莫?jiǎng)P迪，吳勝明，楊建榮，李碧錦，何二松，

林昌榮1，許宇彪1，唐 毅1，潘頤聰1，李 軍1，凌凱南1，季志強(qiáng)1

（1．廣西壯族自治區(qū)江濱醫(yī)院普通外科，廣西 南寧 530021；2．廣西壯族自治區(qū)腫瘤醫(yī)院病理科，廣西 南寧 530021）

Bmi-1在乳腺癌組織中的表達(dá)及臨床意義

莫?jiǎng)P迪1，吳勝明2*，楊建榮1，李碧錦1，何二松1，

林昌榮1，許宇彪1，唐 毅1，潘頤聰1，李 軍1，凌凱南1，季志強(qiáng)1

（1．廣西壯族自治區(qū)江濱醫(yī)院普通外科，廣西 南寧 530021；2．廣西壯族自治區(qū)腫瘤醫(yī)院病理科，廣西 南寧 530021）

目的 探究Bmi-1在乳腺癌組織中表達(dá)及其臨床意義。方法 采集60例乳腺癌和癌旁組織，采用免疫組化法檢測(cè)Bmi-1的蛋白表達(dá)水平和組織定位，再用配對(duì)T檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，比較癌和癌旁的表達(dá)差異。結(jié)果 Bmi-1主要定位于細(xì)胞核，其表達(dá)水平在癌組織中顯著高于癌旁組織（P＜0.05）；Bmi-1表達(dá)水平在浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌和其他病理類型的乳腺癌組織中無顯著差異（P＞0.05）；在腫瘤組織＜2 cm和≥2 cm的乳腺癌組織中亦無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的Bmi-1表達(dá)水平則顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組（P＜0.05）。結(jié)論 Bmi-1在乳腺癌組織中高表達(dá)，其表達(dá)水平與病理類型和腫瘤大小無關(guān)，但是與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。

Bmi-1蛋白；乳腺癌；表達(dá)

Bmi-1基因是多疏基因家族中的一員，其能夠?qū)myc相互協(xié)同，從而達(dá)到幫助細(xì)胞轉(zhuǎn)化和細(xì)胞增值的作用，所以其在某種程度上也與腫瘤的生成有關(guān)。本篇文章的主要目的是探究Bmi-1在乳腺癌組織中的表達(dá)，從而探究Bmi-1基因的表達(dá)與乳腺癌的發(fā)生之間的關(guān)系。

1 材料和方法

1.1 一般資料

隨機(jī)選取廣西醫(yī)科大學(xué)附屬腫醫(yī)院收治的60例乳腺癌患者，患者年齡在4 3～7 5歲，平均年齡為（68.5±7.3）歲。所有患者均為女性，并且經(jīng)過手術(shù)病理組織全部確診為乳腺癌，根據(jù)病理類型分組，浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌占有50例，其他病理類型為10例；根據(jù)腫瘤的大小分組，37例患者的腫瘤直徑為2 cm以下，23例患者的腫瘤直徑超過2 cm；根據(jù)腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移的情況分組，其中33例患者發(fā)生了淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，27例患者沒有出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。

1.2 實(shí)驗(yàn)試劑和方法

本實(shí)驗(yàn)通過免疫組化SP法對(duì)乳腺癌組織中Bmi-1蛋白的表達(dá)進(jìn)行分析。

主要實(shí)驗(yàn)試劑：鼠抗Bmi-1單克隆抗體購(gòu)自ABCAM公司（貨號(hào)：ab14389）、免疫組化SP法試劑盒購(gòu)自中杉金橋公司（貨號(hào)：sp9000），DAB試劑盒、蘇木素、中性樹脂、PBS粉末等相關(guān)試劑均購(gòu)自中杉金橋公司。

實(shí)驗(yàn)方法：將石蠟標(biāo)本置于二甲苯中脫掉石蠟，時(shí)間為15 min，2次；使用乙醇進(jìn)行梯度水化處理，并用蒸餾水沖洗3 min；EDTA修復(fù)液進(jìn)行修復(fù)4 min，高火加熱使其沸騰，然后中低火加熱20 min充分暴露其抗原位點(diǎn)，自然冷卻之后用PBS漂洗，使用3%過氧化氫孵育10 min，從而將其內(nèi)部的內(nèi)源性過氧化物酶活性消除，PBS漂洗，滴加鼠抗人Bmi-1單克隆抗體，孵育過夜，使用PBS漂洗，使用DAB進(jìn)行顯色，5 min之后終止顯色，使用蘇木素復(fù)染，然后使用鹽酸乙醇分化，乙醇梯度脫水，二甲苯透明處理后，中性樹膠封片。最后進(jìn)行觀察。以上PBS漂洗步驟均為3 min×3次。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

