王蕊 周聯(lián)東 劉經(jīng)緯 孫佩 李進生 王文濤

摘要 [目的]研究黃淮海區(qū)玉米青枯病的田間自然篩選及接種鑒定。[方法]采用試驗室接種鑒定及大田自然鑒定的方法，研究25份玉米自交系和61份群體材料對玉米青枯病的抗病表現(xiàn)。[結果]篩選出9份自交系及26份群體材料的抗病等級都在R（抗?。┮陨?。多數(shù)種質(zhì)資源的抗病性集中在3級和5級，為R（抗病）和MR（中抗）材料；未發(fā)現(xiàn)有9級（高感）材料。[結論]該研究為玉米青枯病在黃淮海區(qū)的防治提供技術參考。

關鍵詞 玉米；青枯?。辉囼炇医臃N鑒定；大田自然鑒定

中圖分類號 S503 文獻標識碼 A 文章編號 0517-6611（2017）07-0033-02

Field Natural Selection and Inoculation Identification of Corn Bacterial Wilt in Huanghuaihai Region

WANG Rui，ZHOU Lian-dong，LIU Jing-wei et al

（Xinxiang Academy of Agricultural Sciences of Henan Province，Xinxiang，Henan 453000）

Abstract [Objective] To research the field natural selection and inoculation identification of corn bacterial wilt in Huanghuaihai Region.[Method] Laboratory inoculation identification and field natural identification methods were adopted to research the performance of 25 corn inbred lines and 61 populations to corn bacterial wilt.[Result] A total of 9 corn inbred lines and 26 populations were screened with the resistance level above R.Disease resistance level of most germplasm resources were concentrated at levels 3 and 5，which were R （resistance） and MR （middle resistance）.There were no germplasm resources above level 9.[Conclusion] This research provides technical references for the control of corn bacterial wilt in Huanghuaihai Region.

Key words Corn；Bacterial wilt；Laboratory inoculation identification；Field natural identification

青枯病是在我國黃淮海玉米產(chǎn)區(qū)普遍發(fā)生的一種主要病害，遇到大流行年份，發(fā)病來勢猛，災害嚴重。從開始發(fā)病到全株枯萎，一般只需5～7 d，感病快的僅1～3 d。引起玉米青枯病的病原，國內(nèi)大致有3種觀點：一是由腐霉菌侵染引起；二是由鐮刀菌侵染引起；三是由腐霉菌和鐮刀菌復合侵染引起。鑒于此，該研究于2013—2014年收集部分種質(zhì)資源，對玉米青枯病抗性進行鑒定與評價分析，旨在篩選出優(yōu)異的抗病核心種質(zhì)，為生產(chǎn)上采取有效的防病措施提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試材料共86份，包括25份玉米自交系和61份群體材料，均由新鄉(xiāng)市農(nóng)業(yè)科學院生物技術研究所提供。致病菌菌株為禾谷鐮刀菌，于2014年5月由新鄉(xiāng)市農(nóng)業(yè)科學院生物技術研究所繁殖。

1.2 試驗方法

1.2.1 大田自然鑒定方法。

鑒定材料于田間隨機排列，鑒定小區(qū)行長5.0 m，行距0.6 m，每份試驗材料種6行區(qū)，每穴留雙株，穴距25 cm。前茬作物為小麥，玉米于6月中下旬播種，7月上旬定苗，7月中旬施玉米高氮復合肥376 kg/hm2。

定苗時每處隨機取樣30株，調(diào)查記錄玉米生長情況，包括株高、穗位高、植株顏色、葉片顏色、根系是否感?。挥衩紫炇旌笃谥鹬暾{(diào)查鑒定材料的發(fā)病情況，調(diào)查的重點部位為莖基部節(jié)位，莖基部節(jié)位明顯變褐或用手指捏近地表莖節(jié)感到變軟的植株，即為發(fā)病株[1]。記載調(diào)查總株數(shù)、發(fā)病株數(shù)，計算發(fā)病株率。

根據(jù)王曉鳴老師等編著的《玉米病蟲害手冊》[2]鑒定標準，對玉米青枯病病害進行田間調(diào)查。依據(jù)植株表現(xiàn)的癥狀劃分單株的病級數(shù)，再根據(jù)所劃分的單株病級數(shù)計算發(fā)病株率，其公式為發(fā)病株率（%）=發(fā)病株數(shù)/調(diào)查總株數(shù)×100。最后評價其病情指數(shù)；抗性評價標準采用國家玉米品種抗病鑒定標準[3-4]；病級分級采用5級制（表1）。

1.2.2 試驗室接種鑒定方法[5]。青枯病菌（禾谷鐮刀菌）在PDA培養(yǎng)基上擴繁。

PDA培養(yǎng)基配方為馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，水1 000 mL，120 ℃滅菌30 min。

