□ 孟維偉 陳惠琴 趙金利 鐘玉心 蔡偉誼 廣州市食品檢驗(yàn)所

固相萃取-高效液相色譜法測定食用油脂中的苯并[a]芘

□ 孟維偉 陳惠琴 趙金利 鐘玉心 蔡偉誼 廣州市食品檢驗(yàn)所

采用Ploy-sery MIP-BAP固相萃取小柱富集苯并[a]芘，應(yīng)用高效液相色譜梯度洗脫法，以C18為色譜柱，乙腈為流動(dòng)相，采用熒光法測定六種植物油中苯并[a]芘的含量。結(jié)果表明，苯并[a]芘在1.0～30 ng/mL色譜峰面積呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。用此法測定植物油中苯并[a]芘的加標(biāo)含量，回收率為90.1～95.2%。

高效液相色譜法；熒光檢測；固相萃取；苯并[a]芘

苯并[a] 是多環(huán)芳香烴類化合物，在環(huán)境中普遍存在，有強(qiáng)致癌作用。植物油中含有一定量的苯并[a] 。目前，食用油脂中苯并[a] 的分析方法主要有紙（板）色譜法、氣相色譜法、高效液相色譜法和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法。隨著分離分析技術(shù)的發(fā)展，出現(xiàn)商品化的固相萃取柱子，固相萃取與液相色譜檢測技術(shù)應(yīng)用于油脂中苯并 的檢測。與傳統(tǒng)方法相比，固相萃取可以提高重復(fù)性、節(jié)約溶劑消耗，操作比較繁瑣。因此，尋求并研究快速、準(zhǔn)確檢測食用油中苯并[a] 的技術(shù)具有十分重要的意義[1]。

本文采用固相萃取-高效液相色譜法建立食用油中苯并 的測定方法，利用外標(biāo)法定量，并且與國標(biāo)方法比較。結(jié)果顯示：該方法靈敏、快速，適合于食用油中苯并［a］ 檢測。

1 實(shí)驗(yàn)材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

苯并［a］ 標(biāo)準(zhǔn)品（純度98%，DR公司）；正己烷AR；二氯甲烷AR；乙腈AR；Ploy-sery MIP-BAP固相萃取小柱（安譜公司）；有機(jī)系濾膜0.22 μm（安譜公司）；去離子水。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器

安捷倫1260高效液相色譜配有熒光檢測器，固相萃取裝置，混合振蕩器，氮吹儀。

1.3 分析方法

1.3.1 配制標(biāo)準(zhǔn)溶液

用乙腈配制0.1 mg/mL的苯并［a］ （一級(jí)單標(biāo)儲(chǔ)備液，儲(chǔ)存于棕色玻璃瓶中，于-20 ℃下保存。

1.3.2 樣品前處理

稱取0.5 g食用油至15 mL離心管中，加入3 mL正己烷，在渦旋混合振蕩溶解10 s。SPE活化：依次用5 mL二氯甲烷，5 mL正己烷活化Ploy-sery MIP-BAP固相萃取小柱。將樣品上樣到在小柱上，然后再用2 mL正己烷潤洗離心管，再將潤洗液上樣到小柱上，用10 mL正己烷淋洗小柱。用5 mL二氯甲烷洗脫，收集到氮吹管中。將收集液在40 ℃下氮吹干，用1 mL乙腈定容，渦旋30 s，過膜至上機(jī)瓶中，待上機(jī)。

1.3.3 色譜條件

安捷倫C18色譜柱250 mm×4.6 mm，內(nèi)徑5.0 μm；流動(dòng)相為乙腈∶水=90∶10；流速1.0 mL/min；柱溫度35 ℃；進(jìn)樣量10 μL；激發(fā)波長384 nm，發(fā)射波長406 nm。

1.3.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

配制標(biāo)準(zhǔn)曲線的濃度為1.0、5.0、10、20、30 ng/mL。按照高效液相色譜條件1.3.3分析，以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)溶液峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線Y=1.575 54X+0.149 85，R值0.999 87。

2 結(jié)果與討論

2.1 方法檢測性能

本方法采用安譜公司生產(chǎn)專門用于苯并[a] 檢測的Ploy-sery MIPBAP固相萃取柱，在去除雜質(zhì)能力方面有顯著效果。實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有前處理譜圖（食用油）見圖1，安譜SPE小柱凈化后色譜圖（食用油）見圖2。

對(duì)比以上兩幅圖，可以明顯看出樣品經(jīng)過SPE小柱的凈化之后，色譜峰更加漂亮，同時(shí)去除食用油中雜質(zhì)的干擾，確認(rèn)目標(biāo)物更加容易。

2.2 方法應(yīng)用

為考察方法的實(shí)用性,按照上述實(shí)驗(yàn)方法及選擇的條件，分析不同植物油中苯并[a] 含量，結(jié)果列于表1，通過將標(biāo)準(zhǔn)苯并[a] 溶液加入試樣回收實(shí)驗(yàn)，結(jié)果見表1。

3 結(jié)論

采用安譜公司生產(chǎn)的Ploy-sery MIP-BAP固相萃取柱，在檢測食用油脂中苯并[a] 含量方面，達(dá)到去除大量雜質(zhì)目的，并與國標(biāo)法GB5009.27—2016比較，前處理快速簡便，回收率在90.1～95.2%。結(jié)果顯示：該方法靈敏、快速，適合于食用油中苯 并［a］ 檢測。

圖1 實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有前處理譜圖（食用油）

圖2 安譜SPE小柱凈化后色譜圖（食用油）

表1 不同樣品分析結(jié)果表

[1]仲岳桐.高效液相色譜法測定植物油中特丁基對(duì)苯二酚[J].中國食品衛(wèi)生雜志,1997(zs):75.

基于石墨烯磁性材料-TOF質(zhì)譜方法的面制品中高分子非法添加物檢驗(yàn)技術(shù)研究（編號(hào)：2016A030313564）。項(xiàng)目類別：廣東省自然科學(xué)基金-自由申請(qǐng)。