬山虎中異槲皮苷的含量[J]. 安徽醫(yī)藥, 2017, 21(1): 46-48.

[6]中國植物志編輯委員會. 中國植物志(第48卷)[M]. 北京：科學(xué)出版社，1998.

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廣西科技廳重大專項計劃課題(桂科重1355001-4-7)；廣西科技廳重大專項計劃課題(桂科重1598005-10)；廣西食品藥品監(jiān)督管理局課題(MZY2015002)；廣西中藥質(zhì)量標準研究重點實驗室課題(桂中重自201410)。

何春歡(1985-)，男，壯族，碩士研究生，助理研究員，研究方向為質(zhì)量標準研究及天然產(chǎn)物活性研究。E-mail:hechunhuan0@163.com

李嘉(1969-)，女，漢族，碩士研究生，副主任藥師，研究方向為中藥新藥研究。E-mail：1343157882@qq.com

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1007-8517(2017)16-0030-03

2017-06-14 編輯：程鵬飛)