青枯病圃于6月10日播種，每個品種種植2行，行長5.0 m，行距0.6 m。參試品種及對照品種隨機排列，試驗周圍種成保護行。

青枯病菌擴繁后，散粉期（8月6日）用灌根法接種，每株在植株的根側接種孢子液100 mL（將各小種混合接種）。適當澆水，以保證足夠的土壤含水量和病菌量，滿足禾谷鐮刀菌發(fā)病條件和發(fā)病環(huán)境。

玉米進入乳熟期后開始進行調(diào)查，抗性評價標準同“1.2.1”。

2 結果與分析

由表2的田間調(diào)查結果可知，在相同的栽培條件下，不同的玉米品種對青枯病的抗病能力有明顯差異[6]。

在供試的材料中隨機選出8份自交系和26份群體材料，分析其對青枯病抗性的接種鑒定結果（表3）。

綜合大田自然鑒定、接種鑒定的方法在所供試的25份玉米自交系和61份群體材料中，篩選出9份表現(xiàn)抗?。≧）以上的自交系及26份表現(xiàn)3級抗病（R）以上的群體材料。3級抗病以上的種質(zhì)數(shù)量占43.75%。鑒定結果表明，不同玉米種質(zhì)資源對青枯病的抗性存在明顯差異，只有極少數(shù)的群體材料表現(xiàn)高度抗病，大多數(shù)玉米種質(zhì)資源對青枯病病菌表現(xiàn)為抗病或中度抗病[4]。

3 結論與討論

（1）2013—2014年，新鄉(xiāng)市農(nóng)業(yè)科學院生物技術研究所利用大田自然鑒定和禾谷鐮刀菌接種鑒定方法，對86份玉米種質(zhì)資源在黃淮海區(qū)進行青枯病抗性鑒定與評價，抗病種質(zhì)可作為玉米抗青枯病育種的核心抗源，具有重要的利用價值。多數(shù)種質(zhì)資源的抗病性集中在3級和5級，為抗病和中度抗病材料，未發(fā)現(xiàn)有9級（高感）的材料。

（2）玉米青枯病在我國玉米主產(chǎn)區(qū)危害性較大，已成為玉米生產(chǎn)中主要的產(chǎn)量限制因素之一。玉米主產(chǎn)區(qū)每年的發(fā)病率在10%～20%，有些年份甚至達60%，玉米產(chǎn)量損失達25%。除產(chǎn)量下降外，玉米莖腐病的發(fā)生還給許多其他導致寄主產(chǎn)量下降的細菌提供了滋生的環(huán)境，在降低玉米品質(zhì)的同時對玉米生產(chǎn)也構成了極大的威脅。因此，對于該病的防治應予以高度重視[7]。

（3）應用抗病品種是控制玉米青枯病發(fā)生經(jīng)濟、有效的途徑之一，而鑒定、篩選抗病種質(zhì)資源是成功選育抗病品種的關鍵措施。因此，應廣泛收集國內(nèi)外遺傳上異質(zhì)、抗病、高配合力的種質(zhì)資源，發(fā)掘具有抗玉米青枯病基因的種質(zhì)資源加以綜合利用，豐富玉米資源的基因庫。此外，應加強栽培管理，合理灌溉分期培土，及時中耕松土，避免各種機械、人工損傷。收獲后，及時徹底的清除田間病殘植株，減少病源。注意雨季，遇大雨時要及時排水，防止雨水浸泡根莖時間過長造成病菌的快速發(fā)生。

參考文獻

[1] 商鴻生，王鳳葵.玉米高梁谷子病蟲害診斷與防治原色圖譜[M].北京：金盾出版社，2005.

[2] 王曉鳴，石潔，晉齊鳴，等.玉米病蟲害田間手冊：病蟲害鑒別與抗性鑒定[M].北京：中國農(nóng)業(yè)科學技術出版社，2010.

[3] 崔俊明，胡素蘭，謝榮芝，等.玉米青枯病發(fā)病影響因素分析[J].河南農(nóng)業(yè)科學，1993（5）：16-19.

[4] 李春霞，蘇俊，龔士琛，等.玉米莖腐病接種方法的研究[J].玉米科學，2001，9（2）：72-74.

[5] 王波，馬曉靜.玉米新組合莖腐病抗性鑒定的分析[J].安徽科技學院學報，2011，25（2）：18-23.

[6] 王曉鳴.玉米抗病蟲性鑒定與調(diào)查技術[J].作物雜志，2005（6）：53-55.

[7] 劉愛國，張成和，石潔.玉米雜交種對多種病害抗性鑒定結果初報[J].華北農(nóng)學報，2000，15（S1）：85-89.