李桂艷　孟麗

【摘要】 目的 探究在妊娠期糖尿病孕婦體內(nèi)轉(zhuǎn)化生長因子β2（TGF-β2）、轉(zhuǎn)化生長因子β受體Ⅱ （TGFβRⅡ）的表達情況并分析其臨床意義。方法 78例妊娠期糖尿病孕婦作為觀察組， 78例正常孕婦作為對照組， 對兩組的TGF-β2、TGFβRⅡ的表達情況進行檢測， 并進行組間比較。結(jié)果 觀察組血清中的TGF-β2水平（384.72±35.94）pg/ml高于對照組的（161.63±21.90）pg/ml， 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。觀察組TGF-β2、TGFβRⅡ的mRNA水平均高于對照組， 差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。觀察組中TGF-β2、TGFβRⅡ的陽性率92.31%、87.18%均明顯高于對照組的23.08%、20.51%， 差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 妊娠期糖尿病患者及正常孕婦的TGF-β2、TGFβRⅡ表達差異很大， TGF-β2、TGFβRⅡ聯(lián)合檢測對妊娠期糖尿病的診斷有很高的臨床價值。

【關(guān)鍵詞】 妊娠期糖尿病；轉(zhuǎn)化生長因子β2；轉(zhuǎn)化生長因子β受體Ⅱ

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.21.057

妊娠期糖尿病是妊娠期婦女多見的一種疾病， 在我國的發(fā)病率高達80%， 嚴重威脅產(chǎn)婦和圍生兒的生命安全[1]。孕婦在處于妊娠期時， 隱性糖尿病則會顯性化， 使得無糖尿病既往史的孕婦引發(fā)妊娠期糖尿病。據(jù)報道， 患有妊娠期糖尿病的孕婦體內(nèi)的TGF-β2、TGFβRⅡ水平會發(fā)生異常表達[2]。因此， 本研究通過聯(lián)合檢測TGF-β2、TGFβRⅡ在患有妊娠期糖尿病孕婦體內(nèi)的表達而評價其臨床意義， 詳細報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選擇2014年3月～2016年3月本院就診的78例妊娠期糖尿病孕婦作為觀察組， 均符合本院醫(yī)學(xué)倫理委員會相關(guān)要求， 且患者知情， 年齡23～35 歲， 平均年齡（27.54±2.84）歲；孕周35～39周， 平均孕周（37.04±2.03）周。

選取同期來本院體檢的正常孕婦78例作為對照組， 年齡25～34 歲， 平均年齡（26.89±2.73）歲；孕周35～40周， 平均孕周（37.24±2.04）周。兩組年齡、孕周等一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 試劑與方法

1. 2. 1 試劑 研究所用試劑均從R&D Systems 公司購買。

1. 2. 2 標本收集 兩組研究對象在早晨空腹時， 抽取1.8 ml靜脈血， 裝入試管中， 混勻， 靜置30 min后， 離心15 min， 分離血清待用， 貯存于-20℃。在剖宮產(chǎn)術(shù)中過程中， 切下一塊胎盤組織， 沖洗干凈， 待用。

1. 2. 3 酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）法 使用貯存的血清檢測TGF-β2水平。

1. 2. 4 實時熒光定量聚合酶鏈式反應(yīng)（Real-time PCR）方法 提取RNA， 檢驗合格后， 進行實驗， 以甘油醛-3-磷酸脫氫酶（GAPDH）為內(nèi)參， 每個樣品設(shè)置3個復(fù)孔， 經(jīng)檢測后， 并計算mRNA的相對表達情況。

1. 2. 5 免疫組化方法[3] 經(jīng)常規(guī)方法處理組織， 石蠟包埋連續(xù)切片， 用免疫組化方法進行TGF-β2、TGFβRⅡ染色， 使用AEC顯色， 用蘇木素進行復(fù)染。其中陰性對照為PBS 緩沖液， 陽性對照為已經(jīng)確診的妊娠期糖尿病。

1. 3 觀察指標及判定標準 比較兩組血清TGF-β2水平及TGF-β2、TGFβRⅡ的mRNA水平。觀察兩組TGF-β2、TGFβRⅡ的表達情況， 用顯微鏡觀察所有切片， 其中陽性細胞的細胞膜、細胞質(zhì)、細胞核呈現(xiàn)為淡黃色至棕色；按照陽性細胞的比例及染色程度分為以下三類， （-）：細胞無染色；（+）：陽性細胞的數(shù)量<50%， 細胞呈淺黃色， 稀少；（++）：陽性細胞的數(shù)量>50%， 細胞呈黃色， 密集。