運(yùn)用SPSS 14.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。癌和癌旁的比較使用配對(duì)T檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，根據(jù)臨床特征分組的結(jié)果使用成組設(shè)計(jì)的t檢驗(yàn)進(jìn)行比較，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 Bmi-1在乳腺癌和癌旁組織中的表達(dá)

Bmi-1在乳腺癌和癌旁組織中均有表達(dá)，其表達(dá)位置主要集中在細(xì)胞核（圖1）。配對(duì)T檢驗(yàn)結(jié)果顯示Bmi-1在乳腺癌組織中的表達(dá)水平顯著高于癌旁（P＜0.05）。

圖1 Bmi-1在乳腺癌和癌旁組織中的表達(dá)注：A：乳腺癌癌旁組織；B：乳腺癌組織

2.2 Bmi-1表達(dá)水平與乳腺癌臨床特征的關(guān)系

根據(jù)腫瘤大小、病理類型以及是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移對(duì)這60例樣本分組進(jìn)行比較（表1），結(jié)果顯示，根據(jù)腫瘤大小分組，Bmi-1的表達(dá)水平在腫瘤直徑＜2 cm和≥2 cm的乳腺癌組織中并無顯著差異；根據(jù)病理類型分組，浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌和其他病理類型的乳腺癌組織的Bmi-1的表達(dá)水平亦未見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌組織Bmi-1的表達(dá)水平顯著高于未見淋巴節(jié)轉(zhuǎn)移組。

表1 乳腺癌組織Bmi-1的表達(dá)水平（±s）

表1 乳腺癌組織Bmi-1的表達(dá)水平（±s）

注： ★與＜2 cm組比較，P＞0.05；◆與浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌組比較，P＞0.05；▲與有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組比較，P＜0.05

±s） 0.66±0.42 0.61±0.21★0.68±0.33 0.61±0.22◆0.75±0.38 0.60±0.31▲腫瘤直徑 病理類型 是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移＜2cm ≥2cm 浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌 其他 是 否病例數(shù) 37 23 50 10 33 27平均光密度值（x

3 討 論

Bmi-1基因是1991年由荷蘭癌癥中心在轉(zhuǎn)基因鼠的淋巴瘤細(xì)胞傳代的過程中發(fā)現(xiàn)的，由于Bmi-1基因能夠阻斷在細(xì)胞周期中兩種關(guān)鍵性蛋白（兩種蛋白為p16INK4a和p14ARF），并且其與原癌基因MYC具有相互協(xié)同作用，從而在某些程度上幫助細(xì)胞轉(zhuǎn)化和細(xì)胞增值，因此推測(cè)Bmi-1基因與腫瘤的發(fā)生發(fā)展也有一定的關(guān)系。Bmi-1基因表達(dá)產(chǎn)生的蛋白質(zhì)是一種轉(zhuǎn)錄抑制因子，其隸屬于Ployccmb家族當(dāng)中，其主要定位于染色質(zhì)、染色體或者是細(xì)胞質(zhì)進(jìn)行表達(dá)。

Bmi-1基因通過一定的作用和途徑與乳腺癌浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的相關(guān)基因進(jìn)行作用，然后對(duì)腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移進(jìn)行調(diào)節(jié)。其中Bmi-1基因在某種程度上作為一種癌基因，在乳腺癌細(xì)胞中高度表達(dá)，并且適當(dāng)調(diào)節(jié)細(xì)胞周期，從而抑制癌細(xì)胞的P53蛋白和PRb蛋白的表達(dá)，抑制細(xì)胞凋亡，從而導(dǎo)致細(xì)胞腫瘤化。另外一方面，Bmi-1基因還能夠進(jìn)一步激活端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶，從而誘導(dǎo)端粒酶的復(fù)活，從而阻止癌細(xì)胞的衰老。端粒DNA一般存在染色體的末端，隨著細(xì)胞復(fù)制次數(shù)的增多，端粒酶DNA的長(zhǎng)度逐漸縮短，在細(xì)胞復(fù)制到足夠多的次數(shù)之后，縮短的端粒使染色體相互融合，從而造成細(xì)胞的死亡。而端粒酶的作用就是恢復(fù)縮短的端粒，從而是端?；謴?fù)原來的長(zhǎng)度，這樣就會(huì)造成癌細(xì)胞的永生。

乳腺癌的發(fā)生和治療均與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有密切的關(guān)系，一般淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者均會(huì)有不好的后果。從本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果能夠看出，Bmi-1基因在乳腺癌組織中高表達(dá)，而且與乳腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，提示了Bmi-1基因與乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中有非常重要的作用，這為乳腺癌的預(yù)后判斷和治療提供了新的依據(jù)。

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本文編輯：吳 衛(wèi)

R737.9

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ISSN.2095-8242.2017.24.4606.02

吳勝明