1. 4 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計量資料以均數(shù)±標準差（ x-±s）表示， 采用t檢驗；計數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 兩組血清中的TGF-β2水平比較 觀察組血清中的TGF-β2水平（384.72±35.94）pg/ml高于對照組的（161.63±

21.90）pg/ml， 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。

2. 2 兩組TGF-β2、TGFβRⅡ的mRNA水平比較 觀察組TGF-β2、TGFβRⅡ的mRNA水平均高于對照組， 差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2. 3 兩組TGF-β2、TGFβRⅡ的表達情況比較 觀察組中TGF-β2、TGFβRⅡ的陽性率92.31%、87.18%均明顯高于對照組的23.08%、20.51%， 差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

3 討論

妊娠期糖尿病會因糖尿病的病情以及控制血糖的水平而對母體和圍生兒有不同程度的影響。血糖過高會影響胚胎的正常發(fā)育， 流產(chǎn)率超過15%[4-7]。若控制不好血糖， 孕婦感染的發(fā)生率明顯提高， 進而加重糖代謝紊亂， 還可能引起酮癥酸中毒等。妊娠期糖尿病會使胎兒發(fā)育過大， 導(dǎo)致難產(chǎn)， 損傷產(chǎn)婦產(chǎn)道， 增加剖宮產(chǎn)幾率[4， 8-10]。因此， 尋找便捷、有效、快速的確診方法是至關(guān)重要的。

正常孕婦體內(nèi)， 細胞因子處于平衡狀態(tài)， 有利于孕婦正常妊娠。而TGF-β2是一種促炎因子， 并通過其受體 TGFβRⅡ發(fā)揮促炎作用[5]。在正常孕婦體內(nèi)， TGF-β2、TGFβRⅡ的表達量比非孕婦高， 而患有妊娠期糖尿病孕婦體內(nèi)表達更多。本研究中， ELISA實驗結(jié)果顯示， 觀察組TGF-β2水平高于對照組， 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。Real-time PCR實驗結(jié)果顯示， 觀察組TGF-β2、TGFβRⅡ的mRNA水平均高于對照組， 差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。免疫組化結(jié)果表明， 觀察組中TGF-β2及TGFβRⅡ的陽性率均明顯高于對照組， 差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。

綜上所述， 妊娠期糖尿病患者及正常孕婦的TGF-β2、TGFβRⅡ表達差異很大， TGF-β2、TGFβRⅡ聯(lián)合檢測對妊娠期糖尿病的診斷有很高的臨床價值。

參考文獻

[1] 楊秀華， 郭峰. TGF-β2、TGFβRⅡ在妊娠期糖尿病的表達. 現(xiàn)代婦產(chǎn)科進展， 2017， 26（1）：23-25.

[2] 楊秀華， 郭峰， 任麗娜， 等. TGF-β2和TGFβRⅡ在外陰鱗癌中的表達及意義. 現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展， 2016， 16（19）：3751-3754.

[3] 雷開容. RBP4與TGF-β1在妊娠糖尿病患者血清中表達相關(guān)性研究. 重慶醫(yī)學(xué)， 2015（7）：967-968.

[4] 李智慧， 黃鳳霞. 血清胱抑素C、β2-微球蛋白聯(lián)合檢測在妊娠期糖尿病早期腎損害中的診斷意義. 臨床醫(yī)學(xué)工程， 2016， 23（4）：463-464.

[5] 趙靜， 李喜梅， 胡型忠， 等. TGF-β1基因多態(tài)性與妊娠期糖尿病的相關(guān)性研究. 中國婦幼健康研究， 2014， 25（1）：35-37.

[6] 楊慧霞. 2011年妊娠期糖尿病國際診斷標準解讀. 中國醫(yī)學(xué)前沿雜志（電子版）， 2011， 3（4）：19-20.

[7] 楊慧霞. 妊娠期糖尿病的篩查與診斷. 中華圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)雜志， 2005， 8（5）：316-317.

[8] 魏玉梅， 楊慧霞. 妊娠期糖尿病不同診斷標準適宜性的比較. 中華婦產(chǎn)科雜志， 2011， 46（8）：578-581.

[9] 王美記， 牛健民， 溫濟英， 等. 妊娠期糖尿病的孕期管理對妊娠結(jié)局的影響. 廣東醫(yī)學(xué)， 2009， 30（6）：900-901.

[10] 楊慧霞. 重視妊娠期糖尿病國際新標準的臨床應(yīng)用. 國際婦產(chǎn)科學(xué)雜志， 2011， 38（3）：172-173.

[收稿日期：2017-05-26]endprint